|
|
马上注册登录，享用更多感控资源，助你轻松入门。
您需要 登录 才可以下载或查看，没有账号？注册
|
×
《BES》
2018第31卷第二期 影响因 子1.906(2016-08-22)
新型紫外线消毒器对B超探头表面消毒的应用研究
陈贵秋1、陈羽浩2、易亮1、尹进1、高琼1、宋江南1、李世康1陈培厚1、郭桂平2
（1湖南省疾病预防控制中心410005、2中南大学湘雅医学院410008）
摘要：目的 为控制B超探头表面引起的医院交叉感染，寻找一种适合B超探头表面快速消毒方法，我们在实验室和医院对全球首创的新型紫外线消毒器（用波长为280nm紫外线的LED组件精制而成，简称B超探头消毒器）的消毒效果与B超探头表面消毒应用效果进行研究。方法 用载体定量杀菌试验、模拟现场试验和有机物试验影响试验在实验室观察B超探头消毒器的消毒效果，在医院观察该消毒器对B超探头表面消毒效果及它与B超探头仪器的相容性。即用B超探头消毒器和木制的B超四维探头、线阵探头、阴道探头模型和载体作为试验对象，用人工染菌法将金黄色葡萄球菌（CICC21601）、大肠杆菌（8099）、铜绿假单胞菌（CICC21630）、白色念珠菌（CMCC98001）和枯草杆菌芽胞（CICC10854）染在载体及模型上进行定量杀菌试验和模拟现场试验；将人工污染细菌的玻璃载体置距离为4cm正下方观察功率为30mW的B超探头消毒器与波长为253.7nm功率为30W的紫外线杀菌灯的其杀菌效果；在金黄色葡萄球菌和白色念珠菌菌悬液中分别加入0.3%和3%的牛血清白蛋白，观察B超探头消毒器在有机物存在下的杀菌效果；临床应用观察三种不同方法对B超探头表面的消毒效果：即B超探头使用后采取样品进行细菌总数和致病菌检测，用全自动微生物鉴定及药敏分析系统（VITEK 2 Compact system）对检测出的微生物进行鉴定；在纸巾擦拭后采取样品做细菌总数检测；用B超探头消毒器消毒90s或消毒湿巾擦拭消毒后采取样品做细菌总数检测，用平皿倾注法进行活菌计数。计算不同消毒方法的杀灭率，用sPss19.0软件进行统计学处理，比较不同方法的杀灭率是否有差异？外使用B超探头消毒器对B超探头进行消毒，观察B超探头是否有损害？结果 B超探头消毒器作用5s～10s可杀灭载体上细菌繁殖体和白色念珠菌达到消毒效果，而杀灭抵抗力较强的枯草杆菌芽胞达到消毒效果需作用70s；B超探头消毒器对玻片载体上的枯草杆菌芽孢的杀灭效果比木质模型探头的杀灭效果好；在0.3%和3%的牛血清白蛋白的条件下，B超探头消毒器对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的杀灭效果需分别延长至20s和45s后才能达到消毒要求，试验距离为4cm，波长为280nm紫外线功率只有30mＷ的B超探头消毒器的杀菌效果比功率为30W波长为
项目资助：湖南省卫生计划生育委员会项目编号为C2017060。
作者简介：陈贵秋、男、1964年、副主任技师、从事消毒检验与监测及相关的研究工作。
通讯作者：陈培厚13152064@qq.com、郭桂平、ggp1008@126.com。
253.7nm紫外线杀菌灯的杀菌效果好。我们调查了16家医院1138人共2616个样品。其中普通B超探头表面消毒前968个样品的细菌检出率为98.02%，检测出致病菌和条件致病共23种，细菌总数高达6.07×108CFU/cm2，阴道B超探头表面340样品的细菌检出率为49.41%，检测出4种细菌，细菌总数高达7.50×108CFU/件。32种耦合剂有46.87%检测出细菌，细菌总数高达1.71×107CFU/g，有5种细菌。三种不同消毒方法经统计学处理p＜0.01，有显著性差异，以B超探头消毒器消毒效果最好，676样品经其消毒处理后未检出细菌，杀灭率为100%,其他消毒方法均达不到消毒要求。某医院使用B超探头消毒器2年，B超探头仪器无损害。结论 调查结论普通B超探头使用的耦合剂微生物污染不容乐观，其表面微生物污染严重；阴道B超探头表面由于保护膜损坏易污染又影响检查清晰度。为控制医院B超探头交叉感染应使用快速有效的消毒方法，而B超探头消毒器具有作用快消毒效果好并与B超仪器有很好的相容性，长期使用消毒剂消毒对B超探头有损害作用，因此B超探头消毒器是控制B超探头引起的医院交叉感染的利器，值得在医疗机构大力推广应用。
