支原体肺炎实验室诊断的金标准是什么？

楚楚

最近几天怀疑某病区有支原体肺炎的小暴发，求助各位：支原体肺炎实验室诊断的金标准是什么？谢谢！

拙凌

一个指标是肺炎支原体的培养，但这个时间较长；另一个是肺炎支原体IgG、IgM抗体的检测，这是从血清中检出的，比较容易开展，但对环境中的肺炎支原体检测没法进行。还有就是PCR检测，目前常用的是荧光PCR方法，标本可以选用范围较广，可以早期、快速、准确、敏感地诊断感染。

巴斯德之徒

对于肺炎支原体培养法是金标准，由于生长周期长且鉴定比较困难，所以临床上很少使用；
倒是PCR法总体来说比较令临床满意，既快速而且拷贝数高低也能反映感染的轻重，可推荐采用。
至于IgM抗体就有一定滞后性和假阴性了。由于抗体产生大多在5~7天后，而很多病人肺炎支原体感染属于自限性感染，抗体水平普遍较低，不容易检测到，还有就是等体内有抗体产生时病人已经进入康复阶段，所以基本不反应现行感染；另外，该类微生物在有些人中还会有隐形感染,也是IgM抗体也会是阳性，但人并没有任何症状——所以，抗体的诊断方法以及培养的方法一般仅用于近期感染的诊断和流行病学研究，没有大的临床价值。

gjs661

巴版能否具体介绍一下PCR法标本采集、保存方法。谢谢。

楚楚

谢谢拙凌和巴斯德之徒的解答！
如果医院只做抗体检测，为了明确诊断，如何提高准确率？
第一，抗体检测在什么病程取样最好？发病后5-7天？据称大多数成人已产生抗体，假阳性率是不是很高？又或者病情不重，假阴性率是不是也很高？
第二，如果提高抗体检测的敏感度和特异度？是不是第一次抗体检测以后，在另一个时间段再取样检测抗体，看看滴度是不是呈4倍以上增长？
上学时免疫没有学好，谢谢解答！:$

gjs661

我们医院目前不做PCR法，只能靠抗体检查，并且近一年多本地肺炎支原体感染发病较高。
我们已经发现在手足口病、病毒性脑膜炎患者中有同时存在肺炎支原体感染的。
在我所发的肺炎支原体肺炎专家座谈中儿童呼吸专家洪建国说，病程5~7天者MP-IgM阳性率只有30%。
我也发现多例病程5~7天之内的病毒性脑膜炎孩子，MP-IgM阴性，在常规治疗后仍然发热，在病程8~10天复查MP-IgM转为阳性，阿奇霉素治疗有效。
我们是按照1：160为阳性，有治疗意义。

请看看这两个主题帖。


专家座谈 肺炎支原体肺炎的诊治 2008.pdf  

专家座谈：小儿肺炎支原体肺炎诊断治疗中的几个问题 2002

gjs661

补充：由于我们这里肺炎支原体感染较高，我们是在病毒性脑膜炎患者入院后查大生化是常规查MP-IgM，同时查血CRP，前者协助诊断是否同时有肺炎支原体感染，后者作为是否有细菌感染的参考指标。

拙凌

确实如海管所说，肺炎支原体的诊断不能仅仅依靠抗体的检测，还需要其它实验室指标共同参与。
前面巴版已经指出，IgM抗体检测具有滞后性，一般在肺炎支原体感染并出现症状后的第7天才可以检测到，第10天-30内浓度可达高峰，所以海管所说5-7的检出率只有30%是完全可能的。“在病程8~10天复查MP-IgM转为阳性，阿奇霉素治疗有效。”实际上是这时抗体刚刚出现，所以治疗有效。
根据《检验操作规程（第三版）》，IgM抗体多在初发感染时检测到，因此，高浓度的抗体多频繁出现于年轻人身上，相反，年纪大的人因为通常经历了重复感染，该抗体浓度常常很低或检测不到。

拙凌

4# gjs661

用于PCR实验的标本采集比较简单，可根据诊断目的，选用咽拭子标本、支气管肺泡灌洗液、鼻咽吸出物、鼻咽洗液、胸水及脑脊液等。
样本须冷藏运送。
但是保存比较麻烦，需要对原始标本进行一系列处理后，冷冻保存。

海燕

3# 巴斯德之徒
看了您的指导，对临床很有帮助，谢谢。上月，我院一名职工家庭成员短时间内先后患肺炎，我们分析后，考虑为支原体肺炎，经对症治疗7天左右症状好转，后实验室监测为抗体阳性，支原体感染，但报告是滞后的。以后应采用PCR监测，对临床的帮助意义会更大。

巴斯德之徒

4# gjs661  

用于PCR实验的标本采集比较简单，可根据诊断目的，选用咽拭子标本、支气管肺泡灌洗液、鼻咽吸出物、鼻咽洗液、胸水及脑脊液等。
样本须冷藏运送。
但是保存比较麻烦，需要对原始标本进行一系列处理 ...
拙凌 发表于 2009-7-13 08:27

                               
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说得不错！
一般咽拭子、鼻咽析出物、鼻咽洗液或者鼻拭子多用于带菌者筛查，阳性表明带菌，但不一定有感染；
诊断支原体肺炎需要采用支气管肺泡灌洗液或者清洁口腔后采集的来自肺部的痰液；在发病时采集的样本拷贝数多＞10^5 .低拷贝数需要排除口腔分泌物污染。
胸水用于诊断重症肺炎合并胸水时；CSF则用于诊断肺炎支原体导致的脑膜炎——但这二者在临床罕见。

需要注意的是标本采集和运送一定要及时，采集时间一般选在病人症状明显时即发热咳嗽时；标本采集好后要及时送检，由于肺炎支原体对理化因素的抵抗力差，在室温（20~30℃）时最多稳定1小时，但在低温下稳定时间较长。如果做PCR采用冰冻是一种非常好的保存办法。

gjs661

8# 拙凌

您让我明白了为什么儿童1:160阳性，而成人1:80阳性。谢谢。

xuling02

哦~支原体肺炎诊断是这样的啊~PCR法最快速~