有关琼脂灭菌

童童

我们院感科每月拿培养基就是俗称”肉汤“来供应室灭菌，专门一锅。它是在121°的温度下灭菌的，可是我们的PCD检测就过不了，因为它是要求134°的温度的。那我们要用什么检测方法呢，现在都没办法存档了

炉师傅

使用含有121℃的指示卡的标准包来监测；
121℃的PCD成品还没有听说过；

童童

可否推荐一下呢，我都没听说过有这种指示卡，标准包要自己打包的吗？
刚看了论坛内容，说是脉动真空灭菌柜不能进行琼脂的灭菌，是这样吗？我们有一个程序P9是121°的，一直是用这个来灭菌的，这样可以吗

石桥wshh1975

4．4．2  压力蒸汽灭菌的监测
4．4．2．1  物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。温度波动范围在+3℃以内，时间满足最低灭菌时间的要求，同时应记录所有临界点的时间、温度与压力值，结果应符合灭菌的要求。
4．4．2．2  化学监测法
4．4．2．2．1  应进行包外、包内化学指示物监测。具体要求为灭菌包包外应有化学指示物，高度危险性物品包内应旋转包内化学指示物，置于最难灭菌的部位。如果透过包装材料可直接观察包内化学指示物的颜色变化，则不必放置包外化学指示物。通过观察化学指示物颜色的变化，判定是否达到灭菌合格要求。
4．4．2．2．2  采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品旁边进行化学监测。
4．4．2．3  生物监测法
4．4．2．3．1  应每周监测一次，监测方法见附录A。
4．4．2．3．2  紧急情况灭菌植入型器械时，可在生物PCD中加用5类化学指示物。5类化学指示物合格可作为提前放行的标志，生物监测的结果应及时通报使用部门。
4．4．2．3．3  采用新的包装材料和方法进行灭菌时应进行生物监测。
4．4．2．3．4  小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌包制作生物测试包或生物PCD，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放。
4．4．2．3．5  采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将一支生物指示物，置于空载的灭菌器内，经一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观察结果。
4．4．2．3．6  生物监测不合格时，应遵循4．4．1．4的规定。
4．4．2．4   B-D试验  预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器应每日开始灭菌运行前进行B-D试验，B-D试验合格后，灭菌器方可使用。B-D测试失败，应及时查找原因进行改进，监测合格后，灭菌器方可使用。
4．4．2．5  灭菌器新安装、移位和大修后的监测   应进行物理监测、化学监测和生物监测。物理监测、化学监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用，监测方法应符合GB 18278 的有关要求。对于小型压力蒸汽灭菌器，生物监测应满载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用。预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器应进行B-D测试并重复三次，连续监测合格后，灭菌器方可使用。
附录A（规范性附录）
压力蒸汽灭菌的生物监测方法
A．1  按照《消毒技术规范》的规定，将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片制成标准生物测试包或生物PCD，或使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测。标准生物监测包置于灭菌器排气口的上方或生产厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。如果一天内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。
A．2  具体监测方法为：将生物指示物置于标准试验懈的中心部位。标准试验包由16条41cm×66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23 cm ×23 cm ×15 cm大小的测试包。经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果。
A．3   结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。

炉师傅

童童 发表于 2012-8-13 20:28

                               
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可否推荐一下呢，我都没听说过有这种指示卡，标准包要自己打包的吗？
刚看了论坛内容，说是脉动真空灭菌柜 ...

请向指示卡厂家询问121℃指示卡的情况，他们会给你很多介绍的；
标准包要自己打包；
P9？洁定灭菌器吧？我记得这是没有真空过程的灭菌程序，只要灭菌时间合适，可以用于培养皿的灭菌的，你还是去查查操作手册上关于这个程序的说明吧；

童童

嗯，谢谢炉师傅！我们是倍力曼的灭菌器。

炉师傅

童童 发表于 2012-8-13 21:17

                               
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嗯，谢谢炉师傅！我们是倍力曼的灭菌器。

哦，是我弄错了；
这样，只要你确定使用的灭菌程序中没有真空过程，并且灭菌温度121℃，灭菌时间至少15min，不要超过20min，这样的程序就适用于普通琼脂的灭菌；

随和好学

现在的脉动真空灭菌器有121的灭菌程序，可以用来灭菌液体。
121度的化学指示卡市场上很普遍，自己做一个23X23X15的标准包，中间一层放一条121度化学指示卡即可。单个灭菌单位的监测无法实现，这里指液体程序，因此PCD的监测有一定的意义。