压力蒸汽灭菌的生物监测方法

千年一叹wyr · 发表于 2011-8-4 14:39

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根据规范，标准生物监测包置于灭菌器排气口的上方或生产厂家建议的灭茵器内最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。这个阳性对照和阴性对照是什么呢，一个是已高压的芽孢菌片，一个是未灭菌的芽孢菌片是吗？结果判定阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。那试验组是什么呢？难道每周一次的生物监测需要3个芽孢菌片吗？如果两个锅需要6个菌片吗？那成本不是很高吗？如果每次只用一个已高压的芽孢菌片做培养，同批次的芽孢菌片只做一次阳性对照而不是每周做行吗？

随风飘尘 · 发表于 2011-8-4 14:45

用自含式的就不做阴性对照，同一批次的做一个阳性对照即可。

舒窈 · 发表于 2011-8-4 14:47

学习了。用自含式的就不做阴性对照，同一批次的做一个阳性对照即可。

千年一叹wyr · 发表于 2011-8-4 14:54

不好意思，我是新手，自含式的是不是一个圆圆的，然后可以挤破培养的那种呀？

黑旋风 · 发表于 2011-8-4 14:55

本帖最后由黑旋风于 2011-8-4 14:58 编辑

阳性对照是未进过高压灭菌的菌片加入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基试验；阴性对照是溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基不加任何东西直接试验；阳性对照培养阳性，阴性对照培养阴性，试验培养阴性，判定为灭菌合格。每次只需做一个阳性对照和阴性对照！你们有两个高压锅，每次只需要3个菌片就够了！

lemoncherry · 发表于 2011-8-4 15:08

压力蒸汽灭菌器标准规定每周一次，但是现在实际上建议每天一次生物指示剂监测。

自含式生物指示剂就是一个小塑料瓶里面有一个菌片，上面一般是十的五次放的芽孢数量，一个密封的安瓿培养基，压力蒸汽的是紫色的，一个可以透过蒸汽但是隔离微尘其他污染物的盖子。

一般规定每1立方米，放一支，在排气口或者最难灭菌的地方。

灭菌完毕后，这是是监测的生物指示剂，再拿一支没灭菌同一批次的生物指示剂作对照。将玻璃安瓿挤碎，使菌片被培养基浸透，不可颠倒混匀，底部朝下，在硬质桌子上轻轻扣几下即可，两支一起竖直朝上（保持盖子朝上方向）干热培养。

结果：对照支变黄色，监测支变黄色，灭菌失败，未通过灭菌不可放行
对照支变黄色，监测支依旧为紫色，灭菌成功，通过可以放行

lemoncherry · 发表于 2011-8-4 15:10

我没有听说过阴性对照，一般对照支都是阳性，打个比方，如果是五个锅，那就放五支生物指示剂，培养的时候多一支阳性（即没有被灭菌的）对照支即可，总消耗六支生物指示剂。

1185881322 · 发表于 2011-8-4 16:00

同意7#楼意见，我院的生物监测也是照此做的

千年一叹wyr · 发表于 2011-8-4 22:40

谢谢各位老师指导。今天同供应室的说了，要求每天做，结果供应室的一听就跳脚大骂，说我们小医院还搞的这么正规，人家小医院还一年到头都不做，旁人说大医院还正规，又说我们怎么能跟大医院比。在那里蛮不讲理的大发脾气，根本不给你讲理的机会。可把我给气得！

望星空 · 发表于 2011-8-4 22:54

lemoncherry 发表于 2011-8-4 15:08

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压力蒸汽灭菌器标准规定每周一次，但是现在实际上建议每天一次生物指示剂监测。

自含式生物指示剂就是一 ...

"一般规定每1立方米，放一支"——请问，这是出自哪里？
“压力蒸汽灭菌器标准规定每周一次，但是现在实际上建议每天一次生物指示剂监测。”肯定是监测越勤越好的啦。不过还是要在符合规范的前提下，考虑成本的。

闲书 · 发表于 2011-8-4 23:05

我们现在用自含式生物指示剂，同一批次的只需一个阳性对照就可以了，

lemoncherry · 发表于 2011-8-5 10:45

tangjing163 发表于 2011-8-4 22:54

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"一般规定每1立方米，放一支"——请问，这是出自哪里？
“压力蒸汽灭菌器标准规定每周一次，但是现在实 ...

