细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:42

3.1收获:自己动手采用全自动核酸提取仪器提取细菌DNA的感受

最近一直做实验,碰到一个瓶颈问题,PCR扩增条带特异性很好,亮度不是太高,但应该也够了,但是测序结果不理想,一直在优化条件。必竟,在国内我没有自己动手进行测序过(一般都是将PCR产物送给公司,让公司进行检测)。在这边,他们一直是自己测序的,所以一直在摸索,实验很辛苦,很累,没有及时把实验的心得体会发到论坛上来,甚感抱歉,请大家见谅!

今天老板让我自己动手,采用梅里埃公司的Easy MAG全自动核酸提取仪进行细菌DNA的提取,将细菌样本准备好后,上机,过10min后加磁珠,再过50分钟后提取结束,将DNA样本收集到离心管中,实验结束。操作很快速、简单,要是做实验都这样就好了。估计实验成本很高啊,在国内是不指望了,感觉一下而已了......

晚上回来到网上检索了一下,马上把资料整理一下发上来。

细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:43

   NucliSens® easyMAG™ 平台是生物梅里埃公司第二代全自动核酸提取系统, 它利用硅胶技术(亦名BOOM® 技术由生物梅里埃公司研究小组发明)于临床标本中提取核酸。使用单一提取步骤, 能处理不同类型标本,其高纯度核酸提取物适合不同类型的核酸扩增用途。


细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:45

本帖最后由 细菌耐药 于 2012-3-2 12:46 编辑

提纯原理
A)      当孵育已裂解的样本时,全部的核酸与磁性硅胶吸附
B)      NucliSens® easyMAG™磁铁吸附磁性硅胶,通过多次的清洗,纯化核酸
C)      加热步骤能够释放硅胶上面的核酸
D)      最后步骤,磁铁分开磁性硅胶和提取物


细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:47

高度自动化
   使用NucliSens® easyMAG™平台, 核酸检测再也不用大量耗费时间和人力。手工步骤仅限于加载样品、加试剂和扔掉废弃物,因此使得实验室专家能够腾出手来进行其他的工作。产量和生产能力同时增长,使得分子诊断在每个实验室都可以很容易地开展。   


细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:49

极其易用的软件
 NucliSens® easyMAG™高度直观的触摸屏简化了样品,试剂和丢弃过程的控制,使得所有人都可以轻松使用。系统软件提供了完整的样品结果的追踪和扩展的数据存储能力,所有操作都通过触摸屏来完成 !



细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:50

鱼和熊掌可以兼得(灵活性和质量)何必择其一

现在每个实验室都可以拥有全自动化的高产量的核酸提取,最少的手工时间和很短的出报告时间(24个提取用40分钟)。使用一个通用和标准的方法就可以完成绝大部分检测,更好地节约了时间。





细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:51

值得您信赖

使用NucliSens easyMAG™,核酸提取不仅通过了欧盟体外诊断标准,而且非常安全。条形码跟踪,精心制作的加样头,特殊设计的防止污染的可丢弃设备,使得您报告结果的时候拥有充分的自信。




细菌耐药 发表于 2012-3-2 12:54

不能光说优点,我能想到的有两个问题,一是成本问题,毫无疑问,采用该设备来提取核酸,成本将会很高,有没有知情的同道,提取的cost怎么样?二是该设备现在还没有通过FDA的认可,如果想用于临床检测有些问题,此外,在中国使用的话,还需要通过SFDA的认可,不知道有没有通过?

SMAP鸡包纸 发表于 2012-3-2 13:40

这就是出国的悲哀,学的技术回国很多条件没有,用不上的说,长久不用又生疏,然后又被各种新的知识所淘汰,哎。。。。。。。

toto 发表于 2012-3-2 14:20

国内都是交给专门的技术员做,个人觉得这样也有好处,专业人作专业事,可以节约非专业人员不少时间,你感觉呢?探讨而已……

细菌耐药 发表于 2012-3-2 14:51

toto 发表于 2012-3-2 14:20 static/image/common/back.gif
国内都是交给专门的技术员做,个人觉得这样也有好处,专业人作专业事,可以节约非专业人员不少时间,你感觉 ...

是啊,我也希望直接送给公司做啊,不过UCLA这边都是自己做的,我也不方便要求送到外边做呀,只能慢慢地试条件,希望有好结果。

细菌耐药 发表于 2012-3-3 02:33

The sequencing results are also bad this time. We didn't know where is the problem, sad......

That's the real life of research, we might see more failure than success. However, though this way, we can learn more.

Keep fingding the reason for this failure......

liangliang 发表于 2012-3-12 21:43

可以直接提临床标本里的吗?
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