关于隐血实验
隐血是指消化道出血量很少,肉眼不见血色,而且少量红细胞又被消化分解发致显微镜下也无从发现的出血状况而言。
隐血试验(occult blood test,OBT)目前主要采用化学法。如邻联甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、匹拉米洞法,无色孔雀绿法、愈创木酯法等。
实验设计原理:基于血红蛋白中的含铁血红素部分有催化过氧化物分解的作用,能催化试剂中的过氧化氢,分解释放新生态氧,氧化上述色原物质而呈色。呈色的深浅反映了血红蛋白多少,亦即出血量的大小。
经上试验方法虽然原理相同,但在实际应用中却由于粪便的成分判别很大,各实验室具体操作细节如粪便取材多少,试剂配方、观察时间等不同,而使结果存在较在差异。多数方献应用稀释度的血红蛋白液对这些方法灵敏度的研究表明,邻苯甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法最灵敏,可检测出0.2-1mg/L的血红蛋白,只要消化道有1-5ml的出血就可检出。还原酚酞法由于试剂极不稳定,放置可自发氧化变红而被摒弃。高度灵敏的邻联甲苯胺法常容易出现假阳性结果,中度灵敏的试验包括联苯胺法、无色孔雀绿法,可检出1-5mg/L的血红蛋白,消化道有5-10ml出血即为阳性。联苯胺法由于有致癌作用而无色孔雀绿法在未加入异喹啉时灵敏度差,需(20mg/L血红蛋白,)试剂配制和来源均不如拉米洞方法方便。愈创木酯法灵敏度关,需6-10ml/L血红蛋白才能检出,此时消化道出血可达20ml但假阳性很少,如此法为阳性,基本可确诊消化道出血。
以上各种隐血试验化学法虽简单易行,但均基于血红蛋白中的血红素可促使又氧水分解释放新生态氧,使色原物质氧化这一原理,方法上缺乏特异准确性。此外化学试剂不稳定,久置后可使反应减弱。外源性动物仪器如含有血红蛋白,肌红蛋白、其血红素的作用均可使试验呈阳性,大量生食蔬菜中含有活性的植物过氧化物酶也可催化双氧水分解,出现假阳性反应。
干扰隐血试验亦可由于检验人员取材部位不同,标本反应时间不同,检验员对显色判断不同,故在不同一方法的试验中,还可产生误差等,致使目前国内外尚无统一公认的推荐的方法,更谈不到实验的标准化。
由上面的资料可以看出:隐血实验是医院检验科一种用于检测人体消化道隐性出血(主要是上消化道出血)的一种方法,它的检测对象是血红蛋白中的血红素。这是一种传统的方法,有较高的灵敏度,但是其所受干扰因素也很多,很容易出现假阳性。以前使用最多的是联苯胺法,是一种很便宜,稳定性也较好的方法。不过由于联苯胺有很强的致癌性,已经是不允许使用的;但是较多多医院现在仍然在使用联苯胺法。
这两年医院有将隐血实验应用于手术器械的清洗后洁净度的检测,有一定的反响。但是这中方法有一定的争议,实验也存在很多的干扰因素。如下面所述:
1、 手术器械上面的污染物最容易清洗的是血液,而更难以清洗的是蛋白质、脂肪。但是隐血实验只针对血液残留有效,所以在检测对象上的选择是不太合理的。
2、 隐血实验所检测的对象是血红蛋白中的含铁血红素,所以铁离子可以引起假阳性结果。所以如果使用这种方法来检测含铁元素极高的不锈钢器械时,就很容易出现假阳性结果。
3、 隐血实验是一种检测实验,所以检测人员一定要经过相关的培训才行。
4、 隐血实验的显色一定要在白色的底色物质(如纱布或者棉签)上才行,所以一定要保证这些底色物质的洁净度。
[此贴子已经被作者于2007-5-15 21:07:09编辑过]
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