关于检验方法

玛玛林

酶免法和金标法的区别是什么？择期手术感免项目必须用酶免法吗？

ynosmile

酶免法基本原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:

①固相的抗原或抗体

②酶标记的抗原或抗体

③酶作用的底物(显色剂)。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

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酶免法检测步骤
ELISA用血清来检测，首先血液要经过至少半个小时的凝集，然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后，加血清及阴性、阳性对照，还有就是质控品(这是严格的要求，它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育，然后洗板，加底物，半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分，然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。

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金标法是国际上较为先进的灵敏，特异，快速，简便，准确率高的艾滋病体外诊断方法。测定结果仅凭特制的检验盒在短时间内内即可获得。金标法试纸，抽血后滴在试纸上，用20分钟的时间观察该试纸有无颜色变化。如果有颜色变化，则初检阳性。

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金标法，又称免疫金标记技术。

氯金酸在还原剂的作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称为胶体金。免疫金标技术类似于酶免疫技术，它是用胶体金标记单克隆抗体，作为某些激素如LH的定性或半定量测量。 金标法又分为:层析法和斑点渗透法。

层析法一般采用双抗原夹心法免疫测定原理，选择经纯化的基因工程制备的抗原，分别作为包被抗原和胶体金结合抗原。当待检标本中含有HIV抗体时，先和金标记抗原结合，由于层析作用反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动，当遇到包被抗原时，形成Ag-Ab-Ag-Au复合物富集在包被线上，形成红色沉淀线。在包被膜上还有一条质控线对照，故当有两条红线时判为阳性，只有一条红线时，判为阴性。

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目前常用的艾滋病检测方法，是快速法和酶标法，快速法一

般用的都是金标法检测，酶标也就是我们常说的酶免法检

测。

术前我们采用酶免法。

awx120

路过学习了，谢谢分享！！！！！！！！！

芳芳123

路过学习，谢谢老师！                              

小白天使

酶免法：1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。
ELISA现在已成为目前分析化学领域中的前沿课题 ，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。

金标法又称免疫金标记技术
　　氯金酸在还原剂的作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称为胶体金。免疫金标技术类似于酶免疫技术，它是用胶体金标记单克隆抗体，作为某些激素如LH的定性或半定量测量。

lyluoxiuhua

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