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环境卫生学监测 一、手的消毒效果监测（2009年《医务人员手卫生规范》WS/T 313） 1.采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采样。 2.采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。 3.检测方法：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶化的45℃~48℃的营养琼脂15ml～18 ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36℃±l℃混箱培养48h，计数菌落数。 细菌菌落总数计算方法：细菌菌落总数(cfu/cm2)=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积(cm2) 4.填写报告单结果时应注明“合格”或”不合格“，或附上相应项目的标准要求参考值 5.判定标准：卫生手消毒后医务人员手：表面的菌落总数应≤10cfu/cm2； 外科手消毒后医务人员手：表面的菌落总数应≤ 5cfu/cm2。 二、物体表面：（2012年《医疗机构消毒技术规范》） 1.采样时间：在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。 2.采样方法：用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采面积≥100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。
3.检测方法：充分震荡采样管后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml～20ml，36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。 细菌菌落总数计算方法：物体表面菌落总数（cfu/ cm2）=平均每皿菌落数X洗脱液稀释倍数采样面积（cm2) 小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。
4.判定标准：洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/ cm2。
儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/ cm2。 三、空气：（2012年《医疗机构消毒技术规范》） 1.采样时间：采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；或怀疑与医院感染暴发有关时采样。Ⅰ级洁净手术室和洁净辅助用房检测前，系统应已运行15min，其他洁净房间应已运行40min，在确认风速、换气次数和静压差在正常范围后，再检测空气中的细菌菌落数。 2.采样方法：当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点检测。测点可均匀布置，但应避开送风口下方，同时设培养基对照和操作过程对照。整个操作应符合无菌操作的要求。 （1）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中暴露30min, 36℃±1℃恒温箱培养48h, 培养皿中的菌落数(CFU)代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。 （2）采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上； （3）在手术区检测时无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25cm。 洁净手术部（室）及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB 50333要求进行监测。浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。房间面积＞10m2者，每增加10m2增设一个采样点。
监测布点如下： 1）局部百级、周围千级（图1）：手术区布放13点，周边区布放8点（每边内2点）。 file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps14E.tmp.jpg 图1---局部百级、周围千级监测布点 2）局部千级、周围万级（图2）：手术区布放5点（双对角布点），周边区布放6点（长边内2点，短边内1点）。 file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps14F.tmp.jpg 图2---局部千级、周围万级监测布点 3）file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps150.tmp.jpg局部万级、周围10万级（图3）：手术区布放3点（对角布点），周边区布放4点（每边内1点）。 图3---局部万级、周围10万级监测布点 4）10万级（图4）：布放5点（避开送风口正下方）。 file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps151.tmp.jpg 图4---10万级监测布点 5）30万级（图5）：面积>30m2布放4点，面积≤30m2布放2点（避开送风口正下方）。 file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps152.tmp.jpg 图5---30万级监测布点 未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。 3.检测方法：将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数。若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。 细菌菌落总数计算方法：沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿．暴露时间）
浮游菌法计算公式：空气中菌落总数（cfu/m3）=采样器各平皿菌落数之和（cfu) 采样速率（L/min）x采样时间（min） × 1000 4.判定标准： 洁净手术室的等级标准(空态或静态) 等级 | 手术室名称 | 沉降法(浮游法)细菌最大平均浓度 | 表面最大染菌密度(个/cm2) | 空气洁净度级别 | 手术区 | 周边区 | 手术区 | 周边区 | Ⅰ | 特别洁净手术室 | 0.2个/30min·φ90皿(5个/m3) | 0.4个/30min·φ90皿(10个/m3) | 5 | 100级 | 1000级 | Ⅱ | 标准洁净手术室 | 0.75个/30min·φ90皿(25个/m3) | 1.5个/30min·φ90皿(50个/m3) | 5 | 1000级 | 10000级 | Ⅲ | 一般洁净手术室 | 2个/30min·φ90皿(75个/m3) | 4个/30min·φ90皿(150个/m3) | 5 | 10000级 | 100000级 | Ⅳ | 准洁净手术室 | 5个/30min·φ90皿(175个/m3) | 5 | 300000级 |
注：1．浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降法和浮游法互相换算的结果。 2．Ⅰ级眼科专用手术室周边区按10000级要求。 洁净辅助用房的等级标准(空态或静态) 等级 | 沉降法(浮游法)细菌最大平均浓度 | 表面最大染菌密度(个/cm2) | 空气洁净度级别 | Ⅰ | 局部：0.2个/30min·φ90皿(5个/m3)其他区域0.4个/30min·φ90皿(10个/m3) | 5 | 局部100级其他区域1000级 | Ⅱ | 1.5个/30min·φ90皿(50个/m3) | 5 | 10000级 | Ⅲ | 4个/30min·φ90皿(150个/m3) | 5 | 100000级 | Ⅳ | 5个/30min·φ90皿(175个/m3) | 5 | 300000级 |
注：浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降法和浮游法互相换算的结果。 Ⅱ类环境--- 洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循ＧＢ50333. 非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直径９ｃｍ平皿）。 Ⅲ、Ⅳ类环境---儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)。 四、消毒液：（2012年《医疗机构消毒技术规范》） 1.采样时间：使用中消毒液染菌量测定 2.采样方法：用无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀。醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和，含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂，醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂，含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。 3.检测方法：用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1.0mL接种平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20 mL,36℃±1℃恒温箱培养72h,计数菌落数；怀疑与医院感染爆发有关时，进行目标微生物的检测。 细菌菌落总数计算方法：消毒液染菌量（cfu/ml）=平均每皿菌落数×10×稀释倍数 4.判定标准：使用中灭菌用消毒液：无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10cfu/ml，其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml。
五、清洁用品的消毒效果监测：（2012年《医疗机构消毒技术规范》）
1.采样时间：消毒后、使用前进行采样。
2.采样方法：布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入5ml含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。
3.检测方法：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。
4.结果判定：未检出致病菌为消毒合格。
六、内镜的消毒效果监测：（2012年《内镜清洗消毒技术操作规范（2004年版）》）
1.采样时间：消毒后进行采样。
2.采样方法：取清洗消毒后内镜，用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。3.检测方法：将洗脱液充分混匀，取1ml，接种平皿2块，将冷却至40℃-45℃融化营养琼脂培养基每倾注15ml-20ml，36±1℃恒温箱培养48小时，计数菌落数（cfu/件）。
细菌菌落总数计算方法：菌落数/镜=2个平皿菌落数平均值×20。
4.结果判定：细菌总数<20cfu/件，不能检出致病菌；灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。
七、污水：（2013年《医院污水处理技术指南》）八、透析液、透析用水监测： 1. 微生物试验：应在按比例配制透析液装置的入口处或在混合罐的入口处,收集处理水的试样. 试样应在收集后30 min内进行化验,或立即放在1℃～5℃下储存，并按常规程序在收集后24 h内化验。应采用常规的微生物检验方法(倾注平板法)获得细菌总数计数(标准培养皿计数).培养基应为胰蛋白酶大豆琼脂或等价物.计算菌落数目应在35℃～37℃下培养48 h后进行.48 h后若呈阴性,可于72 h后再检查.这是标准的操作方法. 也可用另一种方法测定水生微生物,即采用膜过滤技术滤除500mL～1000mL水,并在像R2A这样的低营养琼脂培养基上,可在28℃～32℃下培养5d或更长时间. 2. 应用鲎试剂法检查内毒素,测定是否有致热原. | 
发表于 2016-10-18 09:17
发表于 2016-10-18 10:05