微生物培养标本留取的注意事项

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痰培养标本采集与运送标准操作规程

1 采集目的 一般用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养监测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的监测。

2 一般原则

2.1采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。

2.2宜采集清晨第二口痰液。

2.3对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天一次，连续2～3天。

2.4怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。

3采集方法

3.1自然咳痰法与雾化导痰法：准备无菌容器、生理盐水、检验申请单；核对患者床号、姓名等；无痰或痰量极少者可用3%～5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5分钟后留取痰液； 应在医护人员直视下留取清晨第二口痰，告知患者留取前摘取牙托，清洁口腔如刷牙后反复用生理盐水漱口，深吸气后用力自气管深部咯出痰液，置无菌容器内。

3.2 经人工气道吸引法：准备负压吸引器、生理盐水、一次性吸痰管、无菌手套、无菌容器、化验单；核对患者床号、姓名等；将患者头部转向操作者一侧；进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器适宜负压；打开一次性吸痰管外包装，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅；缓慢插入患者气管致隆突水平，一头接电动吸引器，螺旋式抽吸，吸引痰液；将痰液注入无菌容器内。

4运送与保存

4.1 应在2小时之内送至实验室，否则应4℃冷藏，但放置时间不得超过24小时。

4.2 运送标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。

4.3安全防护，盛放标本的容器必须防渗漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。

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尿培养标本采集与运送标准操作规程

1采集指征 有典型的尿路感染症状；肉眼脓尿或血尿；尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性；不明原因的发热，无其他局部症状；留置导尿管的患者出现发热；膀胱排空功能受损；泌尿系统疾病手术前。

2采集方法

2.1普通中段尿采集最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后，女性采样前用肥皂水或0.1％高锰酸钾溶液冲洗外阴部尿道口（男性须翻转包皮冲洗），用0.1％新洁尔灭或碘伏消毒尿道口，灭菌纱布擦干；开始排尿，将前段尿排去，中段尿约10～20ml直接排入专用的无菌容器中，立即送检，2h内接种。

2.2留置导尿尿标本采集培养前，有条件者可夹管4～5小时以上，使细菌有足够的时间繁殖，以提高阳性率。采样时应松管弃去前端尿液，左手戴无菌手套固定导尿管后，按中、左、右、中的顺序，严格消毒尿道口处的导尿管壁，用无菌注射器针头斜穿管壁抽吸尿液。不可打开导尿管和引流管连接处收集标本。

2.3耻骨上膀胱穿刺法使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“ 金标法”，尤其做厌氧菌检查时必须采用膀胱穿刺法。但本法有一定的痛苦，患者难以接受。穿刺时膀胱应充盈，皮肤严格消毒后用装有19或20号针头的注射器在耻骨联合距脐1/3处穿刺。主要用于厌氧菌培养标本的采集。

3标本运送

3.1标本采集后应及时送检并接种，室温下保存时间不得超过2h,如果不能及时运送或接种，4℃冷藏保存时间不得超过8h，注意冷藏保存的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。

4注意事项

4.1不应从集尿袋中采集尿液。

4.2尿液中不加消毒剂或防腐剂。

4.3若尿液培养前患者曾使用抗菌药物，应多次送检。

4.4多次采集或24小时尿不用于尿液培养。

4.5除非进行流行病学调查，不应对长期留置导尿管患者常规进行尿培养。

4.6 培养结果应结合临床表现、菌落计数及微生物种类等，进行综合判断。

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手术切口标本采集与运送标准操作规程

1采集指征 手术切口部位有红、肿、热、痛等感染征兆或怀疑有切口感染时。

2采集方法

2.1注射器穿刺抽取，抽吸前用生理盐水或75%酒精擦去表面分泌物，以避免污染。

2.2未溃破脓肿用消毒液消毒皮肤，待消毒液干燥后用无菌注射器抽取脓液送检或切开排脓时用无菌棉拭子采样。

2.3排出注射器内部及针头的气体，用无菌橡皮塞封闭针头送检，或直接打入血培养瓶中，疑为厌氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中。

2.4组织和活检标本，采集足够大的组织，体积以1mm3为宜，避免在坏死区采集；将小块组织放在培养基内，较大的可放入无菌容器中，并加入少量无菌生理盐水。

2.5开放伤口，无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物或碎屑；用试子深入伤口的基底部或伤口与正常组织边缘部采集两个标本，分别用于培养和革兰氏染色。

3标本运送

3.1所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在２小时内。如果不能及时送检应在室温保存，但不要超过24小时。

