做物表监测时，何时用涂抹法？何时用倾注法？（请见6楼发言）

微小生物

请问在院感监测中，做物表监测时，什么时候用平皿涂抹法？什么时候用倾注法？两种方法在效果在有何区别？

拙凌按：一直以来，实验室对于物表监测的培养方法持两种观点，一种认为应该使用传统的倾注法，一种认为使用平皿涂抹法也可以。那么两种方法的优劣到底在何处呢？6楼二进制老师给出了详细的说明。

二进制

这是视情况灵活掌握，倾注法是标本菌落计数测定法的鼻祖。平皿涂抹法细菌长在琼脂表面；倾注法则长在其中。

拙凌

回复 2# 二进制

您能具体谈谈怎么个“视情况”而定呢？
   

二进制

加样接种时，涂抹法所用平板事先准备好的；而倾注法所需琼脂温度要恰到好处，既不能过热，也不可过冷让其凝固，这就牵涉人手方面的问题。谢谢

拙凌

回复 4# 二进制

这两种方法对最终的细菌生长有没有什么影响呢？比如，是否会有某种细菌可能在琼脂中生长而不在琼脂表面生长？

二进制

高压灭菌、新鲜配制平板琼脂内部，气体（包括氧）含量非常之低、几乎没有；一时间段后，空间气体（包括氧）逐步溶解其中。开始时，接种其中的标本内厌氧菌从生长…抑制……不能继续生长小菌落（在琼脂中形成一个可用肉眼看见的小点）；而兼性厌氧菌或需氧菌则与之相反。但，同样在琼脂形成一个可见的小菌落。这样，真实反映出标本内全部细菌菌体数量。而平皿涂抹法厌氧菌绝不可能形成可见小菌落，好处只是能挑取可疑菌落作进一步鉴定及操作方便些而已。因故，倾注法不愧为标本菌落计数的鼻祖、无以代替的金标准方法。感谢！

微小生物

[b]谢谢二进制老师的赐教！

野渡无人

看下面这篇文章，相信能给很多同道解惑！！！[b]回复 6# 二进制


3种细菌采样方法捕获力的对比研究[1].pdf (97.88 KB, 下载次数: 98)

2011-7-7 00:09 上传

点击文件名下载附件

望星空

回复 8# 野渡无人



我一直想找这方面的资料，谢谢野渡斑竹提供分享。

野渡无人

为了便于大多数同道浏览，将摘要复制下来：
目的　对常用的细菌采样方法的采样效率进行对比。方法　分别用棉拭子采样倾注培养法、棉拭子采样直接涂抹接种于营养琼脂法以及 RODAC印压法 3种常用的细菌采样方法 ,对不同菌液浓度制备的实验菌板和保洁后医院环境进行采样、培养、计数 ,比较采样效果。结果　当制备菌板的菌浓度为 10 8～ 10 5CFU/ m l时 ,用倾注法采样 ,菌落数可通过稀释较准确的获得 ,而 RODAC和涂抹法采样则菌落连成片 ,无法计数 ;当制备菌板的菌浓度为 10 4 ～ 10 2 CFU / m l时和保洁后医院环境采样 ,RODAC法对细菌的捕获力优于倾注法和涂抹法 (P <0 。0 5 )。结论　倾注法适用于物体表面细菌量多时采样 ;而细菌量少时 ,RODAC方法优于倾注法和直接涂抹法。

野渡无人

但要注意这一点：物表上的厌氧菌存活的概率和时间是较小（短）的！！回复 6# 二进制

二进制

回复 11# 野渡无人

野渡无人版主老师：文章拜读，对您说一声：感谢！

谷子

回复 11# 野渡无人


    谢谢野渡版主，想问一下RODA法是指用棉拭子采样100CM2 然后再直接压印在RODAC平板上吗？我们现在做的是按《医院环境卫生学监测》中的直接压印法进行采样“压印法：采用一直径为5.6cm(面积约为25cm2)的平皿，倾注营养琼脂培养基，使培养基高出平皿口1～2mm，凝固后置4摄氏度冰箱保存待用。检测时将平板上的培养基表面压贴在物体上10～20秒，送检”

  不知道这是不是您文中提到的RODAC平板，具体的方法能为我们介绍一下吗？棉拭子采样的面积是多少？采样完了是按压棉拭子的一个面还是多个面？棉拭子是否要浸湿？

野渡无人

RODAC平板就是接触平板！RODAC印压法就是《医院环境卫生学监测》中的直接压印法！！

raulsnoopy

直接压印法不错，但这种平板很难倒的吧？一定要用5.5cm的吗，常用的9cm应该也可以吧，换算一下就可以了吧，请赐教，谢谢

奶油哑巴豆

为什么没有讨论了？？？最近正在学习

一叶浮萍521

学习了，原来培养还有这么多讲究

院感搬运工

学习了，两位老师精彩的对话，很有帮助。

艾丽斯

按照GB15982-2012要求，应该用倾注法。

向阳花

艾丽斯 发表于 2018-12-2 20:16
按照GB15982-2012要求，应该用倾注法。

倾注法为鼻祖法。谢谢！