WS_T 489-2016尿路感染临床微生物实验室诊断

小白天使

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WS/T489-2016尿路感染临床微生物实验室诊断


2016-07-07 发布 2016-12-15 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 发布 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。
本标准起草单位：中国医学科学院北京协和医院、中国人民解放军总医院第一附属医院、北京医院、 海交通大学附属瑞金医院、天津市公安医院、复旦大学附属中山医院、华中科技大学同济医学院附属同济 医院、北京电力医院、香港玛丽医院。


尿路感染临床微生物实验室诊断
1范围 本标准规定了尿液标本临床微生物检验的技术要求。 本标准适用于开展尿液标本细菌培养、鉴定和药物敏感性试验的微生物实验室。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。
2.1 尿路感染 urinary Tract infection 由各种病原体人侵泌尿系统引起的疾病。根据感染部位可分为上尿路感染（肾盂肾炎、输尿管炎） 白细胞尿leukocyturia pyuria新鲜尿液离心后，每个高倍镜视野白细胞超过
3标本采集
3.1总则 宜采集晨尿，嘱患者睡前少喝水或不喝水，尿液在膀胱内潴留至少 4h 以上，可降低假阴性率。无 状的患者应连续采集3天晨尿送检。尿液标本质量的影响因素较多，即使采用侵人性的尿液采集法 仍可能 被皮肤、会阴或尿道等处正常菌群污染，因此减少污染是保证尿液标本质量的关键。
3.2清洁中段尿采集 清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应分开大阴唇，男性应上翻包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿 道口周围。将前段的尿液丢弃，留取中段尿液约 10mL 直接排人无菌容器中，立即送检，采集后于 0.5h 得的尿液标本。
3.3耻骨上膀胱穿刺采集 评估膀胱内细菌感染的“金标准”。消毒脐部至尿道皮肤，对穿刺部位皮肤进行局麻;在耻骨联合和 部中线部位将针头插人充盈的膀胱，从膀胱吸取约20mL尿液;无菌操作将尿液注人无菌螺口杯，送 者最常用的方法。
3.4留置导尿管采集 采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液。先消毒导尿管采样口，按无菌操作方法用注射器穿刺 导尿管吸取尿液;如果需要，将导管夹闭在管中采集尿标本，但夹闭时间不能超过〇.5h。尿液标本不能 过收集袋引流管口流出的方式采集。长期留置导管的患者进行常规尿培养意义不大，这些患者通常会培养 出大量定植菌。
3.5膀胱导尿采集 局部消毒后，采用导尿管经尿道插人膀胱收集尿液，严格采用无菌技术插人导管，避免带人细菌，弃 去最开始导出的15mL?30mL 尿液后再收集培养的尿液。注意避免将下尿道细菌经导管引人膀胱， 致继发性感染。
3.6婴帅儿尿液采集袋采集 由于婴帅儿不能自主控制膀胱收缩，需要用采集袋。此法很难避免会阴部正常菌群的污染，易出现 阳性，因此该方法尿液培养结果阴性更有意义。如培养结果阳性，必要时可用膀胱导尿或耻骨上膀胱穿刺 法采集尿液标本进一步确证有无尿道感染。
3.7其他采集方法 其他不常用的尿液采集方法还包括回肠导管导尿采集、间歇性导尿管采集、肾盂造瘘术、输尿管造 冷藏或添加防腐剂（含0.5mL 的硼酸-甘油 或硼酸-甲酸钠），但均不能超过24h。加人防腐剂的尿液标本，至少采集 3mL 尿液量，以避免高浓度 收集尿液容器为广口的无菌防漏容器，收到尿液标本后应立即接种。冷藏的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。 7.1不合格标本处理收到不合格标本，应与临床医师联系，注明拒收的原因并退回，可要求重新留取标本，并做记录。若 不合格不能重新留取尿液而需培养时，应在报告中注明，并强调此培养结果仅供参考。 7.2标本拒收的情况 标本拒收的情况包括： 标本采集时间超过2h 连续收集24h 的尿液标本； 标本送检时容器有渗漏；1)除耻骨上膀胱穿刺法外，采用其他方法采集标本申请做厌氧菌培养。 8实验室检查 8.1尿常规（与尿路感染相关指标） 8.1.1白细胞酯酶 正常值为阴性，尿路感染时为阳性。 8.1.2 亚硝酸盐 正常值为阴性。阳性常见于大肠埃希菌等革兰阴性杆菌引起的尿路感染，阳性反应程度与尿液中 菌的数量成正比。8.1.3尿蛋白 正常定性为阴性，定量<l〇〇mg 鉴定+药敏2种菌="" 48h="" 培养="" 脂及罗氏培养基。