医疗用水的微生物检测，一个医疗机构不得忽视的问题

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医疗用水的微生物检测，一个医疗机构不得忽视的问题

在医疗机构中，几乎所有的医疗活动都离不开水。根据水的用途与卫生学指标，也可以将医疗用水分“等级”，即自来水、反渗水、纯净水、无菌水等。不同的医疗活动要根据医院相关性感染的风险选择水的等级（如下图）。
医院的水源主要来自城市的自来水管网系统，并根据医疗用水的相关指标要求，进行加工处理，如利用自然渗透原理制造反渗水，利用蒸馏技术制造蒸馏水等。由于水源易受到微生物的污染，尤其是医疗用水在处理、输送、储存和使用过程中极易受到微生物的污染，成为水源性病原微生物感染的来源，如军团菌、假单胞菌和克雷伯菌被认为是嗜水性细菌。预防与控制水源性病原微生物的传播，是医院感染管理的重要任务之一。医院内水源性感染的发生有三个重要环节，如果在同一个地点、时间出现，水源性感染的发生就很有可能实现。1、污染的水源

• 水源水的污染，消毒不当导致残留细菌存活；
• 二次供水管理不当，造成水源的微生物污染；
• 医疗用水制备环节、日常管理失误导致微生物指标超标；
• 供水系统年久失修，或水路工程改造造成管道渗漏，导致微生物污染；
• 医院内部水路设计不科学，造成水的滞留区域，甚至某处供水区域长期停用，也可以导致该区域管道中的水处于滞留，有利于残留细菌在此沉积，逐步形成细菌生物膜，并对供水系统造成持续的微生物指标超标；以及使用不当，医务人员洗手与倾倒患者使用的水、体液合用一个水池，造成出水口处的污染等原因。
  
  

2. 感染方式（途径）

• 直接传播
  包括易感患者以吸入和食入的方式感染，如淋浴产生的军团菌气溶胶，容易被患者吸入感染；饮用污染的水所引发患者的腹泻。
• 间接传播
  包括医务人员采用污染的水源洗手后，再触摸患者，以及患者具有侵入性创面所造成的感染；间接传播的另一种常见方式是复用的医疗器械经过高水平消毒，或液体灭菌剂的灭菌后，采用污染的终末漂洗水进行漂洗，造成医疗器械的二次污染所引发的感染传播。
• 易感患者
  
  

因此，医疗用水的微生物学监测，是为患者安全诊疗保驾护航重要的措施之一。根据医疗用水微生物检测的目的，可分为两大类，即常规检测和感染发生后的流行病学调查检测（含干预研究的检测）。常规微生物检测
应根据国家颁布的相关管理规范和行业标准（见表1），制定全院范围内各个科室医疗用水的监测计划与安排，并与相关科室，尤其是微生物检验科进行充分沟通，提前购置、准备必要的采样工具、设备、器皿和培养基等。微生物检测的采样、实验和结果评价等均应严格按照相关的国家或卫生行业标准执行。表1.      部分国标和卫生行业标准中的微生物学指标汇总 常规微生物采样注意事项：1、应制定全院年度医疗用水微生物采样计划与安排。制定医疗用水采样、送检、保存等相关的标准化操作程序（SOP）。2、准备采样用无菌瓶（推荐使用蓝口瓶，见图1）、无菌注射器等采样器具。

图1. 医疗用水采样用蓝口瓶3、样品登记表，内容包括采样日期、编码、科室、地点、水样类别、剂量、采样人等相关的信息。4、采取管道的水样，采样者应做好个人防护（口罩、帽子等），做好手卫生，对出水口（水龙头）进行消毒（如口腔科手机水的采样，应更换一只新的手机），放水时间不少于1min，拧开蓝口瓶收集水样（见图2）；桶装水取样时，可采用无菌注射器，以无菌操作的方式抽取水样，注入无菌蓝口瓶。采集水样的剂量应略大于实验所要的量。水样采集推荐两人配合实施，注意二次污染。 图2. 手机水采样5、送检时间不得超过4h，若样品一时无法检测时，应保存在0℃～4℃环境中，但送检时间不得超过24h。常规微生物检验注意事项1、在洁净实验室或生物安全柜内，以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入无菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每个送检的水样应同时倾注2块平皿，即平行平皿的接种。整批水样检测时，应另用一块无菌平皿，仅倾注培养基，不接种样品，作为空白对照。2、待平皿冷却后，翻转平皿底面朝上，置36℃±1℃、培养48h后进行菌落计数。2块平皿应分别计数，相加后除以2，即为该水样1mL中的菌落总数。若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用。应以无片状菌落的平皿作为该水样（该稀释度）的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的50%面积，其余的菌落发布均匀，则可将平皿一分为二，计数均匀分布的菌落的一侧，计数后乘以2，以代表该平皿上的菌落总数。3、首先选择平均菌落数在30～300之间的平皿计数。计数两块平皿菌落数的平均数，在将平均数乘以相应稀释倍数，作为每毫升中的菌落总数。如果平皿菌落密布时，最好不用“无法计数”作为结果报告。可任意计数其中2块平皿的1cm2中菌落数，除以2求出每平方厘米内平均菌落数，乘以平皿底部面积63.6 cm2（以9cm直径的玻璃平皿为例），即为该水样1mL中的菌落总数。4、菌落计数的报告，菌落数在100以内时，按实有数报告，大于100时，采用两位有效数，在两位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计数，为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。如果2块平皿均未见细菌生长，不得报告“0cfu”。若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。     报告举例说明

• 两块平皿细菌菌落计数后为＞1，且≤100，检测结果按四舍五入报实数。
• 两块平皿细菌菌落计数后为＞100，结果按两位有效数值报告。
• 两块平皿细菌菌落分别为“1、1”，则计数结果为“1”，报告：1CFU/mL。
• 两块平皿细菌菌落分别为“1、0”，则计数结果为“0.5”，报告：≤1CFU/mL。
• 两块平皿细菌菌落分别为“0、0”，则计数结果为“0”，报告：＜1CFU/mL。
  若采集水样全部进行培养，均未见细菌生长，以实验所使用的剂量表示，如＜1CFU/10mL，或＜1CFU/50mL.
• 两块平皿细菌菌落计数后为37750cfu/mL，按四舍五入方法，以指数方式表示，为3.8×10^4。
  
  

来源：SIFIC感染循证资讯

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                          学习了。