军团菌菌落形态和镜下形态

莲雾

军团菌有特殊营养要求，不易分离。贴几张我们实验室分离的军团菌照片和大家分享。

gaoxd5

无附件？？？？

莲雾

高管，我试了几次，预览帖子可以看见照片，但一旦发表，显示屏就一片空白。没办法我的照片传不上来。照片是JPG格式。

莲雾

现在可以看见照片了,还是高管厉害,谢谢!:) :) :)

叹息之墙

谢谢！楼主提供宝贵资料

薇荷

原帖由 莲雾 于 2007-5-31 01:41 发表

                               
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军团菌有特殊营养要求，不易分离。贴几张我们实验室分离的军团菌照片和大家分享。

看见这张图,很亲切呀.
为了从标本中分离到军团菌,我曾经付出了很艰辛的努力:'( .

[ 本帖最后由 薇荷 于 2007-10-28 23:30 编辑 ]

莲雾

请薇老师给大家谈谈军团菌分离的关键点吧！:)

樵夫

就是呀，请薇老师介绍哈经验三:lol

薇荷

几天不在,看到大家对这个话题很感兴趣,很开心啊.感谢连雾斑竹的信任!
特谈谈我的观点.
1.从呼吸道标本分离军团菌,标本的采集与留取是关键,标本不合格,"巧妇难为无米之炊".(有关怎样留取合格呼吸道标本\怎样判断标本是否合格等,微生物之家论坛(http://www.microbiohome.com)讨论得如火如荼,大家可去看看,我在这里不再展开.)
2.军团菌为需氧菌,o2减少则生长缓慢,无o2则不生长.同时接种巧克力琼脂,军团菌在巧克力琼脂上不长,借此可辅助鉴定.
3.温度\pH也很关键,最适温度36℃,最适pH6.8~7.0.过高过低都难生长.初始分离要放CO2环境.
4.培养基:我培养时选用BCYEα琼脂培养基,其中的焦磷酸铁和半胱氨酸另外再加.刚开始时培养基自配,很麻烦,分离率低,后改用上海CDC微生物室研制的成品琼脂培养基(很好用,100ml用量),终于从标本中分离出了嗜肺军团菌.有关文章已经发表.
5.血清法:采用成品的军团菌1-14,Lm诊断抗原,采用微量法(加美蓝标记),很方便.

[ 本帖最后由 薇荷 于 2007-10-28 20:24 编辑 ]

莲雾

谢谢薇老师的指点。:) :)

薇荷

有关军团菌的话题,欢迎大家继续关注.我们还会逐步谈一些相关内容.

莲雾

请教：痰标本需要预处理吗？需要选择性培养基?

薇荷

1.胸水、气管抽吸物、痰、血液等标本资料上讲无需特殊处理可直接接种，但是，运行了一段时间后，我发现痰标本杂菌还是影响很大，因此，我用碱进行了预处理（还要用酸再中和）。
2.一般资料上讲配制选择性培养基时要加很多的抗菌药物，但要找全很困难也没必要，因此，我只加了万古霉素和多粘菌素B（也很难买），效果也不错。当然因没有加两性霉素B，也常受到真菌污染。

hxwsw

谢谢分享经验！

xiangboshu

请问薇荷老师：你们做血清凝集用的是什么方法，是那个公司的产品？
我们最近也在做，用的是直接免疫荧光法，但好像效果不是很好，荧光很弱。不知你们怎样？

薇荷

原帖由 xiangboshu 于 2007-10-30 11:11 发表

                               
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请问薇荷老师：你们做血清凝集用的是什么方法，是那个公司的产品？
我们最近也在做，用的是直接免疫荧光法，但好像效果不是很好，荧光很弱。不知你们怎样？

xiangboshu斑竹您好！
培养+血清抗体同时进行，我用的是微量凝集法（其中有美兰），即用军团菌各型抗原检测血清中的抗体。试剂为上海CDC产品。您可以联系一下他们，不知现在有无供货。因为要大批量做，这种方法比较适合。直接免疫荧光法我没有用过，不好评价。但有一点，直接免疫荧光法结果判断时易受主观的影响。
广州迪景有进口的抗原，但比较贵。

[ 本帖最后由 薇荷 于 2007-10-31 18:11 编辑 ]

xiangboshu

谢谢薇荷老师，我们是培养以后的军团菌，现在要做进一步的分型，是我对你的话理解错误，不好意思。:$

薇荷

原帖由 xiangboshu 于 2007-10-31 16:39 发表

                               
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谢谢薇荷老师，我们是培养以后的军团菌，现在要做进一步的分型，是我对你的话理解错误，不好意思。:$

我理解你的意思了.
培养后的分型血清以前上海CDC也有产品(我用过),不过好象只有Lp1~6型.现在的情况我不太清楚,你可和他们联系一下.

xiangboshu

好的，谢谢薇荷老师:D