同源性分析技术专题之RFLP

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:01:42

月24日，我在超级细菌和多重耐药的版块讲解了PFGE技术，取得比较好的反响。
今天，利用休息，我继续讲解一下同源性分析技术中的RFLP技术。我觉得，同源性分析技术是医院感染暴发处理中的所需用到的重要技术，对于帮助我们判断是否为医院感染暴发起着重要作用。所以，今天把RFLP的技术介绍放到了医院感染暴发与处理版块。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:03:45

size=3]什么是RFLP？
中、英文全称是什么？

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:06:17

size=3]先来一个中文案例吧：
RFLP在布氏菌分型中的应用

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:08:24

size=3]先看看这篇文章的实验方法，请关注RFLP的实验步骤。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:10:37

size=3]再瞧瞧实验结果：
根据酶切结果将7 株菌株分成4 个基因型

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:14:27

size=3]再看看基因序列的分析结果，你有没有什么发现？

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:21:11

size=3]再来一个英文案例：
PCR-RFLP在MRSA医院感染暴发流行病调查分子分型中的应用

MRSA在我国各大医院均非常常见，因此，建议大家仔细看看这篇RFLP在MRSA中的应用的文章。非常有借鉴意义！

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:26:23

size=3]看看实验方法:
提一个问题，为什么同时扩增三个基因并酶切分型呢？

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:28:45

size=3]再看看RFLP的实验结果

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:30:39

size=3]这张表格更加清楚些，将RFLP与spa进行对比。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:32:27

size=3]再看看本文的结论，肯定了RFLP技术在MRSA中的分型。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:35:48

本文作者又提到，该研究小组在数年前专门就RFLP技术用于MRSA分型技术发表了一篇方法学的文章。

下面让我们来看一看这篇文章，看看老外是如何来进行一个方法学研究的。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:37:32

先看一看菌株的来源

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:41:32

在这里，我详细列出了RFLP的实验细节，为什么呢？

因为我考虑到该技术成本低，只要一台常规的PCR仪，就可以完成分型的操作。必竟，考虑到我国的实际情况，在大多数医院开展PFGE这样的金标准技术，是不太现实的。因此，我向基层医院推荐RFLP，容易开展，同时采用多个基因酶切分型可以提高该技术的分辨能力。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:43:35

看看人家考虑的因素，对我们的研究是否有启发呢？

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:45:54

看看A组菌株的分型对比，RFLP可以区分PFGE 14种型别中的10种，还算不错啊。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:47:19

B组的结果更佳呀，RFLP与RFLP的结果一致。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:49:15

再看看C组与D组的结果，RFLP与PFGE也是高度一致的结果啊。

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:51:12

最后看看本文的结论。

另外，这些英文的用词和句式，是不是也值得我们学习与模仿呢？

细菌耐药 · 发表于 2012-8-4 09:53:28

上全文：PCR_RFLP技术在布氏菌鉴定与分型中的应用

同源性分析技术专题之RFLP

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