[讨论]怎样才能提高菌痢大便培养阳性率?
<p>国内各地医院，大便培养志贺氏菌的阳性率相差很远，低者仅及10%或0，高者可达80%。怎样才能提高大便培养的阳性率呢?主要作好下列几点。</p><p> (1)留取标本至接种的时间：此时间越短，阳性率越高，如超过4小时才接种到培养基者，阳性率明显下降。</p><p> (2)治疗：力争在服抗菌药物前留取标本，经有效抗菌药物治疗者，平均2日内大便中细菌消失。</p><p> (3)大便性状：大便中脓血部分阳性率最高，粘液部分次之，无渗出物的部分阳性率最低。</p><p> (4)病程：越早阳性率越高，病程3天以内的总阳性率可达80%，到第10天，降至15%左右。</p><p> (5)培养次数：大便培养的累计阳性率与培养次数成正比。 </p><p> (6)污染程度：防止尿液及其它化学物质污染标本。污染严重者阳性率越低。<br/> <br/></p> <p>“国内各地医院，大便培养志贺氏菌的阳性率相差很远，低者仅及10%或0，高者可达80%”。</p><p>我认为排除各地区卫生条件不平衡因素，我觉得80%的检出率太高了，是否会有误检的可能，因为大肠与志贺有交叉凝集，会不会把大肠当作志贺报了呢？</p><p>一点意见不够成熟</p> 本人认为志贺氏菌感染的腹泻本来就有一定的地域性，有检出率的差别是理所当然的，但是80%的阳性率，除了可能有<strong><font face="Verdana" color="#da2549">xiangboshu版主所说的情况外，就是临床医生判断太准了！哈哈</font></strong> <div class="quote"><b>以下是引用<i>ehbhjcqjq</i>在2007-5-2 21:29:07的发言：</b><br/><p> (1)留取标本至接种的时间：此时间越短，阳性率越高，如超过4小时才接种到培养基者，阳性率明显下降。</p><p> (2)治疗：力争在服抗菌药物前留取标本，经有效抗菌药物治疗者，平均2日内大便中细菌消失。</p><p> (3)大便性状：大便中脓血部分阳性率最高，粘液部分次之，无渗出物的部分阳性率最低。</p><p> (4)病程：越早阳性率越高，病程3天以内的总阳性率可达80%，到第10天，降至15%左右。</p><p> (5)培养次数：大便培养的累计阳性率与培养次数成正比。 </p><p> (6)污染程度：防止尿液及其它化学物质污染标本。污染严重者阳性率越低。<br/> <br/></p></div><p>做到这几点也可以提高其他肠道致病菌的阳性培养率.</p><p>当然对于如何从培养环节来提高阳性率也是很重要的.希望大家热烈讨论.</p> 就如ehbhjcqjq所说,首先要确认是感染性腹泻,其次才是采用什么方法提高阳性率的问题.对于国内的普遍情况而言,如能做到象港台,国外的医院那样,保证在抗生素使用前采集标本固然是好,可如果已经采用过抗生素作经验性治疗了,又当如何做呢?
对此我曾经做过大量的对比工作,即将粪便常规初步判断为感染性腹泻的粪便标本直接接种固体培养基(如SS,SMC,TCBC等)与先采用增菌液(补充0.5%酵母粉的TTC增菌液,或GN增菌液,或补充3%Na2S2O3的营养肉汤)增菌后转种固体培养基作对比实验,发现增菌后的阳性率明显比不增菌的要高得多(阳性率居然高8~10倍).这种情况尤其是在采用抗生素治疗后表现得尤为明显.
可见增菌这一步骤对于应用过抗生素的病人的粪便培养是必不可少的啊.
