倪教授为大家答疑解惑——风雨过后如何防霉制霉10问，分别从真菌的感染来源、真菌特点、真菌标本采集注意事项等全方位讲解如何防霉制霉，满满的干货哦！
1、台风与雨季过后，为什么室内环境容易出现霉菌生长的现象？
目前，已经命名的真菌至少有10万种，但仅占环境中的1%～10%，而能够感染正常个体的不足50种。然而，由于越来越多的环境中的真菌成为条件致病菌，导致免疫力不全或低下的宿主发生严重或致命的疾病，且临床抗真菌用药受限，从而使人们关注真菌污染的环境整理与控制。临床上真菌的感染来源主要分为外源性和内源性。引起外源性的真菌广泛存在于土壤、植物、空气、水、动物皮毛即粪便中，可以通过呼吸道、消化道、黏膜即伤口入侵机体而发生感染。内源性感染的真菌寄生于人体的消化道、皮肤和生殖道等处，这类真菌对于健康人一般不致病。由于真菌属于异养菌生物（缺乏叶绿素），故需要现成的有机物作为其的异养。而影响真菌生长的其他因素包括，有氧条件、湿度、温度等，这些影响因素与普通细菌基本相同，通常对于微生物而言，从RH 0%～100%都可能存活，或处于繁殖或处于停止繁殖的阶段，但是RH 50%对于绝大多数的微生物而言，其死亡率是最高的，是最不利于其存活的因素。从图1a、1b可以看到，无论细菌，还是病毒其存活率是最低的，通常10min～15min即可以死亡。湿度对真菌生长的影响尤为显著，但环境湿度≥RH 60%时，无需温度要求，真菌便可以大量、快速生长。
由于台风雨季的到来，空气中的湿度便会快速升高，为真菌生长提供了一个很好的环境条件；尤其是漏雨漏水造成墙面、家具表面的受潮，这相对于给那些处于“睡眠”状态的真菌“浇水”助长，仅数日时间，墙面、家具面板上如同“雨后春笋”般的大片“霉斑”出现。当然，雨水也会夹带着一些外来的真菌的孢子，污染被雨水渗透的表面。
真菌有核膜形成的细胞核，属于真核生物；细菌没有细胞核，只有拟核，属于原核生物。细胞是由单个细胞构成，为单细胞型生物；真菌既有单个细胞构成的，也有多个细胞构成的多细胞型生物。真菌是一类独立的真核生物群，有坚硬的细胞壁包裹，细胞分裂形式是减数分裂或有丝分裂。真菌的存在形式是多细胞或单细胞。多细胞真菌的基本结构单元为一连串的多核的、管状、丝状细胞（称为菌丝）。霉菌是指在显微镜下观察以多细胞菌丝体形式存在的真菌，简言之霉菌就是丝状真菌。
细菌的细胞壁的主要成分是肽聚糖，而真菌细胞壁的主要成分是几丁质。从真菌对消毒剂的抗性研究显示，真菌对于消毒剂的抗力介于细菌的繁殖体与非包膜病毒（如肠道病毒）之间，远低于分枝杆菌（见图2）。
上述微生物对消毒剂抗性顺序可以作为消毒剂选择的依据，据此对真菌的环境消毒，可选择中水平及以上的消毒剂，具体如何使用见后。
真菌标本的采集与细菌基本类同，唯一的差别在于真菌标本的标本量要大于细菌，这是为了提高真菌的检出率，通常在标本接种于培养基前需要浓缩或预处理。普通棉拭子采样的真菌分离率较低，因此，不推荐表面采样采用棉拭子。为了提高环境表面真菌采集的效果，有文献推荐采用高分子纤维拭子，或采用平皿接触法，即RODAC技术可提高环境真菌孢子的捕获率；另外，也有文献提出为了提高环境表面真菌孢子的采集率，使用吸尘器采样。
真菌的适应性很强，但是由于某些真菌在高于37℃或低于10℃的环境中生长会受到影响，因此，推荐标本在室温下运送。如果标本不能在2h内运送至实验室，则应保存于4℃。
普通的琼脂平板直接放入培养箱孵育易造成环境污染，且水分丢失快，不利于真菌生长。因此，有实验室采用将平板单独密封或放入塑料袋内，以避免环境污染与水分丢失。推荐采用专用的、有自动湿度调节的生化培养箱用于真菌孵育。
真菌病原体的成功回收取决于诸多因素，包括选择适合的标本、高质量标本的采集和运输、标本的预处理、接种和孵育的培养基（初代培养基、选择性/鉴别培养基和特殊培养基等）、适合的孵育温度和充分的孵育时间等。初始病原学检测有多种培养基可以选择，很多实验室选用真菌培养基取决于实验人员的经验。值得注意的是，类似于细菌培养，不存在某种单一的真菌培养基足以检出所有临床上常见的真菌。因此，日常的真菌培养基需要是多种培养基组合。
抑制细菌生长而允许真菌生长的培养基，可用于可能含有大量细菌的非无菌标本，如含有抗生素的BHI和Sabhi培养基，以及霉菌抑制琼脂平板等。放线菌酮是多款初代培养基的组成成分，可抑制腐生真菌，也可以抑制部分霉菌属、部分念珠菌属、隐球菌属等。不含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂（SDA）可用于初代菌的培养。霉菌抑制培养基是更好的选择，因为它比SDA能更有效地抑制细菌生长。另外，筛查特定病原体可以不采用组合式培养法，如排出性念珠菌，可采用酵母菌选择性和显色培养基。目前，真菌培养基已经商品化，各实验室可以根据临床需要进行选购。
已接种标本的真菌培养基应在有氧条件下30℃孵育，如果没有30℃培养箱，也可选用25℃培养箱。培养时间的长短取决于真菌的种类，通常念珠菌属培养时间72h；皮肤癣菌8d；筛查所有病原体的培养时间4w；有一项独立研究建议常见的临床真菌培养3w足够了。培养前两周内，应每隔2d～3d观察一次，之后每周一次观察。
临床真菌的常规诊断包括，在染色加基础上直接显微镜检查，抗体检测、抗原检测、特异性代谢产物检测、质谱分析法（MALDI-TOF）和核酸检测等。真菌的分类主要依据形态特征，不同于细菌多依靠生理生化的特性进行分类。然而，近年来DNA测序技术的引入给真菌分类学带来了一场革命。
这涉及医院设计与建设过程中的工程控制（engineer control）的范畴，即我们在设计与建设医院的过程中，尤其是一些重点科室，如手术室、ICU、新生儿病房、移植病房、CSSD无菌物品储存间等处，内部装饰应选用不易长霉的材料，诸如不锈钢、铝合金、玻璃等，从源头上控制长霉的工程控制措施。梅雨季节来临前，应组织有关部门人员进行全面排查漏雨渗水的地方，发现隐患及时处理，做到防范于未然。梅雨季节中和过后也应随时组织人员，及时发现漏雨渗水的迹象，并立即采取整改措施进行补救，做到消除于萌芽状态。
另外，各个临床科室的人员也要求人人参与环境整理，有责任发现发霉现象应立即报告相关人员与部门，采取积极的控制措施，预防事态的进一步扩大，为后期的整理工作增加难度。
日常工作中应关注环境湿度的控制，就真菌生长的湿度因素，应尽量将环境湿度控制在RH 60%之内，最佳为RH 50%。因此，在隐患排查中还应关注空调系统中除湿功能，及时进行维护排障。对一些不带有除湿功能的空调所涉及的区域，推荐采用移动式除湿机。 | 