关键词： 新型紫外线消毒器 B超探头 微生物污染 消毒效果 相容性
随着科学技术的进步，医疗机构已广泛使用超声诊断技术，根据国内外的研究报道：超声探头和耦合剂的微生物污染严重,可能是引起医院交叉感染的载体。为控制B超探头表面引起的医院交叉感染，寻找一种适合B超探头表面快速消毒方法，我们在实验室和医院对全球首创的新型紫外线消毒器（用波长为280nm紫外线的LED组件精制而成，简称B超探头消毒器）的消毒效果与B超探头表面消毒应用效果进行研究，现将结果报告如下：
1.材料与方法[1]：
1.1 B超探头消毒器及探头模型由湖南海尔斯医疗科技有限公司提供；试验菌有金黄色葡萄球菌（CICC21601）、大肠杆菌（8099）、铜绿假单胞菌（CICC21630）、白色念珠菌（CICC98003）和枯草杆菌黑色变种芽胞（CICC10854简称枯草杆菌芽孢）均由军事医学科学院消毒检测中心提供；全自动微生物鉴定及药敏分析系统（VITEK 2 Compact system）系法国梅里埃公司生产。
1.2 菌悬液制备：取各试验菌纯化分离的单个典型菌落接种营养琼脂培养基斜面（白色念珠菌用沙堡培养基），于36℃±1℃温箱培养24 h，取其新鲜培养物分别用胰蛋白胨生理盐水（TPs）洗下菌苔，充分混合均匀制备成菌悬液，其中枯草杆菌芽孢36℃±1℃温箱培养7d，室温放置2d～3d，待芽孢形成率＞95%制成悬液。用TsB营养肉汤（有机物影响试验在白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的菌悬液分别加入0.3%和3%的牛血清白蛋白）将菌悬液稀释至所需浓度，用滴染法取0.02ml于B超探头模型（1cm×1cm）不同区域内及玻璃载体片（1cm×1cm）上，使回收菌数达5×105CFU/片(cm2)～5×106CFU/片(cm2)，置37℃温箱内干燥备用。
1.3载体定量杀菌试验：将玻璃载体片放入B超探头消毒器内，开启电源按规定的时间进行消毒，消毒完毕，取出载体片并移入含5mLPBs试管内，取样液进行活菌计数，计算杀灭对数值，试验设阳性、阴性对照，重复3次。同时将B超探头消毒器与波长为253.7nm功率为30W的紫外线杀菌灯在距离为4cm下观察其杀菌效果。
1.4模拟现场消毒试验：将B超探头模型放入B超探头消毒器内，开启电源消毒90s，消毒完毕，用采样液湿润无菌棉签取样并移入含5mLPBs试管内，取样液进行活菌计数，计算杀灭对数值。试验同时设阳性、阴性对照，重复3次。
1.5有机物影响试验：将已制好含0.3%和3%的牛血清白蛋白的载体片放入B超探头消毒器内，开启电源按规定的时间进行消毒，消毒完毕，取出载体片并移入含5mLPBs试管内，取样液进行活菌计数，计算杀灭对数值，试验设阳性、阴性对照，重复3次。
1.6 B超探头表面消毒应用研究：我们调查了16家医疗机构，1138人共2616个样品，其中普通B超探头采取968人，阴超探头采取170人，普通B超探头分别于消毒前、纸巾擦拭后和消毒后采取样品，阴超探头分别采取消毒前后顶部和侧部的样品。B超探头表面消毒前采取的样品检测细菌总数，检测出的细菌用全自动微生物鉴定及药敏分析系统（VITEK 2 Compact system）进行鉴定。用纸巾擦拭后采样检测细菌总数，分别用B超探头消毒器消毒90s和消毒湿巾擦拭消毒后采样检测细菌总数，用平皿倾注法进行活菌计数，计算不同清除方法的杀灭率，用sPss19.0软件进行统计学处理。另外使用B超探头消毒器对B超探头进行消毒，观察B超探头是否有损害？
