细菌耐药 发表于 2012-2-1 12:22

1.31收获:真菌检验不可忽视!

今天继续在UCLA上班,今天来到了真菌实验室,有两名专职人员进行真菌检验。主要的设备有两条实验台,一台超净台,两台冰箱,一台共用的荧光显微镜,最让人吃惊的是四台BD240瓶位的血培养仪!!!请注意,这四台血培养仪是专门用于真菌检验的。而细菌培养的血培养仪另外还有很多。我仔细看了一下,正在ongoing的血培养瓶为530多瓶,我院全院的细菌及真菌血培养加在一起还不到这个数字啊!

继续看看人家的真菌培养流程吧,第一我注意到的就是培养基(国内我知道的,真菌培养主要靠沙保罗培养基)。他们主要用三种培养基:一是BBL Inhibitory Mold Agar,二是BBL sabouraud BHI agar,三是HardsCHROM candioa(这个词可能有些笔误,没有google到,等核实一下)。各培养基具体的特点还有待检索和学习。

然后就是根据菌落特点初筛后进行鉴定,还有一个有趣的做法是直接将平板放到显微镜下用低倍镜观察形态,有些菌落在镜下很漂亮。

对于血培养阳性真菌,直接采用Yeast Traffic Light PNA FISH试剂盒对Candida albicans + candida parapsilosis, Candida tropicallis, Candida glabrata + Candida krusei进行鉴定。

我还拿到了真菌鉴定的流程,是纸质版,有空敲出来与大家分享!

我还是很关心标本量的问题,大概每天60~90份标本。然后又问了真菌药敏,他们没有做,直接送美国的参考实验室,离这边还蛮远的,每两周送一次标本。这种模式也是值得借鉴的,对于标本少又很重要的临床实验,全国建立几个参考实验室就OK了。

国内微生物室对于真菌还是基本都可以开展的,只是标本量与他们相比差不少,重视程度也不够。

真菌检验的经验非常重要,北京协和医院检验科徐英春主任、中科院皮肤病研究所刘伟达教授都曾说过这样的话:“国内真正有丰富经验的真菌检验专家不超过10人”。与寄生虫检验一样,不是买几台仪器就能解决的,而真正重要是,培养一流的真菌检验和寄生虫检验专家才是重要的。我所担心的,是这样的专家越来越少,再不重视,几十年之后就找不到这样的经验丰富的专家了!!!   

细菌耐药 发表于 2012-2-1 12:27

刚刚查到BBL sabouraud BHI agar培养的说明书,与大家share一下。

细菌耐药 发表于 2012-2-1 12:39

UCLA老师推荐的真菌检验专著:

Medically Important Fungi

A Guide to Identification - 5th Edition (Hardcover)

Now in its Fifth Edition, the highly acclaimed Medically Important Fungi continues to set the standard in its field. Clinical laboratories around the world depend on this for its superb illustrations of microscopic morphology that initiate step-by-step guidance along with textual descriptions, instructions on laboratory methods and on preparation and applications of useful media, and specific references for further information; all of which enable the user to approach the identification of medically important fungi with confidence. The unique organization of Medically Important Fungi compares similar organisms side by side, using photomicrographs, exquisite line drawings, and comparative tables to illustrate critical characteristics and distinctions. The book avoids technical jargon in favor of clear, straightforward explanations that enable everyone from novices to experienced lab technologists to support best medical care with accurate identification of fungi.

Product Details
Media: Hardcover Book, 485 pages
Language: English
Publisher: ASM Press
ISBN-10: 1555816606
ISBN-13: 9781555816605
Dimensions: 7.60 x 9.40 x 1.10 inches
Shipping Weight: 2.75 lbs
Categories: Microbiology Microbiology Science



蓝鱼o_0 发表于 2012-2-1 12:57

有时间关注一下UCLA的标本保存(细菌,真菌。。。)。他们应该有详细的SOP,能不能给我参考学习一下。来点图片就nice了!欢迎分享!

sebastienkitty 发表于 2012-2-1 14:07

以前在急诊工作,我们EICU和急诊病房相对来说危重患者多,我们对真菌还是比较重视的,但相对普通细菌培养送检标本来说还是少

icchina 发表于 2012-2-1 15:06

非常感谢很好的经验分享。
在中国,真菌感染,已经越来越受到临床医生的关注,但是微生物检验,依然非常落后。亟待改进。

“还有一个有趣的做法是直接将平板放到显微镜下用低倍镜观察形态,有些菌落在镜下很漂亮。”
由此想到,请您关注并介绍他们医院的实验室生物安全管理方面的内容。谢谢!

细菌耐药 发表于 2012-2-1 15:41

icchina 发表于 2012-2-1 15:06 static/image/common/back.gif
非常感谢很好的经验分享。
在中国,真菌感染,已经越来越受到临床医生的关注,但是微生物检验,依然非常落 ...

OK,明天的心得体会就讲一下生物安全的事情。

sebastienkitty 发表于 2012-2-1 15:54

记得我在肠道门诊的时候看到显微镜下的真菌菌丝也是很漂亮啊
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