[原创][分享] 介绍一种实用的培养基: 革兰阴性杆菌分科显色培养基

巴斯德之徒

该培养基是我在2002年时为改进细菌培养报告速度而专门研制的,可大大简化常见非营养苛求性G-杆菌的鉴定程序,缩短鉴定时间,如果配合酶法鉴定系统,可在24内完成全套培养,鉴定,药敏.该培养基在我的实验室已经应用5年了,积累起了丰富的数据.可以好不客气的说,非常实用,非常好用,菌落特征很典型——我可不是在"王婆卖瓜"哦!试试就知道了.
对使用过程中产生疑问的,本版免费提供技术支持!:lol :lol

对临床抱怨微生物室,细菌培养速度慢的医院有很大的治疗作用哦!;P;P    :lol :lol :lol


希望总斑竹也给咱奖奖?!


dissertation5.doc (58 KB, 下载次数: 74726)

2007-6-2 19:02 上传

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请珍惜资源

hxwsw

这是巴版主工作中经验的积累和对技术的革新，对于传统方法鉴定常见革兰阴性菌具有一定的应用价值！谢谢为大家提供分享！

巴斯德之徒

除了h版外,就没有其他朋友感兴趣了吗?:'(
难道就没哪个朋友想改进贵院的微生物检验的报告速度??4,5天出了培养报告就真那么合理?临床也没抱怨啥的?:funk:

野渡无人

酒香还怕巷子深？！:P 珍藏了！倡议各位大虾向巴斑竹学习：平中见奇！化腐朽为神奇！改革、创新！:run

叹息之墙

很感兴趣！请问斑竹：该平板革兰阳性菌生长情况如何？
斑竹是否将肠杆菌科：大肠埃希氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、摩根摩根菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、粘质沙雷菌，非发酵菌：铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌、恶臭假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、洛菲不动杆菌、粪产碱杆菌、脑膜炎败血黄杆菌。平板上生长的特异性菌落形态传些照片看看！

巴斯德之徒

回复#5朋友

既然是G-杆菌选择性培养基,G+菌自然是被有意抑制了的.

对于你所提的这些细菌的菌落特点,文献内已有介绍;至于图片,本版暂时不提供.如果你室有这些菌株,何不自己动手做做,将这些细菌配制成0.5麦氏浊度,接种环蘸取一环,分区化线,接种培养基,12~18h后观测菌落.亲手做的印象岂不更深?!

叹息之墙

请问版主，不知道哪里有供应啊？

巴斯德之徒

这是我的小发明,你以为我是在卖试剂作广告啊?
在文中有详细的配方和配制方法,自个配吧!

茉莉花

下载看看，对显色培养基，我很感兴趣，我们有几种科玛嘉的显色培养基，对其中的显色定位培养基最感兴趣，保留了许多已知菌的显色图片，我另帖发一个FLASH与大家分享！

qiuhaitang

谢谢巴斯德之徒老师的分享！

巴斯德之徒

原帖由 mts 于 2007-6-3 16:35 发表

                               
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很感兴趣！请问斑竹：该平板革兰阳性菌生长情况如何？
斑竹是否将肠杆菌科：大肠埃希氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、摩根摩根菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、粘质沙雷菌，非发 ...

mts版不是要看看菌落吗?现在有图片了.

https://bbs.sific.com.cn/viewthread.php?tid=2306&extra=page%3D1

txzhou

谢谢巴版提供的图片，这可得长时间摸索才能分辨自如呀！

巴斯德之徒

不是你想象的那样难，用着用这就清楚了。而且你会感觉它是越用越好用的。

microgene

:lol 牛人就是牛啊

xiangboshu

我有一个问题，其实对于肠杆菌科和非发酵的细菌，其实菌落本身就有些区别，在加上氧化酶，基本上就差不多八九不离十了。我们这里就是这样做的，第二天直接做生化和药敏，第三天出报告。特别是对于巴版这应该是个强项吧，那这个板的意义在哪里？

巴斯德之徒

原帖由 xiangboshu 于 2007-11-8 15:43 发表

                               
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我有一个问题，其实对于肠杆菌科和非发酵的细菌，其实菌落本身就有些区别，在加上氧化酶，基本上就差不多八九不离十了。我们这里就是这样做的，第二天直接做生化和药敏，第三天出报告。特别是对于巴版这应该是个 ...

