无菌体液的一般培养

lixin9586

胸水、腹水、CSF、无菌部位的脓液我们一般希望临床用血培养瓶送检，但经常有医生直接把标本送来做“一般培养”。我们取一接种环直接划血平板，48小时后平板就干了，虽然用的是二氧化碳培养箱有湿度，总觉得不会再长细菌了，第三天在看平板的时候有困惑。听有位老师说不是这样培养的，需要用试管怎么处理来着？也没找到资料。请各位老师赐教！
   羊水培养一般培养我们经常有，大部分不长菌，有些第二天细菌就荫出来了，第三天还是长出小小的链球菌的。看文献说，羊水中的链球菌还是有意义的，我们医院还是有几例的，产科切口中有一例，但不是化脓链。平板看起来也较干，请问有啥好办法吗？
    到底有哪几种标本适合放血培养瓶增菌，哪些不适合呢？导管尖可以吗？我看到有放到双相血培养瓶中的情况。
    再次感谢大家！

二进制

采集得来的胸水、腹水、CSF等无菌体液标本，悉数注入血培养瓶培养，较取一接种环直接划血平板细菌长出机率大得很多倍。故一般情况下，对于此类标本常采用前者方法培养。
此外，羊水培养临床意义何在？

gaoxd5

回复 1# lixin9586

导管尖不可以放在血培养瓶进行培养。
因为导管培养需要定量的

巴斯德之徒

胸水、腹水、CSF、无菌部位的脓液我们一般希望临床用血培养瓶送检，但经常有医生直接把标本送来做“一般培养 ...
lixin9586 发表于 2011-7-21 00:58

                               
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无菌体液包括经皮穿刺获得的血液、骨髓、胸水、腹水、关节液、脑脊液，脓液无论是闭锁性深部脓肿还是脓腔与生理性腔道想通的脓肿，抑或是皮肤开放性创伤形成的脓肿都不是无菌体液。
无菌体液需要先通过血培养基增菌再传代固体培养基；而脓肿脓液直接接种，不能增菌。
需要注意的是羊水、各种引流液（如脑室引流液、胸腔引流液、腹腔引流液、胆道引流液、术后安置的血清管、非保护套下进行的尿道插管导出来的尿液）均为非法样本，可以直接拒收，不能用来作培养。
深静脉导管置管24后再导管的外缘即定植了皮肤和环境细菌，对于尚未发生CRBSI的病例而言只是菌量较少，而且定植部位也较浅而已，但都不是无菌的，因而不能增菌，否则由于污染/定植菌被放大后几乎100%的导管都是阳性——假阳性！

veryoldman

对待微生物检验的工作思路不可僵化，照搬书本。
无菌体液诸如胸腔积液、腹水、脑脊液、关节腔积液、闭合性脓肿脓液、胆汁等等，如何处理，并无一定之规。
渗出性胸水多由炎症性病变引起（肺炎并发常见），但由于诊疗技术发达，一般渗出期即被发现，此时抽取的胸水往往无菌，若进展至纤维脓性期，则肯定有菌。因此胸水培养无论直接接种还是增菌，阳性率一般不会太高，太高就有问题了。而且肺炎并发往往与肺炎病原体相同，以单一菌感染多见，但如是吸入性肺炎、支气管扩张并感染等基础病，则厌氧菌和/或需氧菌混合感染可能性大大增加，此种患者如仅增菌，假阴性或不准确的阳性培养结果出现几率大大增加；结核性胸膜炎近年来似乎发病呈上升趋势，如果仅作常规增菌培养，漏检是必然的。因此，胸水培养，无论是直接接种还是增菌，标本离心沉渣直接涂片革蓝染色镜检是必须要做的。
感染性腹水，不外乎自发性细菌性腹膜炎、继发性腹膜炎、结核性腹膜炎三种。自发性腹膜炎病原体多来自血流（门静脉扩散），单一菌常见；继发性腹膜炎病因繁多，各种空腔脏器穿孔（急性化脓性阑尾炎、胃十二指肠溃疡穿孔、小肠憩室穿孔等）、肠道炎症、妇科感染性疾病、肝脓肿破溃、急性胆囊炎或胆管炎、肠壁炎症、腹壁炎症、急性化脓性胰腺炎等等，病原体多为需氧、厌氧混合感染，主要来自肠道菌群和阴道菌群；结核性腹膜炎发病率相对低。但由上述可知，单纯的培养（无论直接接种还是增菌），结果是不可靠的。与胸水一样，直接涂片镜检必不可少。
深部脓肿常见不外乎肺脓肿（上呼吸道正常菌群混合感染、结核可能性均存在）、肝脓肿（肠道菌群混合、结核可能性）、腹腔脓肿（肠道菌混合可能性极大）、盆腔脓肿（肠道菌群、阴道菌群）；其它如肾脓肿、胰腺脓肿相对较少。这些脓肿如果是混合感染或结核，无涂片结果的辅助判断，单凭培养，无论你怎么改变培养方式，结果还是错误多多。
个人观点，妄言之，诸位拍砖！

