天鹅城 发表于 2011-9-17 20:28

洁净病房空气采样方法（浮游法）

我科最新购置了一台空气采样仪，其采样原理为狭缝撞击法，主要用来监测洁净病房的空气洁净度。因此我整理了浮游法采样的一些相关方法和知识，和大家一起分享下。

空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法
一、采样前准备工作（至少采样前48h）
1. 提前联系检验科以备好培养皿。
2. 提前联系需采样的科室，以安排好采样的时间以及房间的准备（百级洁净房间至少已运行15分钟，其余洁净度房间至少已运行40分钟）
3. 采样仪需提前充电10小时。
4 .平皿的计算：每个房间采样至少2个点，一次采样需要2个空白对照。
5. 采样时间的估算：洁净房间每间需要采样至少2个点，百级手术区点需采样30分钟，周围区可采样10分钟（至少2分钟）。
二、采样时
需提前准备的东西：打火机，记号笔，中性笔，化验单，快速手消，胶布和托盘。
1. 采样的布点：中央区和周边区（在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间）
2. 采样的高度：采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。
3. 采样的角度：在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他级别区域检测时，采样口均向上。
4. 采样的时长：百级中央区30分钟，其余洁净房间均为10分钟（至少2分钟）。
（依据是采样量，级别不同，采样的最小时间不同，参照下表）
被测区域洁净度级别        最小采样量m3(L)
100级        0.6(600)
1000级        0.06(60)
10000级        0.03(30)
100000级        0.006(6)
300000级        0.006(6)

5. 仪器的具体操作：首先按照仪器上的说明。
6. 采样时要注意无菌操作：
操作者：带口罩、帽子，穿隔离衣，换鞋或穿鞋套；手卫生。
安装进气盖前需用酒精棉球火焰灭菌进气端盖正反两面。
7. 空白对照的设置：空白对照1：培养皿不打开；空白对照2：模拟操作过程，但培养皿打开后又立即封盖。两次对照必须均为阴性。
8.按下监测头上的JK按钮时，监测头上的红色指示灯需要闪烁。
三、采样后
1. 关闭仪器。
2.将采样好的培养皿送细菌室进行培养24h。
3.报告要求：检验科只报告平皿菌落数。
4.计算公式：菌落形成单位（CFU）/L=平皿菌落数/流量（升）*采样时间（分）
四、培养皿的准备要求
1. 配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正，保证加注培养基后平民内琼脂厚度均匀。
2. 加注的培养基量不能超过4.5ml。
3. 需提前培养24h（为证实无菌）。

五、标准
房的等级标准的指标应符合表3.0.3 2的要求。
表3.0.3 1洁净手术室的等级标准(空态或静态)
等级        手术室
名称        沉降法(浮游法)细菌最大平均浓度手术区        周边区        表面最大染菌密度
(个/cm2)        空气洁净度级别
手术区        周边区
Ⅰ        特别洁净手术室        0.2个/30min•90皿(5个/m3)        0.4个/30min•90皿(10个/m3)        5        100级        1000级
Ⅱ        标准洁净手术室        0.75个/30min•90皿(25个/m3)        1.5个/30min•90皿(50个/m3)        5        1000级        10000级
Ⅲ        一般洁净手术室        2个/30min•90皿(75个/m3)        4个/30min•90皿(150个/m3)        5        10000级        100000级
Ⅳ        准洁净
手术室        5个/30min•90皿(175个/m3)                5        300000级       
注：1.浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降法和浮游法互相换算的结果。
　　2.Ⅰ级眼科专用手术室周边区按10000级要求。

表3.0.3 2洁净辅助用房的等级标准(空态或静态)
等级        沉降法(浮游法)细菌最大平均浓度        表面最大染菌密度(个/cm2)        空气洁净度级别
Ⅰ        局部：0.2个/30min•90皿(5个/m3)
其他区域0.4个/30min•90皿(10个/m3)        5        局部100级
其他区域1000级
Ⅱ        1.5个/30min•90皿(50个/m3)        5        10000级
Ⅲ        4个/30min•90皿(150个/m3)        5        100000级
Ⅳ        5个/30min•90皿(175个/m3)        5        300000级

望星空 发表于 2011-9-18 01:31

我们还是沉降法采样，先收藏学习备用啦。谢谢。

二进制 发表于 2011-9-18 06:26

我院目前情况与2楼tangjing163老师所述同。也许空气采样仪价格不菲吧，基层医院只有羡慕的份儿。{:1_17:}

沧海一粟 发表于 2011-9-18 12:18

大多数医院采取的多是沉降法，方便操作。采样仪采样比较麻烦，成本也高。

yao 发表于 2011-9-18 12:29

学习了，谢谢各位老师~~~~~~~

lihongyu333 发表于 2011-9-18 12:41

学习了，谢谢！{:1_14:}{:1_17:}

蓝鱼o_0 发表于 2011-9-18 15:17

我们浮游菌是不采集的，就采用沉降法。
而且验收，浮游菌是选测项目。从研究角度，可以试试

凤凰飞翔 发表于 2011-9-24 10:40

谢谢“天鹅城“老师，下载学习了。

在云端 发表于 2012-3-27 15:09

想了解下浮游法和沉降法的区别

妮妮无敌 发表于 2012-6-4 14:21

请教：一、使用采样仪进行采样结果单位为CFU/L，而洁净手术室的等级标准中各等级洁净室的标准要求单位却不是CFU/L，请问您是如何换算的呢，如何来判断结果合格不合格呢？
      二、以上采样仪的使用方法依据哪里？
      感谢！

愚悦悦 发表于 2012-6-20 00:46

谢谢，辛苦了，学习过了

血色红玫 发表于 2012-6-20 01:28

已收藏，但请讨论10楼的意见，大家一起进步呦。

稻香格 发表于 2012-7-20 21:16

沉降法中0.2个/30min•90皿、0.4个/30min•90皿是如何算出来的？

当归百合 发表于 2012-9-17 13:54

特别好，认真学习。感谢老师。

春天的使者 发表于 2013-8-20 11:19

谢谢老师的分享，已学习了。但只有羡慕的份。

0826009 发表于 2013-8-22 15:57

学习了，现在我们是沉降法。以后参考

相识有缘 发表于 2013-8-22 16:45

稻香格 发表于 2012-7-20 21:16 static/image/common/back.gif
沉降法中0.2个/30min•90皿、0.4个/30min•90皿是如何算出来的？

1.沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿•暴露时间）

平均每皿的菌落数，如Ⅰ级 洁净手术室手术区和洁净辅助用房局部100级区5点(5个皿)、Ⅰ级周边区8点(8个皿)，每个皿的菌落数可能不一样，计算平均数就出来了呀。
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