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[求助] 做物表监测时,何时用涂抹法?何时用倾注法?(请见6楼发言)

 火... [复制链接]
发表于 2011-6-7 10:41:11 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 拙凌 于 2011-6-16 08:17 编辑

请问在院感监测中,做物表监测时,什么时候用平皿涂抹法?什么时候用倾注法?两种方法在效果在有何区别?

拙凌按:一直以来,实验室对于物表监测的培养方法持两种观点,一种认为应该使用传统的倾注法,一种认为使用平皿涂抹法也可以。那么两种方法的优劣到底在何处呢?6楼二进制老师给出了详细的说明。

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拙凌 + 2 + 2 认真思考,好问题!

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发表于 2011-6-14 05:36:09 | 显示全部楼层
这是视情况灵活掌握,倾注法是标本菌落计数测定法的鼻祖。平皿涂抹法细菌长在琼脂表面;倾注法则长在其中。
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发表于 2011-6-14 13:09:47 | 显示全部楼层
回复 2# 二进制

您能具体谈谈怎么个“视情况”而定呢?
   
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发表于 2011-6-15 05:39:27 | 显示全部楼层
本帖最后由 二进制 于 2011-6-15 05:46 编辑

加样接种时,涂抹法所用平板事先准备好的;而倾注法所需琼脂温度要恰到好处,既不能过热,也不可过冷让其凝固,这就牵涉人手方面的问题。谢谢
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发表于 2011-6-15 08:01:39 | 显示全部楼层
回复 4# 二进制

这两种方法对最终的细菌生长有没有什么影响呢?比如,是否会有某种细菌可能在琼脂中生长而不在琼脂表面生长?
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发表于 2011-6-16 06:11:21 | 显示全部楼层
高压灭菌、新鲜配制平板琼脂内部,气体(包括氧)含量非常之低、几乎没有;一时间段后,空间气体(包括氧)逐步溶解其中。开始时,接种其中的标本内厌氧菌从生长…抑制……不能继续生长小菌落(在琼脂中形成一个可用肉眼看见的小点);而兼性厌氧菌或需氧菌则与之相反。但,同样在琼脂形成一个可见的小菌落。这样,真实反映出标本内全部细菌菌体数量。而平皿涂抹法厌氧菌绝不可能形成可见小菌落,好处只是能挑取可疑菌落作进一步鉴定及操作方便些而已。因故,倾注法不愧为标本菌落计数的鼻祖、无以代替的金标准方法。感谢!

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 楼主| 发表于 2011-6-21 11:02:33 | 显示全部楼层
[b]谢谢二进制老师的赐教!
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发表于 2011-7-7 00:09:50 | 显示全部楼层
看下面这篇文章,相信能给很多同道解惑!!![b]回复 6# 二进制


3种细菌采样方法捕获力的对比研究[1].pdf (97.88 KB, 下载次数: 97)
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发表于 2011-7-7 00:26:25 | 显示全部楼层
回复 8# 野渡无人



我一直想找这方面的资料,谢谢野渡斑竹提供分享。
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发表于 2011-7-7 00:33:32 | 显示全部楼层
为了便于大多数同道浏览,将摘要复制下来:
目的 对常用的细菌采样方法的采样效率进行对比。方法 分别用棉拭子采样倾注培养法、棉拭子采样直接涂抹接种于营养琼脂法以及 RODAC印压法 3种常用的细菌采样方法 ,对不同菌液浓度制备的实验菌板和保洁后医院环境进行采样、培养、计数 ,比较采样效果。结果 当制备菌板的菌浓度为 10 8~ 10 5CFU/ m l时 ,用倾注法采样 ,菌落数可通过稀释较准确的获得 ,而 RODAC和涂抹法采样则菌落连成片 ,无法计数 ;当制备菌板的菌浓度为 10 4 ~ 10 2 CFU / m l时和保洁后医院环境采样 ,RODAC法对细菌的捕获力优于倾注法和涂抹法 (P <0 。0 5 )。结论 倾注法适用于物体表面细菌量多时采样 ;而细菌量少时 ,RODAC方法优于倾注法和直接涂抹法。
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发表于 2011-7-7 00:42:35 | 显示全部楼层
但要注意这一点:物表上的厌氧菌存活的概率和时间是较小(短)的!!回复 6# 二进制
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发表于 2011-7-7 06:38:45 | 显示全部楼层
本帖最后由 二进制 于 2011-7-7 09:50 编辑

回复 11# 野渡无人

野渡无人版主老师:文章拜读,对您说一声:感谢!
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发表于 2011-7-7 08:03:21 | 显示全部楼层
回复 11# 野渡无人


    谢谢野渡版主,想问一下RODA法是指用棉拭子采样100CM2 然后再直接压印在RODAC平板上吗?我们现在做的是按《医院环境卫生学监测》中的直接压印法进行采样“压印法:采用一直径为5.6cm(面积约为25cm2)的平皿,倾注营养琼脂培养基,使培养基高出平皿口1~2mm,凝固后置4摄氏度冰箱保存待用。检测时将平板上的培养基表面压贴在物体上10~20秒,送检”

  不知道这是不是您文中提到的RODAC平板,具体的方法能为我们介绍一下吗?棉拭子采样的面积是多少?采样完了是按压棉拭子的一个面还是多个面?棉拭子是否要浸湿?
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发表于 2011-7-7 09:18:44 | 显示全部楼层
RODAC平板就是接触平板!RODAC印压法就是《医院环境卫生学监测》中的直接压印法!!
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发表于 2011-11-27 15:05:02 | 显示全部楼层
直接压印法不错,但这种平板很难倒的吧?一定要用5.5cm的吗,常用的9cm应该也可以吧,换算一下就可以了吧,请赐教,谢谢
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发表于 2017-4-14 10:38:09 | 显示全部楼层
为什么没有讨论了???最近正在学习
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发表于 2017-4-16 08:22:26 | 显示全部楼层
学习了,原来培养还有这么多讲究
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发表于 2017-4-24 08:13:52 | 显示全部楼层
学习了,两位老师精彩的对话,很有帮助。
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发表于 2018-12-2 20:16:44 | 显示全部楼层
按照GB15982-2012要求,应该用倾注法。
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发表于 2018-12-3 06:34:06 | 显示全部楼层
艾丽斯 发表于 2018-12-2 20:16
按照GB15982-2012要求,应该用倾注法。

倾注法为鼻祖法。谢谢!
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