lixin9586

1、“羊水培养的临床意义” 我们医院对于产程较长和羊水浑浊的病人经常做羊水培养，有的还做支原体。我们偶尔会做到咽峡炎链球菌，白色念球菌（产程很长），支原体阳性的也做到过。有报道羊水细菌随破膜时间延长，检出率较高。有金葡、肺克、大肠、链球菌、白念等。孕晚期有性生活的金葡检出率较高，链球菌和新生儿窒息有关。是造成切口感染和新生儿感染的主要致病菌。我想，万一临床有感染出现，羊水培养的阳性结果还是有意义的，虽然时间有点晚。
2、导管我们目前也是采用半定量滚动法，阳性率很低，插管ICU病人血培养阳性也较低，但病人有不明原因发热，CRP也高，有时候连管子都拔掉了，还是发烧，医生急得像在锅上烧：痰里细菌有定植，肺部没什么阴影，不考虑肺炎，问我哪里感染？连管子都拔了还烧，再次血培养也阴性，我怎么知道？最多我把血培养瓶盲种一下啦。
回想：巴老师的全定量方法（见微生物之家）还是反应实际的导管细菌情况的；还有就是经常有中心静脉血培养和外周血培同时抽过来。留置的静脉中抽的血培养，前端血要弃去吗？我们临检组的写了标本送检方法中指明“去掉前端血，有细菌污染”，我觉得有疑问。
3、脓液，有些皮肤开创性的伤口脓液量少，有必要用运送培养基吗？我又怕污染，因为医生有时表面不消毒的。我们现在直接把送来的棉拭子（被脓液吸干了）涂布一区，分区划线。有一两菌就要报吗？我们经常见长一两个，也不知道是哪个部位的脓液。
4.“各种引流液（如脑室引流液、胸腔引流液、腹腔引流液、胆道引流液、术后安置的血清管、非保护套下进行的尿道插管导出来的尿液）均为非法样本，可以直接拒收，不能用来作培养。”以上的引流液和脑脊液、胸水、腹水、胆汁，不一样吗？ 我们消化科经常有晚期胆囊CA的引流液（他们开的是胆汁），不同部位，两三种菌同时生长，还有多重耐药菌大都从这里产生。我不太明白怎样区别胆汁和引流液。“术后安置的血清管”是什么？留置的静脉导管？不是要做导管相关吗？总之，非法样本如何向临床解释，还请老师指点。
5.我们科是结核定点医院，痰结核菌涂片的质控是不错的。但做了十多年，从没在胸水、脑脊液、尿液中找到抗酸杆菌。结核性脑膜炎神经科医生是凭细胞计数和生化反应等来判断的。分析原因，涂片固定是一大难题，总是掉膜，应该像推血片一样涂片吗？那需要多推几张。脓液中找细菌也很弱。有时候白细胞模模糊糊一堆，细胞核也很难看清，只在涂片的边缘找到几个完整的白细胞，是标本不新鲜所致吗？很难找到细菌。以后要像巴老师学习，多看痰涂片，和血平板对照。但有疑问，血培养瓶中的细菌，血平板上的细菌和直接涂片的细菌有点不一样，血培养瓶中的明显大很多，特别是BD血培养瓶的比梅里埃中和抗生素的瓶链球菌长得大。在水中泡大了吧？

感谢老师们的解惑，学习了。因为每小时只能发三贴，回复得有点长了。见谅！

lixin9586

无菌体液包括经皮穿刺获得的血液、骨髓、胸水、腹水、关节液、脑脊液，脓液无论是闭锁性深部脓肿还是脓 ...
巴斯德之徒 发表于 2011-7-21 13:19

                               
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    1、闭锁性脓肿还是脓腔与生理性腔道相通的脓肿，为啥不能放入血培养瓶呢？
   2、非法样本如何给临床说明理由呢？不太懂。
谢谢！

龙文鞭影

回复 7# lixin9586 u

    关于1，这些脓肿标本很易被污染，增菌时有利于益生长菌的繁殖，可能掩盖真正的致病菌的分离。所以最好不要增菌，直接平板分离为好。
   关于2，这些标本常被大量杂菌（环境、皮肤污染菌）污染，培养难以区分出真正的致病菌。结果很可能误导临床。引起菌群失调或更严重的感染。所以，这一类样本，无法满足细菌检验的要求，被检验人员视为“非法样本”。

veryoldman

回复 7# lixin9586
深部脓肿不论是否与生理性腔道相通，混合感染（需氧、兼性厌氧、专性厌氧菌）是大概率事件，不同种属的细菌对生长条件的需求不同，繁殖速率、营养争夺能力均有较大差异，如果单纯注入血培养瓶增菌， 则经过至少24h培养后，原始标本中的菌群状态（种类构成、数量比例等）定会发生较大变化。若据此出具报告，肯定有失偏颇！
引流液培养见于外科手术感染，顾名思义，既然引流，那么可以肯定要么置管要么采用引流条。无论哪种方式，一定是破坏完整的皮肤粘膜屏障，引流管或引流条将外界环境与体内直接相通，随着留置时间延长，环境中（包括皮肤定植菌）细菌几乎无任何阻力沿管或条定植  。如果引流液不是用注射器抽取的伤口脓液而是直接取自引流袋或引流管，那么无需增菌，直接培养就肯定是阳性的，多数情况还表现为混合菌生长，但这种阳性的生长情况能反映病灶部位的情况吗？怎样从这些阳性培养结果中判断与感染相关的致病菌？我想只有神仙知道。

lixin9586

明白了
1、深部脓肿混合感染更需要涂片做指导。但经常看到有大量白细胞，却找不到细菌。很郁闷！有时白细胞形态模糊，只在涂片边缘找到几个完整的细胞，看得清中性粒的胞浆。但是找来找去找不到细菌。
2、原来引流液取自引流管，才明白。临床知识太弱了。
谢谢！