医疗机构环境表面微生物学监测之一 基本概述(2) 医疗机构环境表面微生物学监测是院感防控工作的重要内容,是监督临床清洁消毒工作和防止院感暴发的主要手段。如果没有微生物作为支撑,我们的感控人员就如同盲人,看不见我们的对手(微生物)在何处。 涉及医疗机构环境表面微生物学检测主要包括三个环节,采集、培养分离和鉴定。这三个环节缺一不可,尤其是采集环节,一旦失败就没有后续了。上一期倪教授为大家重点介绍了标本采集的工具和方法,本期咱们来看看同样重要的标本培养分离和鉴定。 培养与分离 采集到的标本有以下几种方法进行接种培养: ①现场直接接种培养 ②对含有棉签头的采样试管,送实验室进行震荡,吸取1mL倾注培养 ③对含有棉签头的采样试管经震荡后吸取一定量的采样液,采用L棒涂布法培养 培养基的选择应根据调查目的而定,可以选择普通营养琼脂,也可以是选择性培养基。通常肠杆菌推荐麦康凯培养基,葡萄球菌和链球菌推荐血平皿。也可以根据研究目的,选择针对某种单一目标细菌的显色培养基。 培养环境也是重要因素之一,诸如温度、湿度和培养时间。对于艰难梭菌这样的特殊细菌还要关注培养的厌氧环境,由于该菌系苛性厌氧特点,故还需要对培养环境采用化学和生物监测技术进行监控,以保证芽胞出芽进行有效增殖。 鉴 定 常用的微生物鉴定技术包括 ①菌落形态、颜色、气味等鉴别 ②革兰染色,光学显微镜下观察 ③传统生化试验 ④全自动鉴定仪鉴定 ⑤PCR核酸检测等 质量控制 1.培养基的质控 按照食品安全国家标准GB 4789.28-2013《食品微生物学检验—培养基和试剂的质量要求》,接种相应的标准菌株(如ATCC株)后,与现场采集的样品一起培养,观察是否能生长出典型的菌落。该质控也可视为阳性质控。 2.采样工具的质控 采样结束后,如是采用棉签采样,将未使用过的棉签头丢入未使用后的中和剂(或生理盐水)中,送实验室震荡后吸取1mL倾注培养。如采样RODAC平皿采样,将RODAC平皿瞬间打开(避免与任何表面接触)后合上,与现场采集的样品一起培养。上述采样工具的质量也可视为阴性质控,故不应有任何菌落的出现。 至此,医疗机构环境表面微生物学监测之基本概述的三个环节都介绍完啦! |