一对分子信标引物设计用来扩增一段约100bp的PCR产物,这段产物的中部包含一个单核苷酸多态性(SNP)位点。两个分子信标除了同SNP位点互补的碱基和标记的荧光分子外,完全相同。绿色和红色分别代表荧光素和hex标记。游离状态的分子信标的信号被3'-dabcyl基团猝灭而不发出荧光。当同互补序列杂交时,分子信标发出荧光。样品DNA被分配到384孔PCR板中,经PCR反应后,向每个孔中加入分子信标以确定等位基因状态。数字PCR和基于分子信标的等位基因鉴别也可整合到一步反应进行。
参考文献:
Pohl G, Shih le-M. (2004) Principle and applications of digital PCR. Expert Rev Mol Diagn 4(1):41-47
Vogelstein B, Kinzler K W. (1999) Digital PCR. Proc Natl Acad Sci USA 96:9236-9241
李亮, 隋志伟, 王晶, 臧超, 余笑波 (2012) 基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展. 生物化学与生物物理进展 39(10):1017-1023
相关链接:
http://www.biomart.cn/experiment/430/457/464/34105.htm
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