自含式生物指示物不需要做阴性对照！

回忆

  卫生部2012年4月发布的《医疗机构消毒技术规范》中，“附  录  A（规范性附录）      清洁、消毒与灭菌的效果监测   A.2.1 压力蒸汽灭菌效果的监测   A.2.1.2 标准生物测试包的制作方法如下   e）结果判定 阳性对照组培养阳性，……自含式生物指示物不需要做阴性对照；”
    这几年我们在应用自含式生物指示物进行高压灭菌器的生物监测时，一直是同时用两支：锅内一支，锅外常温下一支进行对照监测（依据是什么也说不清了），有了卫生部的新规范，是不是我们就可以只在锅内布生物工程指示物以监测灭菌器的灭菌效果？   想从各位老师这里再确认一下， 我们的理解是否正确？

石磊--wxmsl

生物指示剂厂家来说销量会减半

往事随风

自含式生物指示剂仍然需要做阳性对照的，您原来同时用两支的方法是对的呀，一支经过灭菌过程，一支直接培养，用以判断该批号的生物指示剂是否合格；阴性对照指的是使用生物指示菌片时，必须要同时做阳性和阴性对照

回忆

往事随风 发表于 2012-5-13 19:58 static/image/common/back.gif
自含式生物指示剂仍然需要做阳性对照的，您原来同时用两支的方法是对的呀，一支经过灭菌过程，一支直接培养 ...

A.2.1.2 标准生物测试包的制作方法如下
a）标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢，菌片含菌及抗力符合国家有关标准；
b）标准测试包的制作：由16条41cm×66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23cm×23cm×15cm的测试包；
c）标准生物测试包或生物PCD的制作方法：将至少一个标准指示菌片装入灭菌小纸袋内或至少一个自含式生物指示剂，置于标准试验包的中心部位即完成标准生物测试包或生物PCD的制作；
d）培养方法：经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示灭片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物指示物按产品说明），观察培养结果；
e）结果判定 阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格，同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。自含式生物指示物不需要做阴性对照；

老师您好，上述是原文，其中红色部分我真有些搞不明白了，“ 阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，”这又是怎样的具体操作，还请您指点，谢谢！

cm1968

我是这么理解的：阴性对照的目的是看溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水是不是无菌的，阳性对照的目的是看菌片是不是符合要求，自含式生物指示物管子里的培养液肯定是符合要求的，所以不需做阴性对照.各位老师,我的理解正确吗?

往事随风

一名难求 发表于 2012-5-13 21:09 static/image/common/back.gif
A.2.1.2 标准生物测试包的制作方法如下
a）标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢，菌片含菌及抗力符合国家有 ...

红色字体部分是告诉您该怎么判断您的生物指示剂培养结果的呀；如果是菌片的，那么就要同时做阳性和阴性对照，用来判断其原始的菌片或者培养液是否合格；如果是自含式菌管的，那就只需要阳性对照的，cm1968老师也简单说明了下其作用

回忆

楼上两位老师所言，我好象明白了：
应用菌片监测时，要对其制备的“溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水（培养基）”是不是无菌进行“阴性对照”、同时还要保证菌片是“活菌”，而要进行”阳性对照“；   而自含式生物指示物管子里的培养液”肯定“是符合要求（无菌的），无需阴性对照，而只需证实管内菌是”活“的------要进行阳性对照。二位老师我的理解对了吗？

不过我又有了问题：根据什么“肯定“自含式生物指示物管子里的培养液”肯定“是符合要求（无菌）的？不知我的问题是不是怪了些，知道的太少，请老师辩解。

我自己再来解一解：在使用”自含式生物指示物“前，检查管内液颜色正常，说明制作和储存过程中没有染菌（有菌生长时其外观颜色应当出现异常）。这样理解对吗？

炉师傅

一名难求 发表于 2012-5-14 14:33 static/image/common/back.gif
楼上两位老师所言，我好象明白了：
应用菌片监测时，要对其制备的“溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水（培养基）”是 ...

自含式生物指示物管子里的培养液，是储存在一根密闭的玻璃管内的，已经过灭菌处理；
监测时挤碎玻璃管，如有菌存活，营养液润湿菌株，菌株才能生长和被监测到；
使用时玻璃管液体和菌株一起在灭菌器中灭菌一次，虽然是密闭的，但几毫升的液体完全可以达到灭菌；
所以只要玻璃管不破损，营养液被污染的概率几乎是零，所以不需要阴性对照检验；

回忆

炉师傅 发表于 2012-5-14 22:08 static/image/common/back.gif
自含式生物指示物管子里的培养液，是储存在一根密闭的玻璃管内的，已经过灭菌处理；
监测时挤碎玻璃管， ...

谢谢炉师傅老师及各位老师的指点，我知道该怎样做、为什么这样做了，谢谢了！

hxq6668

阴性对照：指非自含式生物指示物，即用菌片作为生物指示物，将菌片经一个灭菌周期后投放于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水（培养基）中，然后送培养。但是在使用前必须对溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水（培养基）进行无菌试验，证明无菌生长才可用于生物指示物的培养基。

sunfengxia

路过学习，受益匪浅