莲雾 发表于 2008-3-13 13:52

如何防止菌膜在染色过程中脱落？

MGIT960报阳后，通常取液体培养基底部液体做抗酸染色。现在发现涂片上的菌膜在染色过程中非常容易脱落，无论如何小心冲洗染液，玻片经过火焰固定，还是大片脱落。固定的方法包括加热固定和化学固定，化学固定采用甲醇固定，请教甲醇固定的最佳浓度和固定时间？还有其他更有效的方法吗？:'(

寶島 发表于 2008-3-13 15:07

回复 #1 莲雾 的帖子

玻片必須乾淨, 最好95%酒精浸泡後, 塗片不可過厚, 以自然涼乾後在以65-75度烘焙15分鐘, 染色時沖

洗水力道愈小愈好.

巴斯德之徒 发表于 2008-3-13 19:08

回复 #1 莲雾 的帖子

采用丙酮酒精固定2~5min后将残留固定液点燃,待火焰熄灭后,在穿插酒精灯火焰固定,待涂片冷后染色就不会掉了.
但要注意安全,不要把手烧着了.

否则我们都会心疼的哦!:lol :lol

茉莉花 发表于 2008-3-17 22:47

原帖由 莲雾 于 2008-3-13 13:52 发表 http://bbs.sific.com.cn/images/common/back.gif
MGIT960报阳后，通常取液体培养基底部液体做抗酸染色。现在发现涂片上的菌膜在染色过程中非常容易脱落，无论如何小心冲洗染液，玻片经过火焰固定，还是大片脱落。固定的方法包括加热固定和化学固定，化学固定采 ...

呵呵，我也遇到了这种情况，大概是细菌本身就不易被固定吧！

莲雾 发表于 2008-3-19 13:09

谢谢解答！:)

莲雾 发表于 2008-4-26 15:22

实践证明，巴版的方法用起来效果不错。另外，冷染与热染相比，冷染法菌膜不易脱落。:)

茉莉花 发表于 2008-4-26 20:56

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采用丙酮酒精固定2~5min后将残留固定液点燃,待火焰熄灭后,在穿插酒精灯火焰固定,待涂片冷后染色就不会掉了.
但要注意安全,不要把手烧着了.



也就是涂片后先用丙酮酒精固定2~5min，然后再做抗酸染色？用“丙酮酒精”固定对后面的染色过程有影响吗？

莲雾 发表于 2008-4-28 19:09

回复 #7 茉莉花 的帖子

我用70%酒精作固定，对染色没有影响。

莲雾 发表于 2008-7-18 14:13

回复 #4 茉莉花 的帖子

目前，采用的方法是：涂片自然干燥后过火3次，紫外灯照射2小时后染色，效果不错。:)
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