巴斯德之徒
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增菌液
请问巴斯德之徒版主：增菌时间是多少？ 18~24h 不同意见：细菌性痢疾粪便培养中为什么选择GN增菌液增菌？
因为志贺菌属致病力强，少量细菌（10－100个）（细菌性腹泻实验诊断规范P12）进入人体即可引起感染，所以当患者标本量少或症状不明显或怀疑为携带者时，应选择GN增菌液增菌，这种培养基在保证志贺菌生长所需要氮源、碳源及缓冲基础上，加入革兰阳性菌生长抑制剂脱氧胆酸钠和枸橼酸钠以选择性地扩增志贺菌。
需要注意的是：在GN增菌液中增菌时，其他革兰阴性菌也可生长，若过度生长产酸可使志贺菌属的细菌在数小时内死亡，所以增菌4～6h后应立刻转种至选择性琼脂培养基上。
个人观点，如有错误，请指正！
[ 本帖最后由 mrscon 于 2007-5-31 00:14 编辑 ] 临床的情况永远都是变幻莫测的,不知mrscon 版主考虑到临床的实际情况没有？——那就是用药以后采集的标本，此时细菌已经遭受重创，无论数量还是繁殖速度上都大大降低，并有大量L型菌体（球形体，腊肠体，丝状体）形成，采用缓冲剂和中和剂的增菌肉汤一是稀释标本中的抗生素浓度，减少抗生素对细菌的毒害，二是给细菌恢复生长创造条件，三是让细菌达到一定数量——所以要选择增菌。
而至于增菌液种类应该是含中和剂和缓冲剂的较好，另外Ca2+、Mg2+能与一些抗生素结合成不溶性盐，而使之灭活，再则Mg2+还能促进细胞壁受损的细菌的自我修复。
而对于增菌时间，在实验室采用未受损伤且生长良好的细菌得出的结果和在临床实际情况下的并不一致：在实验室实验中可能仅仅4~6h就足够的，而在处理临床标本时则就现不足了——因为细菌在遭受抗生素重创后其恢复生长所需的时间（迟滞期）要长得多——这就是著名的“抗生素后效应”啊！
针对PH值下降一说，从培养基配方上分析由于含有葡萄糖（实际量可减为0.5g/L）和甘露醇，细菌生长后的确能产生较多的酸，但由于培养基蛋白胨含量有20g/L之多，分解后还有大量的碱性胺类产生，而且设计了磷酸盐缓冲体系，要在短时间内使培养基PH下降很多似乎也不太可能，加之我们采用的缓冲剂的量是增加了1.5倍了的，所以PH下降也并不是很明显的。不信你可以按我提供的配方（调PH7.4）试试看，就用PH试纸即可，即使到24h的时候PH也不会低于5.0的。 两位版主非常有临床实际意义的讨论！
巴版曾做了大量的研究，针对抗生素后确实一好方法！有一点问题是针对于志贺这类外源性感染，多在抗生素使用前送检，一般菌量较大，我比较同意ＭＲＳＣＯＮ版主的意见，目前我室Robobact自动接种系统大便一般也选择４－６Ｈ增菌后接种！ 同意h版的看法,如能作到抗生素应用前送检,甚至连菌都可以不必增,直接接种阳性率也不会低的.
此时细菌生长非常旺盛,如果是传统GN肉汤,此时的确仅需要4h左右的时间即可. 原帖由 巴斯德之徒 于 2007-6-14 13:05 发表 http://bbs.sific.com.cn/images/common/back.gif
同意h版的看法,如能作到抗生素应用前送检,甚至连菌都可以不必增,直接接种阳性率也不会低的.
此时细菌生长非常旺盛,如果是传统GN肉汤,此时的确仅需要4h左右的时间即可.
谢谢各位版主精彩的讨论，收获不少啊！
目前我院粪便培养的标本主要来自于社区获得性腹泻的病人。由于地处沿海，不同季节，各肠道病原体分离率也不同。
一般粪便不增菌,接接种到BAP、XLD、MAC和TCBS上，如果培养后，未检出常见致病菌，但感染性腹泻症状明显，再重新采集粪便标本接种GN 肉汤，35℃培养 4-6h，再转种MAC、XLD培养基，进一步分离培养。 上传一份老资料，和大家分享！
粪便细菌学检验操作规范
回复 #15 mts 的帖子
50张幻灯片，即便是对院感人员也很有指导意义，可以手持上方宝剑指导临床啦！:lol :lol :lol :lol很有用处
:) :) :) :) 糞便中的致賀氏菌容易死亡, 所以傳送一定要以含輸送培養基的運送管, 保持濕度與快速傳送是非常重要的. 下载学习了，感谢老师 叹息之墙 发表于 2007-6-14 16:09 static/image/common/back.gif谢谢各位版主精彩的讨论，收获不少啊！
目前我院粪便培养的标本主要来自于社区获得性腹泻的病人。由于 ...
我们不增菌，只接种在麦康凯培养基上！{:1_2:}不知道这样做对不对？ 谢谢老师,下载学习了{:1_1:}
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