微生物屏障试验的方法 摘自2002版消毒技术规范，目前国内通过验证的试验室都是疾控，并且都不是所有疾控都能做。估计医院自己要操作还是很困难的， 还是看检测报告吧。 • 1）器材 • ①试验微生物:金黄色葡萄球（ATCC 6538） • ②培养基: 血琼脂、营养琼脂、葡萄糖营养肉汤（1）湿性条件下微生物屏障性能 • ③真空干燥箱：100 mbar • 2）操作步骤 • ①裁取5个边长为50mm的正方形试样, 于134℃压力蒸汽灭菌6min，100 mbar真空 • 干燥10min。 • ②将金黄色葡萄球接种6ml葡萄糖营养肉汤培养基，37℃培养16h后的菌悬液作活 • 菌计数。 • ③将预处理的试样外表面朝上平铺于无菌平皿内。 • ④用含107cfu/ml的金黄色葡萄球菌悬液滴到试样上，互不接触滴5滴, 每 • 滴0.1 ml。 • • ⑤将染菌试样在温度20℃～25℃, 相对湿度40%～50% 条件下放置, 液滴应在6h • 内完全干燥。 • ⑥将染菌试样平铺于血琼脂培养基表面，完全接触，染菌面朝上，经5s～6s后将试样 • 移开。 • ⑦将血琼脂培养基于37℃培养16h～24h进行菌落计数。 • 3) 结果报告：每个血琼脂培养基平板上生长的菌落数以及5个平板上生长的菌落总数。 • 4)评价 • ① 5个培养基平板上均无菌生长，试验菌不能透过试样。 • ② 如5个培养基平板上生长的菌落总数≤5，则用20个试样复测，在20个平板上生长 • 的菌落数≤5为合格。 • (2)干性条件下微生物屏障性能 • 1)器材 • ①试验瓶: 250 ml有盖玻璃瓶, 螺旋盖带有34 mm的孔：密封垫圈内径34 mm, 由聚四 • 氟乙烯(PTFE)材料制成或带PTFE覆盖层 • ②试验微生物:枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC 9372) • ③培养基: 营养琼脂培养基 • ④铝泊、滤纸： • 2)操作步骤 • ①将100 ml含106cfu/ml芽孢的酒精(96%)悬液与100克无菌石英粉(0.04mm～0.15mm)混合,50℃干燥16h。 • ②在试验瓶内加入20 ml营养琼脂培养基并使凝固。 • ③将10个直径为42 mm的圆形试样分别置于试验瓶两个密封垫圈之间，并用螺旋盖适当压紧，使试样被密封垫圈紧压在瓶沿上。 • ④将试验瓶用铝泊包裹，于120℃灭菌20min。 • ⑤灭菌并冷却后，在试样上均匀撒上0.25g石英粉。 • ⑥将试验瓶放入培养箱加热到50℃, 再放入冷藏箱降至10℃, 如此为1次, 重复5次。 • ⑦将试验瓶置37℃培养24h。 • 3)结果报告: 每个试样透过的菌落数和10个试样透过的菌落总数。 • 4)评价：每个试样透过的菌落数应≤5cfu，10个试样透过的菌落总数应≤15cfu。 | 
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发表于 2011-8-24 16:18