2.结果
2.1开启B超探头消毒器作用5s对载体上的大肠杆菌和铜绿假单胞菌的杀灭对数值大于3.00，作用10s金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的杀灭对数值大于3.00，作用70s对载体上的枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭对数值大于3.00。结果见附表1。
表1 B超探头消毒器杀菌效果
实验
微生物 试验
序号 不同时间（s）杀灭对数值（KL） 阳性对照组菌数的对数值
5 10 15
大肠
杆菌 1 3.27 4.61 ＞6.48 6.48
2 3.21 4.66 5.54 6.62
3 3.28 4.87 ＞5.74 5.74
铜绿
假单胞菌 1 3.10 4.27 4.69 6.43
2 3.06 4.57 5.06 6.49
3 3.06 4.26 4.77 5.94
10 20 30
金黄色
葡萄球菌 1 4.26 6.14 ＞6.53 6.53
2 4.20 5.27 ＞6.57 6.57
3 4.26 5.17 ＞6.60 6.60
白色
念珠菌 1 3.41 4.49 ＞5.84 5.84
2 3.15 4.22 ＞5.61 5.61
3 3.14 4.26 ＞5.65 5.65
枯草杆菌
芽孢 30 60 90
1 1.97 2.99 5.73 6.12
2 1.95 2.94 ＞6.03 6.03
3 1.96 2.94 ＞5.97 5.97
注：①阴性对照无菌生长;②试验重复3次取均值。③作用70s对枯草杆菌芽孢的杀灭对数值大于3.00。
2.2 试验距离为4cm，波长为280nm功率只有30mW的B超探头消毒器的杀菌效果比功率为30W波长为253.7nm紫外线杀菌灯的杀菌效果好。结果见表2。
2.3 开启B超探头消毒器作用时间延长至20s对载体上含有0.3%小牛血清白蛋白的金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的杀灭对数值大于3.00，作用时间延长至45s后对载体上3%的小牛血清白蛋白的金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的杀灭对数值大于3.00。见表3。
表2 距离为4cm不同波长紫外线消毒器的杀灭效果
样品
名称 微生物 试验序号 不同时间（s）的杀灭对数值（KL） 阳性对照组菌数的对数值
10 20 30
B超探头消毒器
金黄色葡萄球菌 1 4.26 6.14 ＞6.53 6.53
2 4.20 5.27 ＞6.57 6.57
3 4.26 5.17 ＞6.60 6.60
白色
念珠菌 1 3.61 4.11 ＞5.84 5.84
2 3.58 4.20 ＞5.61 5.61
3 3.11 4.18 ＞5.65 5.65
253.7nm30W紫外线杀菌灯
金黄色葡萄球菌 1 4.16 4.92 5.22 6.53
2 4.10 4.89 5.20 6.57
3 4.08 4.80 5.17 6.60
白色
念珠菌 1 3.05 3.29 4.71 5.84
2 3.07 3.22 4.56 5.61
3 3.64 3.31 4.87 5.65
注：①阴性对照无菌生长;②试验重复3次取均值。
表3 B超探头消毒器有机物影试验
试验
序号 实验
微生物 牛血清白蛋白（%） 不同时间（s）的杀灭对数值（KL） 阳性对照组菌数的对数值
10 20 30
1
2
3 金黄色葡萄球菌
白色念珠菌 0.3 2.64 3.61 5.09 5.96
