沙门氏菌属位相变异血清诱导试验怎么做?

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门氏菌属位相变异血清诱导试验怎么做?

巴斯德之徒

.单相诱导:
将双相菌中的其中一相血清(一般是第2相),加到半固体培养基中(1~2μl./ml,先溶化培养基在50 ℃时加入,并及时混匀),分装试管2ml/支,待凝固后接种针穿刺接种沙门菌,再在上层缓缓加入不含抗血清的50℃半固体2ml,待其凝固后,置35℃培养24~48,跳取培养基表面的冷凝水镜检,如果没有发现细菌,就将环深入到上下层交界处跳取细菌重新进行上述骤,一般经过1~2代就可获得另一相.
2.双相诱导法:
采用半固体培养基倾制平皿70mm碟子大约需要15ml培养基,在培养基凝固后将细菌点种在平皿中心,合盖后正放(切勿倒扣),35℃培养1~2天,取菌落边缘的细菌再次传代在半固体平皿的中心,如此直到出现类似变形杆菌的扩散生长时就算成功,再将边缘的细菌传代到SS培养基上,挑取10个左右的菌落分别与各相血清作玻片凝集试验,这样常常可得到两种不同鞭毛抗原相的单相菌落.

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相变异在沙门菌血清学检验中常有遇到，巴版以上是标准的Gard法，临床实际工作中可稍做简化用起来快一些，当遇到血清凝集疑有位相变异的菌株时，可将现成的ＭＨ平板在微波中溶化，吸去多余的培养基，加入培养基等量的无菌肉汤，待冷却后，用接种环取一满环的已知相血清（通常为第二相）在平板中央涂布为６－１０ＭＭ大小的园形，再将待诱菌点种在圆形中央，孵育２４小时后取最远端菌与未知相血清凝集便可！但若细菌已发生Ｈ－Ｏ变异或某项已丢失（如乙型副伤寒变种），诱导试验也是无法解决问题的，这时还需结合其它详细的生化反应来鉴别！

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谢！斑竹