1.标本质量控制
脑脊液:尽量赶在抗生素经验应用前采集标本,采用穿刺包内无菌瓶盛标本,由医护人员(住院病人)或病人家属(门诊病人)当面递送给专业微生物检验人员,经过询问是在30min内,保温保湿条件下运送的方为合格标本,否则应拒收。
2.标本预处理
标本和培养基必须同时置35℃环境内预温.
3.标本接种
对于肉眼观测脓性标本:可采用先用带盖无菌试管离心后取沉渣直接接种已预温的血琼脂,巧克力培养基,麦康凯培养基后,剩余标本再转入血培养基中增菌的方法(该方法对操作要求较高,否则易出现污染);
一般肉眼观测非脓性标本:无菌操作注入血培养瓶内,再加入无菌采集的兔血5ml增菌后转种已预温的血琼脂,巧克力培养基,麦康凯培养基、厌氧菌BAP等固体培养基。怀疑为肺炎支原体感染的加种Hayflick双相培养基或采用免疫学及分子生物学方法检测。
4.离心沉渣直接涂片
在接种后对剩余的标本采用4000~5000r/min的速度离心10min,取沉渣涂片作革兰染色和抗酸染色,怀疑螺旋体的作银染色,怀疑肺炎支原体的作姬姆萨染色.
以上方法是我室脑脊液微生物检验的SOP的一部分,只要是病毒以外的感染都能最大程度地被检出. |