0.3 2.24 3.82 4.76 6.11
金黄色葡萄球菌
白色念珠菌 0.3 2.49 3.43 4.53 6.04
0.3 2.16 3.85 4.68 6.22
金黄色葡萄球菌
白色念珠菌 0.3 2.62 3.58 4.66 6.23
0.3 2.11 3.74 4.69 6.36
15 30 45
1
2
3
金黄色葡萄球菌
白色念珠菌 3.0 2.55 2.88 4.39 5.74
3.0 1.84 2.62 4.20 5.82
金黄色葡萄球菌
白色念珠菌 3.0 2.44 2.92 4.63 6.57
3.0 1.98 2.66 4.06 6.67
金黄色葡萄球菌
白色念珠菌 3.0 2.35 2.83 4.54 6.26
3.0 2.16 2.62 4.07 6.69
注：①阴性对照无菌生长;②试验重复3次取均值。
2.4 B超探头消毒器对四维探头、线阵探头和阴道探头模型正面上人工污染的枯草杆菌芽孢的杀灭对数值均大于3.00，而侧面的杀灭对数值为1.17～2.95。结果见表4。
表4 B超探头消毒器模拟试验结果
实验
微生物 不同B超探头模型 试验
序号 作用90（s）不同位置的杀灭对数值（KL） 阳性对照组菌数的对数值
底正面 长侧面 短侧面
枯草杆菌
芽孢 四维探头 1 3.53 1.37 1.33 6.12
2 3.57 1.40 1.37 6.17
3 4.48 1.34 1.35 6.13
线阵探头 1 5.73 2.18 2.89 6.12
2 5.63 2.28 2.95 6.17
3 5.36 2.25 2.91 6.13
阴道探头 1 4.52 1.63 1.17 6.12
2 4.63 1.68 1.55 6.17
3 4.43 1.23 1.22 6.13
注：①阴性对照无菌生长;②试验重复3次取均值。
2.5 医院B超探头污染调查与消毒应用研究结果：检测32个耦合剂样品有46.87%检测出细菌，细菌为光滑假丝酵母菌、洋葱伯克霍尔德菌、伴放线凝聚杆菌、溶血葡萄球菌和噬酸代尔夫特菌，细菌总数高达1.71×107CFU/g；检测普通B超探头表面消毒前的968个样品，细菌检测出率结果98.01%，细菌总数高达6.07×108CFU/cm2，有的样品检测出2～3种细菌，普通B超探头表面检测出致病菌和条件致病共23种，主要有：表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、溶血葡萄球菌、粘质沙雷菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、头状葡萄球菌和藤黄微球菌等致病菌和条件致病菌；检测阴道B超探头表面340样品，细菌检出率为49.41%，检测出4种细菌为洛非不动杆菌、枯草芽孢杆菌、沃氏葡萄球菌和肺炎克雷伯菌，细菌总数高达7.50×108CFU/件，其中顶部消毒前菌落数对数值均值为1.83±0.59，侧面比顶部污染较严重，消毒前菌落数对数值均值为2.96±1.80，见表5；三种不同清除方法经统计学处理p＜0.01，见表5，有显著性差异。以B超探头消毒器消毒效果最好，676样品经其消毒处理后未检测出细菌，杀灭率为100%；消毒湿巾消毒148个样品的杀灭率为98.07%±9.86%；纸巾擦拭484个样品的清除率为92.59%±12.76%，见表6。某医院使用B超探头消毒器2年对B超探头仪器无任何损害。
表5 三种不同方法对B超探头表面的细菌清除效果比较
序号 清除方法 样本量 消毒前菌落数对数值 消毒后菌落
数对数值 杀灭率（%）
1 纸巾擦拭 484 4.12±1.42 2.13±1.18 92.59±12.76
2 消毒湿巾擦拭 148 4.27±1.41 0.91±1.41 98.07±9.86*
