求助压力蒸汽灭菌的生物学检测怎样做？

钱晓芳

压力蒸汽灭菌的生物学检测怎样做？

303943295

可与厂家联系，针对灭菌器的型号和特点，配备随锅的类似指示卡之类的东西，送微生物室培养。也可用3M的快速机器进行监测。

mdj秋水伊人

生物指示剂放在锅里最难消毒的地方进行高压灭菌，灭菌后及时送微生物室56度培养箱进行培养，48小时进行判定

钱晓芳

mdj秋水伊人 发表于 2015-10-20 16:06
生物指示剂放在锅里最难消毒的地方进行高压灭菌，灭菌后及时送微生物室56度培养箱进行培养，48小时进行判定

这个生物指示剂是不是那个叫什么枯草杆菌的什么的那个？

mdj秋水伊人

我院的生物指示剂为美国3M公司生产的压力蒸汽灭菌生物培养指示剂（嗜热脂肪杆菌芽孢片）

黎卫士

ws310、3-2009医院消毒供应中心第3部分:清洗消毒及灭菌效果监测标准
4．4．2  压力蒸汽灭菌的监测
4．4．2．3  生物监测法
4．4．2．5  灭菌器新安装、移位和大修后的监测   应进行物理监测、化学监测和生物监测。物理监测、化学监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用，监测方法应符合GB 18278 的有关要求。对于小型压力蒸汽灭菌器，生物监测应满载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用。预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器应进行B-D测试并重复三次，连续监测合格后，灭菌器方可使用。
附录A
（规范性附录）
压力蒸汽灭菌的生物监测方法
    A．1按照《消毒技术规范》的规定，将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片制成标准生物测试包或生物PCD，或使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测。标准生物监测包置于灭菌器排气口的上方或生产厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。如果一天内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。
    A．2具体监测方法为：将生物指示物置于标准试验懈的中心部位。标准试验包由16条41cm×66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23 cm×23 cm×15 cm大小的测试包。经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果。
    A．3结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。

xuezhongyue8

赞同黎卫士老师提高的方法

热带雨林2010

建议学习一下CSSD第三部分，对消毒灭菌监测效果说的很清楚，压力蒸汽灭菌生物监测用嗜热脂肪杆菌芽孢菌片。

じ☆ve↘琦

ws310、3-2009医院消毒供应中心第3部分:清洗消毒及灭菌效果监测标准
4．4．2  压力蒸汽灭菌的监测
4．4．2．3  生物监测法
4．4．2．5  灭菌器新安装、移位和大修后的监测   应进行物理监测、化学监测和生物监测。物理监测、化学监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用，监测方法应符合GB 18278 的有关要求。对于小型压力蒸汽灭菌器，生物监测应满载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用。预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器应进行B-D测试并重复三次，连续监测合格后，灭菌器方可使用。
附录A
（规范性附录）
压力蒸汽灭菌的生物监测方法
    A．1按照《消毒技术规范》的规定，将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片制成标准生物测试包或生物PCD，或使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测。标准生物监测包置于灭菌器排气口的上方或生产厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。如果一天内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。
    A．2具体监测方法为：将生物指示物置于标准试验懈的中心部位。标准试验包由16条41cm×66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23 cm×23 cm×15 cm大小的测试包。经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果。
    A．3结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。

再接再厉

热带雨林2010 发表于 2015-10-20 18:22
建议学习一下CSSD第三部分，对消毒灭菌监测效果说的很清楚，压力蒸汽灭菌生物监测用嗜热脂肪杆菌芽孢菌片。

嗜热脂肪杆菌芽孢菌片是从商家买的吗？

欧阳贝克汉姆

赞同黎卫士老师提高的方法

相识有缘

sxsyzyf 发表于 2015-10-21 08:27
嗜热脂肪杆菌芽孢菌片是从商家买的吗？

让单位购置自含式生物指示物，很方便使用。

相识有缘

医疗机构消毒技术规范WS/T  367—2012
A.2 灭菌效果的监测   A.2.1 压力蒸汽灭菌效果的监测
标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢，含式生物批示物按产品说明，观察培养结果；
A.2.2  干热灭菌的效果监测
标准指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢，
注意事项1）
监测所用菌片或自含式菌管应取得卫生部消毒产品卫生许可证批件，并在有效期内使用；
2）如果1d内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。

