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1血液标本采集和处理 1.1采集部位消毒 1.1.1一步法:葡萄糖酸氯己啶作用30s,或70%异丙醇消毒后自然干燥。 1.1.2三步法: a)70%乙醇擦拭静脉穿刺部位,作用30s以上、待干; b)1%-2%碘酊从穿刺点向外画圈消毒至消毒区域直径>3cm,作用30 s或10%碘伏作用 60s; c)70%乙醇脱碘;对碘过敏者,用70%乙醇消毒60 s,待乙醇挥发干燥、采集标本。 1.2标本采集 宜在抗真菌药物使用前,发热初期或寒颤期采静脉血。采集后立即注入血培养瓶内并轻轻摇匀。至少采集2套。标本与培养基比例为1/10-1/5(成人每瓶8 ml-10ml),应包括需氧瓶或真菌瓶 1.3标本处理 2h内常温送检。若不能及时送检,则常温保存。 2骨髓标本采集和处理 2.1标本采集 使用肝素化的注射器或溶解离心管采集骨髓液0.5ml(儿童)至3 ml(成人)后送检。 2.2标本处理 15 min内常温送检。若不能及时送检,则常温保存。不宜常规做骨髓液培养,如需培养可将骨髓液接种于培养瓶,但易出现假阳性。骨髓液需同时做吉姆萨染色镜检。 3静脉导管标本采集和处理 3.1标本采集 剪取导管尖段5 cm置于无菌容器中送检。 3.2标本处理 15 min内常温送检。若不能及时送检,则4℃保存。将导管置于血平板上,使用无菌镊子将其从平板一端滚动至另一端,滚动4次,做导管尖Maki法半定量培养。不应使用含放线菌酮的培养基。 4无菌体液(脑脊液、心包液、腹水和关节液)标本采集和处理 4.1标本采集 脑脊液使用脊髓穿刺针采取后送检。其余的无菌体液使用含肝素的无菌真空采血管采集。 4.2标本处理 15 min内常温送检。若不能及时送检,则常温保存(不能冷藏)。标本大于2 ml,则2 000g离心10 min,取沉渣接种。若标本量少于2 ml,则将标本直接接种于培养基。宜使用细胞离心机对无菌体液进行涂片镜检。脑脊液可直接接种于血培养瓶。
5脓液、引流液、创面分泌物及窦道 5.1标本采集 5.1.1开放性创口:用无菌生理盐水冲洗创面后,应采集病灶活动性边缘组织标本。 5.1.2封闭性脓肿:局部皮肤消毒后用注射器抽取脓血性液体送检。 5.2标本处理 2h内常温送检。将标本直接接种于培养基。较浓稠的标本应使用消化液处理。
6下呼吸道标本(深部痰液、支气管吸取物、肺泡灌洗液)采集和处理 6.1标本采集 清洁口腔后采集清晨第一口痰液。采用外科方法进行支气管毛刷取样和采集肺泡灌洗液。唾液或24h痰液都不能用于真菌培养。 6.2标本处理 2h内室温送检;若不能及时送检,则4℃保存。将标本接种至含抗生素的选择培养基中。较黏稠的下呼吸道标本应使用消化液处理,并2000g离心10min后取沉渣接种。
7眼(角膜刮片、玻璃体液等)标本采集和处理 7.1标本采集 角膜刮片或针吸玻璃体液。 7.2标本处理 15 min内常温送检。若不能及时送检,则常温保存。角膜刮取标本直接接种至不含抑制剂的培养皿中,采用X或C型涂菌方式,玻璃体液离心后取沉淀物接种。
8组织标本采集和处理 8.1标本采集 采集标本后使用无菌容器转运,如标本量较少,应滴数滴无菌盐水保湿。 8.2标本处理 及时送检,否则应室温保存。采用灭菌眼科剪将组织标本剪成米粒大小后接种培养;若可疑组织胞浆菌感染、研磨组织并培养,或采用裂解离心技术处理。若可疑接合菌感染、不研磨组织直接接种。直接镜检应研磨组织,但会影响丝状真菌培养阳性率。建议病理科与检验科联合检查组织标本。
9尿液标本采集和处理 9.1标本采集 采集早晨第一次清洁尿液、耻骨上联合穿刺尿液或导管尿液10ml-50ml,不应采用24h尿液。 9.2标本处理 2h内常温送检;若不能及时送检,则4℃保存。尿液接种前应2000g离心10min,取沉渣进行镜检和接种。尿液真菌培养不宜定量检测。
下列情况为不合格标本:a)标本标识与申请单不符,标识错误或无标识;
b)未采用无菌容器或容器选择不恰当; c)标本采集未按规定消毒或清洁创口; d)标本采集量过少; e)标本保存方式不恰当或保存时间超过规定; f)血培养瓶破碎、渗漏或超过有效期; g)稀薄唾液或低倍镜下上皮细胞数大于10个; h)尿液采集未清洗会阴部及尿道口。
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