3.2送检标本应注明来源、检验目的和采样时间，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

3.3以棉拭子采集的标本，宜插入运送培养基内送检。

3.4厌氧培养标本需保持厌氧状态运送，使用专用运送培养基或用针筒抽取标本后排尽空气,在针头上置无菌橡皮塞后运送。

3.5最佳的临床标本送检，包括厌氧菌培养标本，运送时间与原始标本的量有关，标本量少应加快运送，要在采集后的15－30分钟内送检。

3.6送检期间要予以安全防护，盛放标本的容器必须防渗漏，禁止将渗漏的标本送往实验室；严禁将带有裸露针头的注射器送往实验室。

4注意事项

4.1标本避免干燥。

4.2厌氧菌标本避免与空气接触。

4.3采样前局部避免使用抗菌药物。

4.4如使用消毒液消毒皮肤，须待其干燥后采样。

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脑脊液标本采集与运送标准操作规程

1.采集指征 不明原因的头疼，有脑膜炎症状，临床怀疑有脑膜炎感染患者。

2.采集方法 按腰椎穿刺操作流程采集脑脊液，每种检验需要最小量：细菌培养≥lml，真菌≥2ml，抗酸杆菌≥2ml。放入无菌试管中送检。

3.标本运送标本采集后应置于无菌试管内立即送检，脑脊液送检最佳时间为15min以内，送检时间超过1h，则会影响结果，脑脊液标本不可冷藏。

4注意事项

4.1标本未收集于无菌管、送检延误、冷藏保存，则拒收标本，通知临床要求重新采集标本。

4.2某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡。

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粪便标本采集与运送标准操作规程

1采集指征 粪便涂片镜检白细胞≥5个/HP；重症腹泻，体温大于38.5℃；血便；便中有脓液；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者；来自疫区的患者。

2采集方法

2.1自然排便法 直接留置粪便标本于清洁、干燥广口容器中送检。注意若有脓血、粘液、组织碎片，则取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便2g～3g，液体粪便则取絮状物，一般取1ml～3ml。

2.2直肠拭子法 用无菌拭子插入肛门2cm～4cm，轻轻旋转拭子，可在拭子上明显见到粪便，插入运送培养基内，立即送检。本法适用于排便困难患者或婴幼儿，不推荐使用拭子做常规性病原菌培养。

3标本运送标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存≤2h。如采便后2h内未培养,标本应放入运送培养基中4℃冰箱保存，保存不超过24h。

4注意事项

4.1粪便标本验收与拒收，采用一次性无菌杯，杯盖严密，无明显灰尘纸屑，留取时间符合要求者为合格标本；否者为不合格标本应拒收。

4.2当怀疑沙门菌、志贺菌、弯曲菌以外的细菌引起的腹泻时，临床医生必须通知实验室，因为分离弧菌、耶尔森菌、气单胞菌、大肠埃希菌O157:H7需要特殊的实验程序和培养基。

4.3粪便标本一般不做厌氧菌培养。

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脓液标本采集与运送标准操作规程

1采集指征 局部组织或器官有化脓性感染表现，应进行细菌培养。

2采集方法

2.1开放脓肿用无菌盐水或 70％酒精擦去表面渗出物，用拭子伸入溃疡基底部

或边缘部，采集两个拭子，分别做培养和革兰氏染色，也可对渗出物做需氧培养。

开放病灶不做厌氧菌培养。

2.2闭锁脓肿不能用拭子，要消毒脓肿表面皮肤后用无菌注射器抽取，刺入无菌

橡皮塞中送检。

2.3烧伤创面清创、出现渗出物后用拭子用力采集，仅做需氧培养。

2.4 脓疱或水疱酒精消毒，干燥，用针头挑破脓疱，用拭子采集脓疱液和基底部

标本。

3标本运送和验收

3.1标本采集后应尽快送检，如果在 1h 内不能送检，应将标本冷藏。

3.2标本验收与拒收标本拭子未装入无菌容器内或注射器渗漏污染者；送检时间

过长者应拒收。标本涂片革兰染色若发现上皮细胞，提示标本已被污染，一般不

适合再做培养。

4注意事项 对大多数开放伤口，采集前应先清创，去除表面菌群，除非有渗出物；

干燥、 结痂伤口一般不做培养；闭合脓肿应取穿刺物和脓肿壁标本；开放脓肿处

理同开放性伤口，不仅仅送检脓液，应在病灶活动区域或基底部采集标本，最好有组织标本。

草莓小花朵

乔-乔 发表于 2017-6-11 21:57
“11、胆汁：由专科医生以无菌方法取引流液10ml注进无菌试管。”
--引流液不适于细菌培养，除非是初次引 ...

正有此疑问比如都已经引流两三天了，再抽引流液，会不会加大逆行性感染的风险

草莓小花朵

guoli2008 发表于 2017-6-12 09:00
3、尿道分泌物:男性患者用75%酒精棉球消毒尿道外口后，这样的方法不影响培养结果吗

不影响啊，去除掉表面寄居菌，就算查到了寄居菌也没有指导意义

ynosmile

学习了老师的内容，把我们做的sop发上，哪位老师发现有不同意见，请交流，谢谢！

guoli2008

75%酒精消毒男性尿道口，能做到吗?酒精的刺激性那么大，可以用于这个部位吗

guoli2008

个人认为用清水清洗就可以了

石榴花语66

下载学习了，也作为学习资料传给临床了，让他们也学习一下，必定采样是他们去操作，更要严格掌握，谢谢老师的分享。

qqyff

学习了，谢谢老师分享！

中原一点红

谢谢各位老师的分享，路过学习了。

jcyyhlb

学习了，谢谢老师的资料分享！

乔-乔

ctyyy 发表于 2017-6-12 09:56
正有此疑问比如都已经引流两三天了，再抽引流液，会不会加大逆行性感染的风险

这个倒不会，无菌操作不会增加风险逆行感染

aijun1973

学习了，谢谢老师分享！

lyluoxiuhua

已经收藏备用！非常感谢老师的资料分享！您辛苦了！

jara

感谢老师分享，路过学习了。

xsj067

谢谢各位老师的分享，路过学习了