相识有缘

医疗机构消毒技术规范WS/T  367—2012
A.2.1.2 标准生物测试包的制作方法如下
a）标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢，菌片含菌及抗力符合国家有关标准；
b）标准测试包的制作：由16条41cm×66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23cm×23cm×15cm的测试包；
c）标准生物测试包或生物PCD的制作方法：将至少一个标准指示菌片装入灭菌小纸袋内或至少一个自含式生物指示剂，置于标准试验包的中心部位即完成标准生物测试包或生物PCD的制作；
d）培养方法：经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示灭片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物批示物按产品说明），观察培养结果；
e）结果判定 阳性对照组培养阳性，阴性对照驵培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格，同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。自含式生物批示物不需要做阴性对照。
f）小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌包制作生物测试包或生物PCD，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放；
g）采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将一支生物批示物，置于空载的灭菌器内，经一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观察结果；
h）可使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测；
i）注意事项
1）监测所用菌片或自含式菌管应取得卫生部消毒产品卫生许可证批件，并在有效期内使用；
2）如果1d内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。
A.2.2.1 干热灭菌效果的物理监测法、化学监测法和生物测监测法，应遵循WS310.3的要求。
A.2.2.2 标准生物测试管的制作方法如下：
a）标准指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢，菌片含菌及抗力符合国家有关标准；
b）标准生物测试管的制作方法：将标准指示菌片分别装入灭菌中试管内（1片/管）；
c）监测方法：将标准生物测试管，置于灭菌器最难灭菌的部位，即灭菌器与每层门把手对角线内、外角处放置2个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至80℃时，加盖试管帽后取出试管，并设阳性对照对和阴性对照；
d）培养方法：在无菌条件下，加入普通营养肉汤培养基（5mL/管），36℃±1℃培养48h，观察初步结果，无菌生长管继续培养至第7d；
e）结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，若每个指示菌片接种的肉汤均澄清，判为灭菌合格，若阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，而指示菌片之一接种的肉汤管混浊，判为不合格，对难以判定的肉汤管，取0.1mL接种于营养琼脂平板,用灭菌L棒或接种环涂匀,置于36℃±1℃培养48h,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否指示菌生长,若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长,判为灭菌合格；
f)注意事项:监测所用菌片应取得卫生部消毒产品卫生许可批件,并在有效期内使用

锦医卫~

黎卫士 发表于 2015-10-20 16:17
ws310、3-2009医院消毒供应中心第3部分:清洗消毒及灭菌效果监测标准
4．4．2  压力蒸汽灭菌的监测
4．4． ...

已经很全面了，不过还有一些末节的东西

有缘

压力蒸汽灭菌效果的监测
标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢
标准测试包的制作：由16条41cm×66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23cm×23cm×15cm的测试包；
标准生物测试包或生物PCD的制作方法：将至少一个自含式生物指示剂置于标准试验包的中心部位；
培养方法：经一个灭菌周期后，经56℃±1℃培养7d（自含式生物批示物按产品说明），观察培养结果；
结果判定：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。自含式生物批示物不需要做阴性对照；
监测频度：每周监测一次
小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌包制作生物测试包，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包应侧放，体积大时可平放；
采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将一支生物指示物，置于空载的灭菌器内，经一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观察结果；
可使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测；
注意事项：如果1d内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。
灭菌器新安装、移位和大修后的监测  应进行物理监测、化学监测和生物监测。物理监测、化学监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用。

。

热带雨林2010

sxsyzyf 发表于 2015-10-21 08:27
嗜热脂肪杆菌芽孢菌片是从商家买的吗？

我们现在用的是快速监测的自含式菌片，是由监测仪厂家供货的，过去用的芽孢菌片是由综合库负责采购。

再接再厉

热带雨林2010 发表于 2015-10-21 22:24
我们现在用的是快速监测的自含式菌片，是由监测仪厂家供货的，过去用的芽孢菌片是由综合库负责采购。

老师，您好！您是说首先要买检测仪，然后用自含式菌片检测吗？自含式菌片，是由监测仪厂家供货的，是这样吗？

热带雨林2010

sxsyzyf 发表于 2015-10-22 09:42
老师，您好！您是说首先要买检测仪，然后用自含式菌片检测吗？自含式菌片，是由监测仪厂家供货的，是这样 ...

是的，因为检测仪是有要求的（厂家这样说的），还是按要求使用否则出了问题人家不负责。