NDM-1实验室诊断

icchina

    产NDM-1细菌的实验室诊断包括筛查、表型确认以及分子确证实验三个步骤。

1、表型筛查试验：在细菌药物敏感性测定中，以美洛培南或亚胺培南纸片法（K-B法）或最低抑菌浓度（MIC）测定法对肠杆菌科细菌产酶情况进行初步筛查，如果达到以下标准，应怀疑细菌产碳青霉烯酶，需要进行性表型确认。厄他培南特异性较低，不推荐用于筛选试验。

a)K-B法：美洛培南（10μg纸片）抑菌圈直径≤23mm或亚胺培南（10μg纸片）抑菌圈直径≤21mm时，需要进行表型确认。

b)最低抑菌浓度（MIC）测定法：美洛培南MIC≥0.5mg/L时，需要进行表型确认；对大肠埃希菌、克雷伯菌属、沙门菌属和肠杆菌属，亚胺培南MIC≥2mg/L时，可进行表型确认试验。

2、表型确证试验：采用亚胺培南+EDTA复合纸片或E试条，进行KB法药敏试验或MIC测定，如果复合纸片比单药纸片的抑菌圈直径增大值≥5mm，或单药与复合制剂的MIC比值≥8时，判定产金属β-内酰胺酶，需用分子生物学技术进行酶型确认。

3、酶型分子确证试验：采用NDM-1的基因特异引物进行PCR扩增及产物测序，确定菌株是否携带NDM-1基因。

   在NDM-1实验室诊断中，需要注意质量控制，推荐美洛培南作为表型筛选与确证用抗菌药物，各医院实验室可进行PCR扩增初步确定细菌产酶情况，对阳性结果须加以复核，同时菌株送有条件参考实验室进一步检测确定。

(以上内容，由浙江大学医学院附属一院的肖永红教授提供)

朱德权

胡教授总是站在最前沿，非常感谢您，及时总结、条理清楚，好好学习！

细雨润竹

通过教授的分享，对有关超级细菌的知识有了进一步的了解，感谢分享，更期待本月底的专家研讨会成果。

沧海一粟

回复 1# icchina
谢谢胡教授，我马上就发给我们检验科微生物室主任，供他学习执行。

细雨润竹

转发临床微生物实验室并注明：本资料来至上海国际医院感染控制论坛，由胡必杰教授提供，请参照执行。

蓝鱼o_0

Thanks Professor Hu for your valuable and helpful material!

xhryygk

正好需要学习这方面的资料，谢谢！

ttmm

美国CDC文件中对于NDM-1的检测方法建议采用CLSI规则，卫生部出的文件中有些不妥的地方。
http://www.clsi.com.cn/forum/dis ... p;page=1&star=1

果拉米苏

正在做这方面的课题~~谢谢教授！！