3 B超消毒器消毒 336 4.05±1.42 0 100.00*#
注：*与1比较p＜0.01；#与2比较p＜0.01。
表6阴超探头的不同部位消毒效果比较
B超类型 部位 样本量 消毒前菌落数对数值 消毒后菌落数对数值 杀灭率
阴道B超 顶部 170 1.83±0.59 0 100.00%
侧面 170 2.96±1.80 0 100.00%
3.讨论
3.1国内外的研究结果显示B超探头表面微生物污染严重。国外有研究报告[2]：超声探头、耦合剂、检验床单上携带有大量不同种类的微生物，如需氧芽孢菌，金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌，白色念珠菌，洋葱克雷伯菌，铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌出现比率最高为33.8%，甚至有导致感染爆发的风险；如德国某大学医院三名新生儿罹患金黄色葡萄球菌脓皮病，调查结果证实为院内感染暴发，是超声波检查所使用的凝胶引起的交叉感染；法国Jean-sebastien Casalegno等[3]报告认为：生殖器HPV感染除经性传播和母婴传播外，还可以经医院经超声诊断设备交叉感染HPV，这一传播途径还没有被人民认识而引起相应的重视。虽然我国没有超声诊断设备引起的医院交叉感染爆发的报告，但是超声探头表面的污染非常严重，如杨菊兰等报告[4]：共采集体检专用B超探头标本104份，细菌污染阳性率100％。分离的菌株中以革兰阳性球菌为主，占76.93％。分别用生理盐水擦洗、500 mg/L含氯消毒剂和75％酒精擦拭消毒B超探头，对自然菌清除率分别为98.18％、99.82％和99.78％；黎明等报告[5]：对超声探头污染的表皮葡萄球菌进行了分子流行病学同源性的研究。本研究调查了16家医院，消毒前1308个样品，细菌检测出率为98.02%，有的样品检测出2～3种细菌，细菌总数高达6.07×108CFU/cm2，普通B超探头表面检测出致病菌和条件致病共23种。阴道B超探头表面细菌总数高达7.50×108CFU/件，阴道B超探头表面检测出5种细菌。32种耦合剂有46.87%检测出细菌，细菌总数高达1.71×107CFU/g，有5种细菌。这与杨菊兰[4]等报告不同，可能是我们选的医院有儿童医院、妇妇幼保健院和综合性医院更有代表性。
3.2国内外对超声诊断设备消毒的管理。为控制超声诊断设备表面的污染微生物可引起医院感染，国内外对超声诊断设备制定了相应的操作规范和标准。美国CDRH / FDA在2008年发布的超声仪及探头生产商行业指南[6]，规定如果探头在患者之间重新使用，则应当提供如何清洁消毒的操作建议程序。美国疾病控制预防中心[7]要求按spaulding分类法将医疗设备划分为：非关键设备，半关键设备，关键设备，制定相应的消毒要求和消毒方法。美国FDA最新消毒方案推荐使用低温等离子灭菌及UV-C光照消毒；澳大利亚[8]对超声探头的处理标准是基于As/NZs 4187:2014和As/NZs 4815:2006，这些标准详细说明医疗设备必须消毒；我国消毒技术规范和消毒管理办法要求对接触皮肤的用品要进行消毒处理，对超声用的探头要求一人一用一消毒。
3.3本研究对全球首创的新型紫外线B超探头消毒器在实验室的消毒效果及B超探头表面消毒应用效果进行研究，结果表明开启B超探头消毒器作用5s～10s可杀灭载体上细菌繁殖体和白色念珠菌，而杀灭抵抗力最强的枯草杆菌芽胞需作用70s达到消毒效果；试验距离为4cm，紫外线波长为280nm功率只有30mw的B超探头消毒器的杀菌效果比波长为253.7nm功率为30w的紫外线杀菌灯的杀菌效果好，这可能与细菌和病毒喜欢280nm紫外线而吸收该波长的紫外线有关；在0.3%和3%小牛血清白蛋白存在下，其消毒作用时间分别延长至20s和45s才能达到消毒效果，因此我们用紫外线消毒超声诊断设备的表面时，先对其表面进行清洁处理后，再用B超探头消毒器进行消毒，这样消毒效果更好。