物表环境采样：依据不同细菌特性选择适配培养基指南
本帖最后由 999欣欣向荣 于 2024-11-3 09:09 编辑物表环境采样：依据不同细菌特性选择适配培养基指南
导读：在物表环境监测中，准确采样并选择适配的培养基对细菌检测至关重要。物表可能存在各种各样的细菌，它们有着不同的特性，这些特性决定了其在特定培养基中的生长情况。正确的培养基选择是获取准确检测结果、有效评估物表卫生状况和潜在健康风险的关键第一步，本指南将详细阐述如何依据不同细菌特性来挑选合适的培养基。
1、物表环境采样培养基有哪些？
1. 营养琼脂培养基- 适用范围：用于多种细菌总数的检测，是一种通用性较强的培养基。它可以培养多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等常见细菌。- 成分优势：含有牛肉膏、蛋白胨等营养成分，能够为细菌提供碳源、氮源和生长因子等基本营养物质，满足大多数细菌生长繁殖的需求。
2. 血琼脂培养基- 适用范围：主要用于链球菌属等细菌的培养和鉴别。通过观察细菌在血琼脂平板上的溶血现象（α溶血、β溶血、γ溶血），可以区分不同种类的链球菌。- 成分优势：在营养琼脂的基础上添加了血液成分，血液中的营养物质丰富，同时为细菌的溶血反应提供了条件，有助于对具有溶血特性的细菌进行鉴定。
3. 伊红美蓝琼脂培养基- 适用范围：常用于检测肠道中的大肠杆菌。大肠杆菌在该培养基上会产生有金属光泽的紫黑色菌落，与其他细菌形成鲜明对比，方便识别。- 成分优势：伊红和美蓝两种染料在培养基中可以与大肠杆菌发酵乳糖产生的酸结合，形成特殊的颜色反应，从而对大肠杆菌进行选择性鉴别。
4. 甘露醇高盐琼脂培养基- 适用范围：主要用于金黄色葡萄球菌的检测。这种培养基可以抑制大多数其他细菌的生长，因为金黄色葡萄球菌能够耐受高盐环境并且发酵甘露醇，使菌落呈现金黄色并使周围培养基变色，便于鉴别。- 成分优势：高浓度的盐可以筛选出耐盐细菌，而甘露醇作为发酵底物，能够根据细菌是否发酵来区分目标细菌和其他细菌。
5. 沙门氏菌 - 志贺氏菌琼脂（SS琼脂）培养基- 适用范围：用于肠道沙门氏菌和志贺氏菌的分离和初步鉴定。沙门氏菌和志贺氏菌在该培养基上形成无色透明菌落，有助于从肠道菌群等复杂环境中筛选出这两种病原菌。- 成分优势：其成分可以抑制革兰氏阳性菌和大部分非致病性革兰氏阴性菌的生长，对沙门氏菌和志贺氏菌有选择作用，同时为这两种细菌的生长提供了必要的营养条件。
6. 沙氏葡萄糖琼脂培养基- 适用范围：适用于真菌的培养，如酵母菌和霉菌。可以检测物表环境中的真菌污染情况。- 成分优势：含有葡萄糖作为碳源，还有其他营养成分，能够为真菌生长提供适宜的营养环境，支持真菌的生长繁殖。
2、物表环境采样常用培养基选择
一、革兰氏阳性菌相关培养基选择1. 金黄色葡萄球菌- 特性：耐高盐，可发酵甘露醇产酸。- 适用培养基：甘露醇高盐琼脂。金黄色葡萄球菌在该培养基上生长良好，菌落呈金黄色，其发酵甘露醇会使菌落周围培养基颜色改变，利于鉴别。2. 链球菌属- 特性：不同种类链球菌在血琼脂培养基上呈现不同溶血现象（α溶血、β溶血、γ溶血）。- 适用培养基：血琼脂。这可以依据溶血情况初步鉴别链球菌种类，为进一步检测提供依据。
二、革兰氏阴性菌相关培养基选择1. 大肠杆菌- 特性：革兰氏阴性短杆菌，能发酵乳糖产酸产气。- 适用培养基：伊红美蓝琼脂。大肠杆菌在这种培养基上会形成有金属光泽的紫黑色菌落，这是因为其发酵乳糖与伊红美蓝染料结合产生特殊显色反应，可与不发酵乳糖细菌区分。2. 铜绿假单胞菌- 特性：可利用乙酰胺作为氮源，产生水溶性色素使菌落呈绿色。- 适用培养基：乙酰胺琼脂。在该培养基上，铜绿假单胞菌能利用乙酰胺生长，且菌落因色素呈现典型绿色，便于识别。3. 沙门氏菌- 特性：不发酵乳糖，有特殊抗原结构。- 适用培养基：沙门氏菌 - 志贺氏菌琼脂（SS琼脂）。沙门氏菌在 SS 琼脂上形成无色透明菌落，该培养基可抑制大部分革兰氏阳性菌和部分非致病性革兰氏阴性菌，利于沙门氏菌分离检测。
三、厌氧菌相关培养基选择1. 双歧杆菌- 特性：厌氧菌，对生长环境要求严格。- 适用培养基：庖肉培养基或在厌氧培养箱中使用改良 MRS 培养基。庖肉培养基中肉渣能吸收氧气营造厌氧环境，MRS 培养基含双歧杆菌生长所需多种营养成分，在厌氧条件下促进其生长。