5%c02="" 厌氧培养、gc="" 别选择="" 核分枝杆菌，应当分="" 特殊病原菌感染，="" 帄東、巧克力琼脂、="" 接种至血琼脂="" fl="" 10="" 排尿采集的尿液="" 采集="" 耻骨上膀胱穿刺="" 疗无效的患者="" 发现致病="" 培养未="" 有持续症状既往="" 初步鉴定特殊="" 鉴定+革兰阴性="" 5%c02培="" 或10接种="" 老年患者清洁中段尿="" 留置导尿管患者="" 初步鉴定监测="" ,其他菌10 鉴定+革兰阴性 菌进行药敏试验8.5接种方法 8.5.1轻摇混匀尿液，将定量接种环垂直浸人尿液标本表面下 mm?5mm,将标本吸至环中。 8.5.2在血琼脂帄東上划十字，再进行密集均匀涂布。 8.5.3除接种至血帄東进行定量外，还需分区划线接种至麦康凯或中国蓝琼脂帄東进行菌株筛查。 8.6病原菌同源性检测 病原菌同源性检测可协助诊断多次尿道感染的患者为复发性感染还是再发性感染（如患有反复尿 常用的基因分型方法包括脉冲场凝胶电泳、核酸分型、多位点酶电泳、普通PCR 或多重 PCR 9抗菌药物敏感试验9.1抗 菌药物敏感试验 对菌落计数结果有意义的临床分离菌株，鉴定到种水帄并进行标准抗菌药物敏感试验，可采用微量 汤稀释法、纸片扩散法、Etest法或自动化药敏分析仪等。 9.2直接抗菌药物敏感试验 直接抗菌药物敏感试验仅适用于细菌计数>10 CFU/mL的纯培养菌，其目的是缩短报告时间，减 CFU/mL的标本；由微生物实验室自行解释药敏试验结果。 10结果解释 10.1总述 采用 接种量，计数结果为帄東菌落数X10 CFU/mL;采用10 yL 接种量，计数结果为帄東 CFU/mL。建议临床医师结合尿常规结果分析尿培养结果的临床意义。10.2 —般解释 清洁中段尿定量培养后，单种细菌菌落数>10 CFU/mL可能为感染；<10 CFU/mL可能为污 染，10 CFU/mL需要根据患者的临床表现进行评估，大部分肾盂肾炎和膀胱炎可以根 CFU/mL高度怀疑尿路感染。 10.3不同类型尿培养的解释 不同感染类型的清洁中段尿定量培养结果相应的解释，分别见表 解释见表4。10.4特殊细菌感染的解释 10.4.1采用特殊培养基并延长培养时间后分离出大量的尿道或阴道的正常菌群时，包括棒杆菌属、阴 德纳菌、流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌等，可能与尿道感染相关。10.4.2 况下可自动消失。10.4.3 (Corynelrncl:erium犲犿犻狀犲），可引起前列腺炎和尿道炎，并能产生大量尿素酶。 2社区获得性尿路感染临床表现 白细胞尿 细菌计数 CFU/mL 病原菌种数 结果解释 是否做药 生葡萄球菌>10 CFU/mL考虑比较有意义 C)对于急性前列腺炎的诊断，菌落计 CFU/mL考虑比较有意义 /mL<10 正在使用抗生素C)慢生长或难生长病原菌感染 d)无病原菌感染 不确定 /mL>10 免疫功能正常患者：应重复做尿液细菌学和细胞学检查（可 能处于尿路感染的起始阶 不确定10 不确定>10 不确定<10 /mL<10 无尿路感染或定植不确定 临床表现白细胞尿 <2种病原菌菌尿 CFU/mL 结果解释 是否做药敏试验 无导尿 管患者 /mL>10 慢生长或难生长病原菌感染 d)无病原菌感染 不确定 不确定>10 无尿路感染或病原菌定植不确定 /mL>10 免疫功能正常患者：重复做尿液细菌学和细 胞学检查（可能处于 尿路感染的起始阶段） 免疫功能缺陷患者（如化疗或移植患者） 临床表现白细胞尿 <2种病原菌菌尿 CFU/mL 结果解释 是否做药敏试验 插导尿 管患者 有导尿管存在时白细胞 尿没有意义 >10 有导尿管存在时白细胞 尿没有意义 >10 无尿路感染或病原菌定植不确定 4通过多种有创标本采集技术获取的待检尿液采集标本的技术 临床症状 白细胞尿 >10 /mL细菌计数 mL 病原菌种数 是否做药敏试验 间歇性导尿管、肾盂造 不确定<10 不确定>10 HaeTOd/i/iiZMifaraiw/Zwewzae): 尿道感染的发生率很低。建议在儿童的尿培养中加用巧克力帄東。 10.4.5很少引起尿路感染的细菌:厌氧菌、放线杆菌属、乳杆菌属、-溶血链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌 轻女性尿标本分离腐生葡萄球菌除外）、棒杆菌属和一些不常见革兰阴性杆菌。11报 11.1阴性结果培养 48h 无菌生长，应报告“接种 yL尿液，培养48h 无菌生长（<10 或“接种1〇札尿液，培养 48h 无菌生长（<10 CFU/mL，无临床意义）。严格无菌操作如耻骨上膀胱 穿刺采集的尿液，可直接报告“培养 48h 无菌生长”。 11.2 阳性结果 11.2.1有明确临床意义：报告菌落计数、细菌种名及抗菌药物敏感试验结果。 11.2.2无明确临床意义：报告菌落计数、革兰染色形态特征并注明纯菌或混合菌生长。 12操 导尿管导尿尿液定量培养 结合尿液常规分析 培养结果是否有意义 1尿路感染实验室诊断操作流程标本米集与运送 非侵入性留取 清洁中段尿液 侵入性留取 回肠导尿 耻骨弓上穿刺尿 膀胱镜取尿 膀胱冲洗液 正确运送和贮存 实验室检测 1.鉴定病原菌 2.做抗菌药物敏感性试验 结果报告 报告 报告 1.尿液接种量 菌落计数 2.无菌生长结果 病原菌鉴定结果 标准药敏试验结果

清风qing

学习，感谢老师分享！

清风qing

jcyyhlb

谢谢老师的分享，学习了。