有干式保存无菌持物钳在使用中无菌效果监测方案吗？（答案见2楼）

fyygzx

各位老师，现在很多医院都用干式保存的无菌持物钳代替了湿式保存的无菌持物钳，而且是微生物监测无显著差异，现求干式保存无菌持物钳在使用中无菌效果监测方案。

lwk6088

回复 1# fyygzx
这是我院的无菌物品监测方案，请参考（依据02年版消毒技术规范制定）
4.医疗器械灭菌效果的监测方法
4.1采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。
4.2无菌检验：
无菌检验是指检查经灭菌的敷料、缝线、一次性使用的医疗用品、无菌器械以及适合于无菌检查的其它品种是否无菌的一种方法。
无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染；对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。
(1)无菌检验前准备：
1）洗脱液与培养基无菌试验：无菌试验前3天，于需-厌氧培养基与霉菌培养基内各接种1ml洗脱液，分别置30℃~35℃与20℃~25℃培养72h，应无菌生长。
2）阳性对照管菌液制备：
①在试验前一天取金黄色葡萄球菌〔CMCC(B)26003〕的普通琼脂斜面新鲜培养物，接种1环至需-厌氧培养基内，在30℃~35℃培养16h~18h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10cfu/ml~100cfu/ml；
②取生孢梭菌〔CMCC(B)64941〕的需氧菌、厌氧菌培养基新鲜培养物1
接种环种于相同培养基内，于30℃~35℃培养18h~24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10cfu/ml~100cfu/ml；
③取白色念珠菌〔CMCC(F)98001〕真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1接种环种于相同培养基内，于20℃~25℃培养24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10cfu/ml~100cfu/ml。
(2)无菌操作(样品检测)：
1）对于敷料、手术衣等样本：取两个包装内的样本，于不同部位剪取约1cm×3cm大小的样片，接种需-厌氧培养管5管与真菌培养管4管。每培养管含培养基40ml，各接种3片样片。
2）对于缝合针、针头、刀片等小件医疗器械：各取10件样本直接浸入6管需-厌氧培养管 (其中1管作阳性对照)与4管真菌培养管。每管含培养基15ml。
3）对于注射器样品：取5~10支注射器样本，分别吸取5ml无菌洗脱液，反复抽吸5次洗下管内细菌和真菌，直接接种需-厌氧培养管6管(其中1管作阳性对照) 与真菌培养管4管。接种量：1ml注射器为0.5ml；2ml注射器为1ml；5ml~10ml注射器为2ml；20ml~50ml注射器为5ml。培养基用量：接种量2ml及以下为15ml/管；接种量5ml为40ml/管。
4）对于手术钳、止血钳、镊子等大件医疗器械：取3~5件样本用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，将各采样液混合并充分振匀，分别接种于需-厌氧培养管6管(其中1管作阳性对照) 与真菌培养管4管。接种量为1ml/管；培养基用量为15ml/管。
(3)培养：
1）在待检样品的需-厌氧培养管中，接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管液(1：1000稀释)1ml，作为阳性对照。将需-厌氧培养管、阳性对照管和阴性对照管，均置于30℃~35℃培养5d。
2）在待检样品的真菌培养管中，接种白色念珠菌阳性对照管液(1：1000稀释)1ml为阳性对照。将接种观察真菌污染样本的培养管、阳性对照管和阴性对照管，于20℃~25℃培养7d。
3）观察结果：培养期间逐日检查是否有菌生长，如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观上判断时，可取培养液转种入零一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养48h~72h后，观察是否再现混浊或在斜面上有无菌落生长，并在转种的同时，取培养物少量，涂片染色，用显微镜观察是否有菌生长。
(4)结果判定：
阳性对照管应有菌生长，阴性对照管应无菌生长，否则试验重做。如需-厌氧培养管及真菌培养管内均为澄清或虽显混浊但证明并非有菌生长，判为灭菌合格；如需-厌氧培养管及真菌培养管中任何一管显混浊并证实有菌生长，应重新取样，分别同法复试2次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。
4.3注意事项：
(1)送检时间不得超过6h，若样品保存于0℃~ 4℃，则不得超过24h。
(2)被采样本表面积＜100cm2取全部表面；被采样本表面积≥100cm2，取100cm2。
(3)若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。