编者按: 乙型肝炎病毒（HBV）感染是全世界的一个健康问题。全球约有三分之一的人口（约20亿人）感染过HBV，估计全球超过2.4亿人患有慢性乙型肝炎。导致HBV传播的途径主要有：母婴垂直传播、血液体液传播以及性传播；此外，静脉吸毒者可通过共用针具引起HBV的感染，在理发店和美容店接受纹身、打洞、修指甲和修脚等服务项目时如果共用剃刀、针具也有感染HBV的风险。据报道在HBV感染者家庭成员内共用卫生用具，比如指甲剪，也会引起HBV 的传播，但是这个过程是如何发生的？指甲剪如何作为传播媒介导致HBV播散的呢？这篇文章给出了科学的论证。
指甲剪和指甲可作为HBV DNA的储存库：指甲剪在HBV感染者家庭成员内传播HBV的作用
检索人员：徐亚娟
翻译人员：李 莉
审核人员：覃 婷
背景
目前还没有研究科学地阐明通过个人卫生用具导致HBV的传播。该研究确定了家庭成员内通过指甲剪传播HBV的风险。此外，该研究还评估了HBV感染者的指甲是否含有HBV，患者的血清、指甲标本的HBV DNA水平同患者用过的指甲剪上病毒含量的相关性。
研究方法
该研究纳入了接受治疗的70例表面抗原阳性的HBV感染者（其中HBV DNA阳性63例）和27例健康个体对照。血清、指甲和指甲剪中的HBV DNA水平通过RT- PCR检测。
指甲样品、指甲剪和血清样品的DNA分离。
先用手术刀将指甲样品切成小块，然后通过试剂盒分离DNA，由于指甲组织的角质化故而将操作步骤略微修改。具体步骤为将指甲放在氢氧化钠溶液中，56℃温育15-20分钟并用蒸馏水洗涤两次，这样做的目的是为消除指甲表面可能的HBV DNA污染，进而证明提取出的HBV DNA是存在于指甲组织中。加入蛋白酶K（80μL）并将悬浮液在56℃温育1小时，接着加入ATL缓冲液300μL并孵育悬浮液过夜，其他步骤参照商品说明书进行。
由于目前文献尚缺乏从指甲剪中提取HBV DNA的方法，该研究开发了一种提取方法。即：预实验用HBV DNA阳性患者（已知滴度）和HBV DNA阴性患者的血清样品污染未使用过的指甲剪，并制备加标血清样品（10-108 IU / mL）。将指甲剪的切割缘浸入阴性和阳性标准样品（1个阴性和7个阳性滴定组）中1分钟，每个滴度组放五把剪刀，然后取出剪刀在室温下干燥30天。提取核酸，通过PCR检测加标样品中的HBV DNA。最后把这种方法用于检测97个指甲剪样本（分别来自70名病例组和27名对照组），将指甲剪的切割边缘浸入2mL纯净水中，为防止污染，指甲剪的手持部位不能与纯净水接触。室温下将样品在振荡器上以700转/分孵育2小时，并间隔15分
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发表于 2018-10-11 22:35
发表于 2018-10-12 07:48