不能光靠经验，要有证据！对于高年资老师来说是可以作到的，对于低年资人员呢？
还有你说的常见的细菌，对于不常见的呢？比如黏液性鲍曼和阴沟肠杆菌光靠菌落形态就不容易区别，又在有黏液性铜绿和荚膜高表达的臭鼻克雷伯菌也不好区别，对于这些怎么办？另外对于弧菌科和氧化酶阳性的非发酵菌你又如何区分？

再则，按规定在对一种G-杆菌进行种级水平的生化鉴定前必须要知道他究竟是肠杆菌？弧菌？还是非发酵菌？才能应用相应的鉴定系统（或相关鉴定卡），在传统情况下，这步需要做OF+氧化酶才能办到，但OF又需要多耽搁24~48h的时间，如果碰到是非发酵菌和肠杆菌混生的情况又什么办？另外有时候采用抗生素经验治疗后的G-杆菌其生长速度将会变慢，菌落变得粘着不易刮取，菌落也将变得比正常情况小，往往需要连续传代才能恢复本来形态，再有有很多细菌有S-R变异，谁能保证他的判断一定准确？就是我在微生物室工作了10年了也不能说100%就知道某细菌一定是哪个科哪个属。
正因为有这些情况的存在，但临床又要求加快报告进程，所以需要我们在方法科学系统不降低准确性的基础上来探讨如何“快速”，而采用多功能合并试剂简化鉴定程序是一个方向，就好象CHROMagar培养基一样集选择性培养，分离，鉴定与一体，减省了大部分的分纯和鉴定，不能不说这是一种创举！而我研制这种培养基的初衷也是在此，就是想省掉OF试验花费的时间。将所有的试验在准确性不降低的情况下缩短到48h内，并争取最快在24h左右完成所有培养+鉴定+药敏实验。

巴斯德之徒

原帖由 zyh 于 2007-11-12 22:07 发表

                               
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请问巴老师，标本接收后，分离（增菌）培养24小时＋分科培养24小时＋鉴定、药敏试验24小时，报告发出去，至少也要三天吧

如果是细菌菌量较大而且比较纯的情况下,比如尿培养,脓培养以及痰培养所分离细菌几乎为纯培养时,往往培养仅需要12~18h,鉴定(采用培养鉴定一体化的培养基如我介绍的那种培养基和CHROMagar显色定位培养基等联合酶法鉴定系统)和药敏(采用荧光速率法等快速方法)一块进行也仅需要4~6h左右就能出结果.如此就能在24内出报告.

另外,我介绍的培养基是替代中国兰或麦康凯使用的一种分离培养基,用于直接接种标本,而不是等细菌在别的什么培养基上生长后再传代到该培养基上,所以你说的"分离（增菌）培养24小时＋分科培养24小时"理解有误,应该将二者合二为一"分离（增菌）培养与分科培养18~24小时".

鱼禾草

看了巴版的资料后也想试一试,目前我科用的是梅里埃ATB和他的鉴定版,确实成本有点高,而该鉴定版在做OX阴性的非发酵菌时有时就得做一个O/F管,得耽误24h,不象德灵的鉴定版,只要是G-b上一个版条就了事,HXWSW老师也许就不用担心此问题.
      现在本人想试试您的发明创造,但有个问题问问您,在配制时,你讲不需高压灭菌,是不是煮沸就行了吗?还是煮沸几分钟?倾倒平板的量你的经验是不是如一般血平板的量?谢谢指导!!

[ 本帖最后由 鱼禾草 于 2007-11-15 19:16 编辑 ]

巴斯德之徒

加指示剂之前煮沸,调好PH值(注意一定好保证在PH6.8~70)后再次煮沸就行了,凉至55度左右就可以倾制平皿了.
另外,真菌也要生长,所以对于污染标本需要分区划线.

鱼禾草

原帖由 巴斯德之徒 于 2007-11-15 22:33 发表

                               
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加指示剂之前煮沸,调好PH值(注意一定好保证在PH6.8~70)后再次煮沸就行了,凉至55度左右就可以倾制平皿了.
另外,真菌也要生长,所以对于污染标本需要分区划线.

谢谢巴版的及时指教!!