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[求助] 我所在实验室的结核流程,请老师们指正

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发表于 2007-8-24 11:21 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2007-8-24 14:09 | 显示全部楼层
0.5%NaOH化痰是不是浓度太低?NaOH的主要作用是消灭杂菌的作用,放4度冰箱等一起高压,是不是作用时间太长?化痰还是NALC(N乙酰L半胱氨酸)效果好。顺便问一下,BASO的染色效果好吗?我们也用过BASO感觉有假阴性。
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发表于 2007-8-24 16:34 | 显示全部楼层
您可以参考    结核病细菌学检验痰标本收集和送检的有关规定
https://bbs.sific.com.cn/viewthread.php?tid=931&extra=page%3D2

另还有文献报道:热染的效果比冷染好。
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 楼主| 发表于 2007-8-24 23:17 | 显示全部楼层
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发表于 2007-8-25 16:49 | 显示全部楼层
分析一下你实验室的操作步骤,加0.5%NaOH的目的是为了杀灭标本中的杂菌,防止细菌过度生长掩盖了标本中少量结核分枝杆菌或液化痰(但NaOH浓度太低,起不了什么作用)。放置4度冰箱也是为了抑制其他细菌生长(但有些菌在4度冰箱内仍然生长)。高压灭菌是保护实验室人员吧。离心30分钟是离心沉淀集菌法。
涂片方法有3种,直接涂片法,漂浮集菌法和离心沉淀集菌法。

你说的培训中指出集菌法可先加三倍的蒸馏水,这是漂浮集菌法。漂浮集菌法是将标本高压灭菌后加入3倍无菌蒸馏水,加二甲苯0.3ml,震荡10min后,加蒸馏水至瓶口,把玻片盖于瓶口30min,取下玻片干燥、染色。
离心沉淀集菌是将标本液化灭活后,3000g离心15-30min,取沉淀涂片。
高压后细菌已经被杀灭,不需要用NaOH化学灭菌了,但可以用4%NaOH液化均质痰液。你再想一想吧,你们实验室用哪种方法来处理标本比较合适?:)
标本处理前最好能记录标本性状,以供分析结果时参考。


[ 本帖最后由 莲雾 于 2007-8-26 09:34 编辑 ]
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发表于 2007-10-26 13:32 | 显示全部楼层
直接涂片的阳性率最低,离心沉淀集菌阳性率最高。

三种涂片法检查痰内结核分枝杆菌的比较
来源:INTERNET 作者:亓志鹏 孙延丽 戚亚琳 打印本文 收藏到我摘 收藏到新浪

摘要:痰结核分枝杆菌阳性是诊断肺结核病的金标准,为探讨一种操作简单、阳性检出率高的痰涂片结核分枝杆菌检查方法,我们就78例本所临床确诊的肺结核病人的痰液分别用直接涂片法、漂浮集菌涂片法和快速浓集法进行了对比分析。1 一般资料 本所临床确诊的78例肺结核病人,男49例,女29例,年龄13~65岁。2 方法 直接涂片法和漂浮......

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痰结核分枝杆菌阳性是诊断肺结核病的金标准,为探讨操作简单、阳性检出率高的痰涂片结核分枝杆菌检查方法,我们就78例本所临床确诊的肺结核病人的痰液分别用直接涂片法、漂浮集菌涂片法和快速浓集法进行了对比分析。


1 资料与方法


1.1 一般资料 本所临床确诊的78例肺结核病人,男49例,女29例,年龄13~65岁。取病人深咳痰约10ml于一次性痰盒内,送检。


1.2 方法 直接涂片法和漂浮集菌涂片法按《结核病诊断细菌学检验规格》 [1] 要求操作。快速浓集法 [2] ;将5ml痰液等量加入84消毒液,消化5~10min(不断混匀),倒入试管内加蒸馏水至10ml混匀,3000r/min离心10min,取出倒去上清液,留取约0.2ml沉渣混匀,涂片。三种方法均采用萋一尼(Ziehl-Neelsen)染色。


1.3 结果判定标准 油镜下观察3种涂片,按《结核病诊断细菌学检验规格》规定的标准判断结果。300油镜视野内见不到结核分枝杆菌时为(-),见到1~2条结核分枝杆菌时为(±),100个油镜视野内见到3~9条为(+),10个油镜视野内见到1~9条时为(),每个油镜视野内见到1~9条时为(),每个油镜视野内见到9条以上时为()。


2 结果


三种不同的涂片方法检测78份肺结核的痰标本结果见表1。快速浓集法涂片的阳性率明显高于直接涂片法和漂浮集菌涂片法。
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