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[资料] ATP检测面面观

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发表于 2019-9-9 10:08 | 显示全部楼层 |阅读模式

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ATP检测面面观       

        ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理,利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少,用于判断卫生状况。
清洗是灭菌合格的前提。清洗和灭菌都能够降低复用器械表面的生物负荷,不过两者的作用过程不同。清洗是通过去除的方法,将污染物和微生物等从表面移除;而灭菌则是通过物理或化学方法,将微生物杀灭在表面。两者相结合能够起到最佳的效果。频繁的感染暴发事件说明,如果清洗质量不过关,会严重影响灭菌的质量。
WS 310.3-2016中对于清洗效果评价做出了新要求:4.2.1.3 清洗效果评价   
可定期采用定量检测的方法,对诊疗器械、器具和物品的清洗效果进行评价。
在清洗效果的评价手段中,ATP荧光监测法是最近几年备受关注的方法。因其结果读取时间短,结果可量化,采样简单方便等特点,受到了越来越多人的重视,但是在应用中也产生了一些疑问。
为什么选择监测ATP值?
目前在消毒供应中心,清洗质量监测主要仍依靠目测的方法。但是,残留在器械上的有机物、微生物等等单靠肉眼是看不到的。同时,一些带管腔、空隙等结构的器械也很难靠肉眼观察。因此需要测定清洗监测标志物来确认清洗效果,以弥补肉眼的不足。ATP就是清洗监测标志物的一种,类似的标志物也有很多,比如蛋白质是蛋白测定的标志物,血液则是潜血法的标志物。ATP作为一种广泛存在于细胞中的物质,监测的方法比较简单,快速,可重复性强,同时具有一定的代表性,因此用在很多场景中,以监测清洁水平。

QQ截图20190909094641.png

ATP分子长这个样子

RLU是什么?
RLU是“相对光单位”的意思,该值是一个没有单位的数值,不是国际单位,表示的是发光的强度。同一个ATP荧光监测仪所测量出的RLU越大,表明其荧光强度越高,ATP含量越多,器械的清洁程度也越差。由于不同生产厂家的ATP荧光监测仪表示的1 RLU所代表的光强度不同,因此不同的ATP监测仪读出的RLU值没有可比性。
那么如何确定测出的RLU值是否合格呢?
这就需要确定一个RLU的合格阈值。就像考试需要一个及格线一样,ATP监测也需要一个合格阈值。由于不同厂家的RLU没有可比性,所以其RLU阈值也不同,如甲的合格值是150RLU,乙的合格值是20RLU,丙的合格值是500RLU。不同的RLU值之间如何比较,要看其得出阈值的方法。比如有的是实验室确定的,缺乏临床实践;有的是通过文献研究总结的;有的是在临床实践中得到的,具有权威机构确认的;还有一些已经成为了规范或指南的推荐值。显然,越贴近实际和指南推荐其阈值越有应用价值。ATP 测定方法目前尚无标准,正在制定过程中
清洗效果监测的目的就是要验证现有的清洗流程是否安全可靠,清洗后复用器械上的污染物残留量是否下降到了可以接受的水平。科学合理的选择和应用清洗效果监测的方法,有助于消毒灭菌全流程的质量控制。
ATP法测定细菌含量 原理及方法

ATP消除剂
QQ截图20190909095404.png
ATP消去剂(又称体细胞消去剂)能够裂解非细菌的细胞,并水解非细菌产生的游离ATP,消除细菌外ATP的干扰。
采样及并消除非细菌细胞产生的ATP
QQ截图20190909095948.png
采样及静置过程中,ATP消除剂裂解非细菌的细胞,并水解细菌外的游离ATP;细菌ATP受到细胞壁的保护,免受水解。
细菌裂解
QQ截图20190909100107.png

被消除剂处理后不含游离ATP的拭子用细菌裂解液浸润;细菌裂解液在中和ATP水解酶同时,将细菌裂解,释放ATP。
ATP检测液
QQ截图20190909100250.png

ATP存在情况下,检测液中的荧光素酶将荧光素氧化,反应中的能量以光子的形式释放;使用BT-112D荧光检测仪可测定反应的相对发光值RLU,通过加入一定量的标准品可定量测定ATP的残留量;
细菌ATP的化学发光检测

QQ截图20190909100530.png

检测ATP标准品发光信号

QQ截图20190909100633.png

细菌数计算

QQ截图20190909100752.png



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发表于 2019-9-9 10:49 | 显示全部楼层
学习了,感谢川页老师的资料分享
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发表于 2019-9-9 10:57 | 显示全部楼层
感谢老师分享!学习了!
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发表于 2019-9-9 11:26 | 显示全部楼层
温故知新。谢谢老师分享!!!
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发表于 2019-9-9 11:27 | 显示全部楼层
非常的nice,不错!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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发表于 2019-9-9 14:35 来自手机 | 显示全部楼层
路过学习,谢谢分享给大家。
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发表于 2019-9-9 15:05 | 显示全部楼层
通过学习,明白了atp检测的原理,谢谢老师分享
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发表于 2019-9-9 15:14 | 显示全部楼层
路过学习了!感谢老师分享!
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发表于 2019-9-9 15:49 | 显示全部楼层
学习了!感谢老师分享!
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发表于 2019-9-9 16:52 | 显示全部楼层
感谢川页老师的资料分享!学习了,
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发表于 2019-9-10 08:08 | 显示全部楼层
这个分享真好,谢谢老师
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发表于 2019-9-10 08:33 | 显示全部楼层
学习了,谢谢老师分享!!!!!
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发表于 2019-9-10 08:36 | 显示全部楼层
学习了,谢谢老师分享!!!!!
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发表于 2019-9-10 09:14 | 显示全部楼层
老师您好本文源自哪里,微信公众号想转发
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发表于 2019-9-10 09:19 | 显示全部楼层
学习了,谢谢老师
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发表于 2019-9-10 09:47 | 显示全部楼层
感谢老师分享!学习了!
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发表于 2019-9-10 11:10 | 显示全部楼层
感谢老师分享!学习了!
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发表于 2019-9-10 13:36 | 显示全部楼层
感谢老师分享,路过学习!
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发表于 2019-9-10 14:07 | 显示全部楼层
路过学习了!感谢老师分享!谢谢!!!
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