我们用B超探头消毒器对木制的四维探头、线阵探头和阴道探头模型进行消毒处理90s，其模型正面上人工污染的枯草杆菌芽孢的杀灭对数值均大于3.00，侧面的消毒达不到消毒效果，这与侧面紫外线照射线阴影效应有关，提示我们要对B超探头表面全方位进行消毒处理。B超探头消毒器对玻片载体上的枯草杆菌芽孢的杀灭效果比木质模型探头的杀灭效果好，这是玻片载体表面比木质模型探头表面光滑的原故。在医院用三种不同消毒方法对B超探头表面进行消毒处理，经统计学处理p＜0.01，有显著性差异，其中以B超探头消毒器消毒效果最好，676个样品经其消毒处理后未检测出细菌，杀灭率为100%，其他2种方法均达不到消毒要求；某医院使用B超探头消毒器2年，B超探头仪器无损害。本研究利用波长280nm的紫外线制成的B超探头消毒器具有良好的杀菌效果，作用快速，使用方便。目前关于波长为280 nm的紫外线消毒器用于超声诊断设备表面消毒的报道鲜见。
综上所述普通B超探头使用的耦合剂微生物污染不容乐观，其表面微生物污染严重；阴道B超探头由于保护膜影响检查清晰度又易损坏而污染。为控制医院B超探头交叉感染应使用快速有效的消毒方法，而B超探头消毒器具有作用快消毒效果好并与B超仪器有很好的相容性，长期使用消毒剂消毒对B超探头有损害作用，因此B超探头消毒器是控制B超探头引起的医院交叉感染的利器，值得在医疗机构大力推广应用。（湖南省儿童医院李先斌及有关市CDC和医院感染科同志大力支持特此申谢）
参考文献
[1] 卫生部卫生法治与监督司.消毒技术规范［s］.北京：中国人民共和国卫生部，2002.
[2] L Moshkanbaryans，C Meyers，A Ngu，J Burdach The importance of infection prevention and control in medical ultrasound 《Australasian Journal of Ultrasound in Medicine》, 2015, 18(3):96-99
[3] Jean-sebastien Casalegno， Karine Le Bail Carval， Daniel Eibach，et al. High Risk HPV Contamination of Endocavity Vaginal Ultrasound Probes: An Underestimated Route of Nosocomial Infection? Available: http:// www.plosone.org，2012，7(10)：e48137
[4] 杨菊兰、齐海燕、王燕；医用B超探头的细菌学监测及消毒措施探讨[J].中国消毒学杂志, 2012, 29(11):1007-1008
[5] 黎明、刘丽红、甘莉萍； 超声探头表皮葡萄球菌分子流行病学同源性研究[J].临床超声医学杂志, 2010, 12(04):222-224
[6] 美国CDRH / FDA超声仪及探头生产商行业指南 《Guidance for Industry and FDA staff - Information for Manufacturers seeking Marketing Clearance of Diagnostic Ultrasound systems and Transducers；september 9, 2008》。
[7] Rutala WA, Weber DJ.美国医疗设施消毒灭菌指南。2008年美国疾病控制中心.
[8] 澳大利亚 4187 As/NZs可重复使用的医疗设备处理。2014年. |
|
/1 
发表于 2018-4-25 16:16