水是万物之源，万物皆复归于水 在医疗机构中，几乎所有的医疗活动都离不开水。预防与控制水源性病原微生物的传播，是医院感染管理的重要任务之一。上一期倪教授为大家介绍了医院内水源性感染发生的重要环节和常规微生物检测方法与参考指标，本期专栏精彩继续，让我们一起来学习常规微生物采样和检验的注意事项。 一、常规微生物采样注意事项： 1、应制定全院年度医疗用水微生物采样计划与安排。制定医疗用水采样、送检、保存等相关的标准化操作程序（SOP）。 2、准备采样用无菌瓶（推荐使用蓝口瓶，见图1）、无菌注射器等采样器具。
图1. 医疗用水采样用蓝口瓶 3、样品登记表，内容包括采样日期、编码、科室、地点、水样类别、剂量、采样人等相关的信息。 4、采取管道的水样，采样者应做好个人防护（口罩、帽子等），做好手卫生，对出水口（水龙头）进行消毒（如口腔科手机水的采样，应更换一只新的手机），放水时间不少于1min，拧开蓝口瓶收集水样（见图2）；桶装水取样时，可采用无菌注射器，以无菌操作的方式抽取水样，注入无菌蓝口瓶。采集水样的剂量应略大于实验所要的量。水样采集推荐两人配合实施，注意二次污染。
图2. 手机水采样 5、送检时间不得超过4h，若样品一时无法检测时，应保存在0℃～4℃环境中，但送检时间不得超过24h。 二、常规微生物检验注意事项 1、在洁净实验室或生物安全柜内，以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入无菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每个送检的水样应同时倾注2块平皿，即平行平皿的接种。整批水样检测时，应另用一块无菌平皿，仅倾注培养基，不接种样品，作为空白对照。 2、待平皿冷却后，翻转平皿底面朝上，置36℃±1℃、培养48h后进行菌落计数。2块平皿应分别计数，相加后除以2，即为该水样1mL中的菌落总数。若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用。应以无片状菌落的平皿作为该水样（该稀释度）的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的50%面积，其余的菌落发布均匀，则可将平皿一分为二，计数均匀分布的菌落的一侧，计数后乘以2，以代表该平皿上的菌落总数。 3、首先选择平均菌落数在30～300之间的平皿计数。计数两块平皿菌落数的平均数，在将平均数乘以相应稀释倍数，作为每毫升中的菌落总数。如果平皿菌落密布时，最好不用“无法计数”作为结果报告。可任意计数其中2块平皿的1cm2中菌落数，除以2求出每平方厘米内平均菌落数，乘以平皿底部面积63.6 cm2（以9cm直径的玻璃平皿为例），即为该水样1mL中的菌落总数。 4、菌落计数的报告，菌落数在100以内时，按实有数报告，大于100时，采用两位有效数，在两位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计数，为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。如果2块平皿均未见细菌生长，不得报告“0cfu”。若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
三、报告举例说明
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