我们这一家 发表于 2024-2-23 08:38

ATP 生物荧光测定或蛋白残留检测内镜清洗效果如何进行

请教各位大神:ATP 生物荧光测定或蛋白残留检测内镜清洗效果如何进行?如果有操作视频的老师能否分享?

格日乐图 发表于 2024-2-23 08:49

本帖最后由 格日乐图 于 2024-2-23 09:20 编辑

ATP 生物荧光法是基于荧光素在荧光素酶的参与下与生物细胞代谢产物三磷酸腺苷( ATP) 反应生成荧光素氧化产物发出荧光的原理,荧光强度与 ATP 的量成正比,依此进行相对定量检测。


采样方法:
①采样时机: 分别选择负压吸引下除去消化内镜管道内残留物( 清洗前) ,水洗→酶洗→再清洗( 清洗后) 和使用现制的酸性氧化电位水灌流冲洗 3 ~ 5 min→冲洗→干燥( 消毒后) 等 3 个时间点。
②采样部位: 按 《内镜清洗消毒技术操作规范》规定执行,选择消化内镜的管腔进行采样,即内镜活检通道。
③采样方法〔1〕: 采用无菌注射器抽取50 ml 采样液,从活检口注入,冲洗内镜管路并在下端收集采样液。初始和清洗后两个点的采样液为稀释液( 0. 03 mol /L 磷酸盐缓冲液) ,消毒后的采样液为中和剂( 1 000 mg /L 硫代硫酸钠 + 1 000 mg /L 吐温 -80 的 0. 03 mol /L 磷酸盐缓冲液) 。



现场检测:
采用 ATP 生物荧光法,分别取 3个时间点采集的样液或洗脱液 50 μl,加入裂解液50 μl,震荡混合。待作用 30 s 后加入荧光素酶液400 μl,上仪器进行测定并读值( RLU) 。最后加入标准品溶液 10 μl,再一次仪器进行测定并读 RLU值。结果以检测 RLU 值≤2 000 /条,为清洗消毒效果合格。

我们这一家 发表于 2024-3-7 08:14

格日乐图 发表于 2024-2-23 08:49
ATP 生物荧光法是基于荧光素在荧光素酶的参与下与生物细胞代谢产物三磷酸腺苷( ATP) 反应生成荧光素氧化产 ...

谢谢老师指导
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