临床多重耐绿脓对消毒液的敏感性与分子型

clarck7

Susceptibility of clinical isolates of multiresistant Pseudomonas
aeruginosa to a hospital disinfectant and molecular typing
Célia Maria Carvalho Pereira Araujo Romão/*/+, Yaisa Naziozeno de Faria,Luciana Roberto Pereira, Marise Dutra Asensi*
Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde *Instituto Oswaldo Cruz-Fiocruz, Av. Brasil 4365, 21040-900 Rio de Janeiro, RJ, Brasil
      The aim of this study was to evaluate the susceptibility of 35 resistant Pseudomonas aeruginosa clinical isolates
to a quaternary ammonium hospital disinfectant. The methodology was the AOAC Use-Dilution Test, with disinfectant
at its use-concentration. In addition, the chromosomal DNA profile of the isolates were determined by macrorestriction
pulsed field gel electrophoresis (PFGE) method aiming to verify the relatedness among them and the
behavior of isolates from the same group regarding the susceptibility to the disinfectant. Seventy one percent of the
isolates were multiresistant to antibiotics and 43% showed a reduced susceptibility to the disinfectant. The PFGE
methodology detected 18 major clonal groups. We found isolates with reduced susceptibility to the disinfectant and
we think that these are worrying data that should be further investigated including different organisms and chemical
agents in order to demonstrate that microorganisms can be destroyed by biocide as necessary. We also found
strains of the same clonal groups showing different susceptibility to the disinfectant. This is an interesting observation
considering that only few works are available about this subject. PFGE profile seems not to be a reliable
marker for resistance to disinfectants.
Key words: Pseudomonas aeruginosa - disinfectants - pulsed field gel electrophoresis
摘要:
       研究35株绿脓对季胺类消毒液的敏感性。方法为AOAC（美国分析化学协会） 稀释试验法，消毒液为常规使用浓度。菌株染色体DNA用PFGE方法验证这些菌与其它对消毒剂敏感的菌株之间的同源性及同群菌株对消毒液的敏感性的反应（差异）。71%的绿脓为多重耐药，而有43%对消毒液敏感性下降。PFGE检查出18种主要的克隆型。用PFGE对耐消毒剂细菌分型不一定是好的方法。

部分讨论:
      我们比较对消毒液敏感或较敏感的菌株对抗生素的耐药性。在实验浓度下，我们发现这2组并没有差别。R（1997）分别用抗生素敏感和耐药的2组细菌对2类消毒液敏感性进行了比较，并发现没有差别。另外，2002年K确定对抗生素耐药的菌株通常对酒精敏感性也较低。阳性菌和阴性菌对抗生素和消毒液抗性之间的关系还需要更多探索。
所以菌株都做了PFGE，因为PFGE分辨率高，重复性好，并且易于判读。期望同其它学者一样能够发现较大的基因差别，R（1994）分析了多达500株绿脓并发现了该菌具有惊人的多样性。我们同样对实验菌株进行了PFGE分型，同群的菌株对抗菌药物表现出差异。S（1992）和L（2002）有同样发现。之后发现A群流行株表现出10种不同的耐药模式。有趣的是很多研究表明来自同一克隆群的菌株对消毒液敏感性表现各不相同，H（2004）发现国营农场对新洁尔灭敏感和耐药的李斯特菌。然而，对消毒液常表现为敏感的是O群。
消毒液的应用影响着医院感染防止工作。消毒液能有效的阻断病原菌的传播。与日益增长的耐药菌相似，病原菌对消毒液的耐药率也在上升，而消毒液的积累造成细胞分子的改变，耐药机制主要表现为主动外排系统和靶位点突变。革兰阴性多重耐药菌的主动外排系统包括QacE和QacE1蛋白。革兰阴性菌的qacE和qacE1基因位于1类整合子的保守片段3’上。在这些整合子的不同区域可以插入可移动的基因簇，并且常带有可导致碳氢酶西类耐药的基因（P，1993；K，1998），如blaIMP,blaVIM，基因。因此QAC可能协助选择出抗生素耐受因为1类整合子作为带有一类消毒剂的编码基因,并且该整合子可作为载体携带编码抗生素抗性基因。 这在含有可编码金属酶或内酰氨酶基因的细菌的扩散中尤为重要,因为碳青霉烯类抗生素有很广的抗菌谱,而且在治疗由多重抗药性细菌的感染中起着重要作用。PCR结果中最重要的是qac基因的存在，qac并没有起到加强（有效的）对消毒液（包括高浓度）的抗性的作用，也许对灭菌剂的抗性有其它的机制，但qac基因会增加菌株耐药的几率。MIC是检测对灭菌剂耐药的最好指标，但不能依靠它来断定敏感性是否下降。本文中细菌敏感性的研究在消毒液的使用浓度下进行，采用公认的消毒液效力载体试验。许多的报道和研究均采用标准菌株做比较，这样试验的结果重复性很好，但是临床菌株对消毒液的敏感性的研究得到更多关注。根据H（2004），ATCC的菌株是实验室里的，并不能很好的反映临床病人分离出的细菌的敏感性。他们认为监测消毒液效力最好采用最近分离出的病原菌。本次试验发现有43%的菌株对消毒液的敏感性较低，正是因为在消毒液使用浓度下进行试验，所以敏感性下降率之高之普遍也说明实际情况。我们认为标准菌株可用做调节，灭菌剂的质控及消毒液的效力监测，但最有必要的是监测临床分离的菌株的敏感性。
    本次研究得出的病原菌对QAC的敏感性方面的数据为以后更多深入的工作（不同病原菌，不同化学因素等）提供参考。同样考虑到对季氨类药物的耐受也很重要.对季氨类药物的耐受也可以通过1类整合子协助选择抗生素耐受,反之亦然(即可以通过药物耐受及1类整合子筛选对基团的耐受) 。此外，我们发现一个有趣的现象：来自同群的菌株对消毒液的敏感性并非相同，因为研究工作量大但效果缺不好，利用PFGE对耐消毒液的细菌分型也许不是可靠的方法。

[ 本帖最后由 clarck7 于 2007-12-26 21:17 编辑 ]

David

最好能告知文章出处

楚楚

这篇文章提供了非常重要的信息，如果能告知文章的出处就好了，这样可以多少确证一下信息的可靠性。

一枝梅

文章上不是标示了文章的出处吗？Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Vol. 100(5): 541-548, August 2005 541，这还不能说明吗？:o :lol

具体的出处是http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0074-02762005000500015&script=sci_arttext

[ 本帖最后由 一枝梅 于 2007-12-27 20:41 编辑 ]

楚楚

我不认识阴文的:Q :Q

clarck7

哦哦哦，,我以后会注意的!!原文有出处,梅版主也贴出来了!
Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Vol. 100(5): 541-548, August 2005

怡之秋

很值得关注的文字，对我们指导和选择消毒产品有现实意义。。。谢谢老师无私分享。。。问好。