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NDM-1实验室诊断

 火.. [复制链接]
发表于 2010-9-22 12:46 | 显示全部楼层 |阅读模式

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    NDM-1细菌的实验室诊断包括筛查、表型确认以及分子确证实验三个步骤。

1、表型筛查试验:在细菌药物敏感性测定中,以美洛培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最低抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌科细菌产酶情况进行初步筛查,如果达到以下标准,应怀疑细菌产碳青霉烯酶,需要进行性表型确认。厄他培南特异性较低,不推荐用于筛选试验。

a)K-B法:美洛培南(10μg纸片)抑菌圈直径≤23mm或亚胺培南(10μg纸片)抑菌圈直径≤21mm时,需要进行表型确认。

b)最低抑菌浓度(MIC)测定法:美洛培南MIC0.5mg/L时,需要进行表型确认;对大肠埃希菌、克雷伯菌属、沙门菌属和肠杆菌属,亚胺培南MIC2mg/L时,可进行表型确认试验。

2、表型确证试验:采用亚胺培南+EDTA复合纸片或E试条,进行KB法药敏试验或MIC测定,如果复合纸片比单药纸片的抑菌圈直径增大值≥5mm,或单药与复合制剂的MIC比值≥8时,判定产金属β-内酰胺酶,需用分子生物学技术进行酶型确认。

3、酶型分子确证试验:采用NDM-1的基因特异引物进行PCR扩增及产物测序,确定菌株是否携带NDM-1基因。

   NDM-1实验室诊断中,需要注意质量控制,推荐美洛培南作为表型筛选与确证用抗菌药物,各医院实验室可进行PCR扩增初步确定细菌产酶情况,对阳性结果须加以复核,同时菌株送有条件参考实验室进一步检测确定。

(以上内容,由浙江大学医学院附属一院的肖永红教授提供)

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发表于 2010-9-22 15:49 | 显示全部楼层
胡教授总是站在最前沿,非常感谢您,及时总结、条理清楚,好好学习!
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发表于 2010-9-22 17:27 | 显示全部楼层
通过教授的分享,对有关超级细菌的知识有了进一步的了解,感谢分享,更期待本月底的专家研讨会成果。
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发表于 2010-9-22 18:59 | 显示全部楼层
回复 1# icchina
谢谢胡教授,我马上就发给我们检验科微生物室主任,供他学习执行。
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发表于 2010-9-23 10:11 | 显示全部楼层
转发临床微生物实验室并注明:本资料来至上海国际医院感染控制论坛,由胡必杰教授提供,请参照执行。
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发表于 2010-9-24 23:36 | 显示全部楼层
Thanks Professor Hu for your valuable and helpful material!
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发表于 2010-10-8 10:13 | 显示全部楼层
正好需要学习这方面的资料,谢谢!
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发表于 2010-10-8 12:04 | 显示全部楼层
美国CDC文件中对于NDM-1的检测方法建议采用CLSI规则,卫生部出的文件中有些不妥的地方。
http://www.clsi.com.cn/forum/dis ... p;page=1&star=1
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发表于 2014-1-12 10:03 | 显示全部楼层
正在做这方面的课题~~谢谢教授!!
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