忘记 "一般规定每1立方米，放一支"——请问，这是出自哪里  这个说法

医疗上一般为压力蒸汽灭菌  环氧乙烷灭菌作为补充
压力蒸汽医疗上一般一锅放一支
环氧乙烷一般医用小型的也都是放一支

工业上的压力蒸汽和环氧乙烷灭菌会有其对应的生物指示剂投放密度  我不清楚

望星空 · 发表于 2011-8-6 00:43

lemoncherry 发表于 2011-8-5 10:45

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忘记 "一般规定每1立方米，放一支"——请问，这是出自哪里这个说法

医疗上一般为压力蒸汽灭菌环氧 ...

《医院消毒技术规范（2002版）》是这样描述的：
生物监测法
1）指示菌株: 指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢(ATCC 7953 或 SSIK 31株)，菌片含菌量为 5.0×105 cfu/片～5.0×106cfu/片，在 121℃±0.5℃条件下，D值为 1.3 min～1.9min，杀灭时间(KT值)≤19min，存活时间(ST值)为≥3.9min。
2）培养基: 试验用培养基为溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。
3）检测方法: 将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。
再下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包(由 3 件平纹长袖手术衣，4 块小手术巾，2 块中手术巾，1 块大毛巾，30 块 10cm×10cm 8 层纱布敷料包裹成 25cm×30cm×30cm 大小)；预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准测试包（由16条全棉手术巾每条41cm×66cm，将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层然后叠放，作成23cm×23cm×15cm大小的测试包）；手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒（22cm×13cm×6cm) 代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。
经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经 56℃±1℃培养 7d(自含式生物指示物按说明书执行)，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。

望星空 · 发表于 2011-8-6 00:51

lemoncherry 发表于 2011-8-5 10:45

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忘记 "一般规定每1立方米，放一支"——请问，这是出自哪里这个说法

医疗上一般为压力蒸汽灭菌环氧 ...

3.17.3 环氧乙烷（EO）灭菌效果监测
生物指示物用枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC 9372），抗力要求为：菌量在5×105cfu/片～5×106cfu/片，在环氧乙烷剂量为600mg/L±30mg/L，作用温度为54℃±2℃，相对湿度为60%±10%条件下，其杀灭90%该微生物的D值为2.6min～5.8min，存活时间应≥7.8min，死亡时间应≤58min。
在消毒效果用该微生物监测时，菌量为5×103cfu/片～5×104cfu/片。放置菌片的数量应足够多。根据通常做常规微生物学监测的实践经验，采用以下数量的生物指示物较为适宜：
①灭菌器柜室可用体积小于5m3时，至少放置10个菌片；
②灭菌器柜室可用体积为5m3至10m3时，每增加1m3，增加1个菌片；
③灭菌器柜室可用体积大于10m3时，每增加2m3，增加1个菌片。

望星空 · 发表于 2011-8-6 01:10

《医院消毒供应中心第3 部分:清洗消毒及灭菌效果监测标准》

压力蒸汽灭菌的生物监测方法
按照《消毒技术规范》的规定，将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片制成标准生物测试包或生物PCD，或使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测。标准生物监测包置于灭菌器排气口的上方或生产厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。如果一天内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。

uidou0415 · 发表于 2011-8-6 08:22

请问：使用快速生物阅读仪监测的结果可以作为每周定期的生物监测结果用么？

QZ · 发表于 2011-8-6 08:57

我认为应该可以吧，做为植入物放行的标准更严格。节约成本哦！

lemoncherry · 发表于 2011-8-9 14:52

tangjing163 发表于 2011-8-6 00:51

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3.17.3 环氧乙烷（EO）灭菌效果监测
生物指示物用枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC 9372），抗力要求为： ...

非常感谢我后面也查了但是没有查到这么详尽的规范谢谢老师

战台风 · 发表于 2011-8-9 15:46

黑旋风发表于 2011-8-4 14:55

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阳性对照是未进过高压灭菌的菌片加入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基试验；阴性对照是溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水 ...

终于弄清楚什么是阴性对照了！谢谢旋风版主。

望星空 · 发表于 2011-8-9 22:32

lemoncherry 发表于 2011-8-9 14:52

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非常感谢我后面也查了但是没有查到这么详尽的规范谢谢老师

不客气，我只是把规范复制一下罢了。

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