四、特殊环境细菌相关培养基选择1. 嗜冷菌（如李斯特菌）- 特性：在低温环境有生长优势。- 适用培养基：可选择能在低温环境（如4℃左右）保持一定流动性和营养成分有效性的特殊培养基，如添加了适量营养成分的半固体培养基，保证其在低温下仍能摄取营养。2. 嗜热菌（如嗜热脂肪芽孢杆菌）- 特性：适宜在高温环境生长。- 适用培养基：使用能耐受高温且在高温下保持营养稳定的培养基，同时培养温度要维持在其适宜生长的高温范围（如55 - 65℃），如特定的高温琼脂培养基。
五、真菌相关培养基选择1. 常见真菌（如酵母菌、霉菌）- 特性：与细菌在营养需求和生长环境偏好上有差异。- 适用培养基：沙氏葡萄糖琼脂。它能为真菌生长提供适宜碳源、氮源等营养成分，可用于检测物表环境中的真菌污染情况。
3、正确的培养基选择的好处
一、提高检测准确性
选择性培养基能够抑制不需要的微生物生长，让目标细菌更容易被检测到。例如，在检测肠道致病菌如沙门氏菌和志贺氏菌时，使用去氧胆酸盐琼脂培养基，它可以抑制肠道内大部分正常菌群（如大肠杆菌等）的生长，使沙门氏菌和志贺氏菌能够更突出地生长，从而更准确地被检测出来。
二、有效分离目标细菌
不同的培养基可以利用细菌的不同特性来进行分离。以金黄色葡萄球菌为例，在甘露醇高盐琼脂培养基上，由于其能够耐受高盐环境并且发酵甘露醇产酸，使菌落呈现出典型的金黄色，周围培养基还会变色，这种特性使它和其他细菌区分开来，方便从混合菌群中分离出金黄色葡萄球菌。
三、节省时间和资源
合适的培养基可以减少不必要的筛选步骤。如果想要检测铜绿假单胞菌，使用乙酰胺琼脂培养基，因为这种培养基能够让铜绿假单胞菌利用乙酰胺生长，而其他细菌生长受到限制，就不需要对大量非目标细菌进行后续的鉴别和排除工作，从而节省了在实验室培养和鉴定细菌所花费的时间和人力、物力资源。
四、有助于细菌鉴定
鉴别培养基可以通过细菌在培养基上的生长特征来帮助鉴定细菌种类。比如，在血琼脂培养基上，不同链球菌的溶血情况（α溶血、β溶血、γ溶血）不同，通过观察细菌菌落周围的溶血现象，就可以初步判断链球菌的类型，为进一步准确鉴定细菌提供依据。
五、增强鉴定可靠性一些鉴别培养基可以根据细菌在其上的生长特征来帮助鉴定细菌种类。像在血琼脂培养基上，不同链球菌的溶血情况（α溶血、β溶血、γ溶血）不同，通过观察细菌菌落周围的溶血现象，就可以初步判断链球菌的类型。这种基于培养基特性的鉴定方法为细菌种类的准确判断提供了直观的依据，增强了鉴定的可靠性。 综上所述，依据细菌特性选择合适的培养基是物表环境采样检测工作的核心环节。这不仅需要我们充分了解各种细菌的特殊性质，还需要准确把握不同培养基的功能与适用范围。只有这样，我们才能确保每一次采样都能获得可靠的数据，为环境质量评估和相关卫生决策提供坚实的依据，保障公共卫生安全。
谢谢老师的分享，不是检验出身确实不是很会 微生物室最方便经济常用的是血培养基。如《医院卫生消毒标准》要求采样标本需使用40-45℃的熔化营养琼脂培养基，因其制备过程繁琐复杂，微生物室会使用血培养基代替。各位医院是否也存在这种情况？ 个人觉得如果制备不方便，还是建议老师医院可以购买成品培养基....《医院卫生消毒标准》要求采样标本需使用40-45℃的熔化营养琼脂培养基，应该就不能使用其他培养基作为日常检测，不同的培养基对细菌的检出种类侧重点不同，并且培养合格的判断标准就是以使用琼脂培养基制订的，当怀疑某种细菌与感染相关时应选择楼主指南中相应的培养基.. 可以购买成品培养基....《医院卫生消毒标准》要求采样标本需使用40-45℃的熔化营养琼脂培养基，应该就不能使用其他培养基作为日常检测，不同的培养基对细菌的检出种类侧重点不同，并且培养合格的判断标准就是以使用琼脂培养基制订的，当怀疑某种细菌与感染相关时应选择楼主指南中相应的培养基.. 路过学习了，感谢老师的分享 路过学习了，感谢老师的分享 学习了，感谢老师分享！ 学习了，感谢老师分享！ 路过学习了，感谢老师的分享 学习了，感谢老师分享 感谢老师。{:1_1:} 路过学习了，感谢老师的分享 感谢老师的分享 楼主老师，请问调查环境CRO细菌选择那种培养基？ yanghongmei 发表于 2024-11-29 12:20
楼主老师，请问调查环境CRO细菌选择那种培养基？
老师，是否使用含碳青霉烯类抗菌药物的培养基 学习了，甘雄老师分享！ 医院没有微生物实验室，之前都是送第三方检测机构的，觉得不方便，我们可以自己做培养吗？
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