【感染科普笔记2023-8-3】探秘病原微生物专栏丨临床微生物实验室如何有效防污染

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作者：陈雨 （贵州省纳雍县人民医院）
审核：宁永忠/蓝雪0816



临床微生物实验室是微生物样本检测的主要阵地，样本与样本、样本与人、样本与实验室之间相互污染，会增加实验室生物安全风险。因此，临床微生物实验室必须配备必要的防污染设施、达到一定环境洁净度，有效防止污染。下面谈谈临床微生物实验室如何有效防止污染。
一、实验室布局一般医院的BSL-2和BSL-1临床微生物实验室布局上分为辅助工作区和核心工作间，区域之间有物理隔离，设置清洁通道（供人员、试剂和其他非污染物品通行）和污染通道（供标本、医废、报废或维修的设备通行）。实验室内推荐自然通风，如果采用集中空调通风系统，应该有独立的通风系统，空调系统过滤器需定期清洁。实验室主入口设有门禁，非实验室内部人员不得出入，授权后方可进入。
二、空气净化

• 紫外线消毒灯照射：每次操前和工作结束后，用紫外线灯照射30～60min，进行空气净化。对生物安全柜每次使用后用紫外灯照射30min后用70%～75%酒精擦拭。紫外线灯定期进行辐照强度检测，辐照强度≥70μW/cm2。另外，应每周使用70%乙醇溶液擦拭紫外线灯管表面，以免灰尘会影响紫外线灯管的穿透作用。
• 气溶胶喷雾器喷雾消毒：实验室发生特殊病原体污染或进行实验室终末消毒时，可选择3%过氧化氢、5000mg/L的过氧乙酸、500mg/L的二氧化氯或按照《医疗机构消毒技术规范》和《医院空气净化管理规范》推荐的消毒剂和具体消毒方法进行气溶胶喷雾器喷雾消毒。进行气溶胶喷雾器喷雾消毒时，必须考虑检验设备的相容性，不得损坏检验设备。只能用于无人情况下。
  

三、环境表面消毒 实验室根据分区进行常规消毒，各分区清洁用品不交叉使用，对于污染区安全柜、台面、地面每日工作结束后进行消毒，一般使用有效氯500mg/L含氯消毒剂进行擦拭消毒。发生特殊病原体污染时，根据目标病原体选择有效的消毒剂和消毒方法。适用时，仪器表面和内部可用75%乙醇擦拭消毒。
四、配备和正确使用实验服装实验室人员应配备一般工作服和实验服在不同区域穿着。进入核心工作间进行具体实验工作时，应在缓冲间（区）更换实验服，穿实验进入核心工作间。不进入核心工作间从事具体的工作，尽在辅助区从事具体实验以外的时，可穿一般工作服。工作服和实验服应定时洗涤。
五、正确使用生物安全柜（BSC）操作前，开启生物安全柜紫外线消毒灯和风机运行3-5分钟，让非洁净的空气排除工作区，生物物安全柜内放置的实验用品应用70%的酒精或其他中性消毒剂擦拭表面清除污染，避免污染的物品放入生物安全柜。
生物安全柜的的使用人员必须经过生物安全相关知识培训，井且熟悉生物安全柜的原理和性能。在使用物安全柜前应仔细阅读厂家的产品使用说明书。生物安全柜的性能必须定期检测。初次启用、搬动、维修和长时间不用后重新启用的安全柜都必须进行性能检测，合格后方可使用。在生物安全柜内操作感染性材料时还必须防范溅出、利器刺伤等容易造成操作者愛感染的危险。实验中如果出现生物安全柜发出告警信号的情况，必须在首先保证操作者安全的前提立即停止实验，关闭生物安全柜操作口，待查明告警原因后按相应应急预案处理。废弃物应装专用容器或包装袋按感染性废弃物处理规范进行处理。操作者必须注意个人防护，操作前应按照生物安全相关要求穿戴好个人防护用品。任何时候都必须透过视窗玻璃进行观察。为了防止操作口处的气幕受到破坏，要尽量避免人员在操作口前走动和快速关闭房间的门，操作者的动作也应尽量舒缓。实验过程中严禁操作者手臂和实验用品遮盖前、后沿的进气格栅，以防破坏柜内的气流平衡，造成样本的污染。所以，生物安全柜内的物品数量应严格控制、有序摆放！一般是左侧清洁，右侧污染。在生物安全柜内进行操作时不得进行文字工作。
当有标本溢(溅)洒，实验室根据标本溢洒程序处理。
六、关于临床标本

• 标本采集合格的标本是临床微生物检测的前提，临床微生物实验室可依据WS/T 640-2018 《临床微生物检验标本的采集和转运》和《临床微生物标本规范化采集和送检中国专家共识》编写实验室微生物标本采集指南，指导和规范微生物标本采集和运送。标本应无菌采集，避免外源性污染，造成检验结果不准确，误导临床治疗。另外，采集标本要适量，不可装满整个容器，避免标本在运送过程中溢洒，或者实验室开盖污染。
• 标本容器应选择广口、无菌、密封性较好的容器，避免标本在运送过程中溢洒造成污染。比如痰盒，用螺旋盖代替手掀盖能降低标本溢洒率，从而减低标本之间污染。
  

七、增强无菌观念，规范无菌操作 所有与微生物标本相关的操作应严格按照无菌操作执行，防止人为污染标本，或因操作不当造成个人污染。临床微生物实验室工作人员必须有严格的无菌操作观念。比如操作前，做好个人防护，佩戴帽子、口罩。操作过程中，夹取无菌物品，必须使用无菌镊子，使用接种环时，灭菌彻底。未经消毒的手、臂均不可直接接触无菌物品或者超过无菌区取物。操作结束后，严格执行手卫生。
切实落实上述防污染措施，保证实验室安全、提高微生物检验质量，为临床提供精准的检验结果，助力抗感染和遏制微生物耐药。
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图文：王小虾

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