【感染科普笔记-2024-8-16】俞雪芬丨牙椅水路微生物的多样性分析
本帖最后由 高山雪莲W 于 2024-9-26 14:39 编辑讲者丨俞雪芬（浙江大学医学院附属口腔医院）
整理丨杨静（合肥市口腔医院）
审核丨蓝雪0816
来源丨SIFIC 2023“全国感控与耐药感染”联合大会
牙科手机是口腔科常用的诊疗器械，其使用需通过口腔综合治疗台及牙椅提供一定的水压和气压。研究发现，牙椅水路系统使用1周后，未经消毒的管路中细菌菌落数可高达106cfu/ml，多种致病微生物如铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等以浮游菌和生物膜的形式存在于牙椅水路系统中，可随手机转动时喷出的水雾进入患者口腔，成为口腔诊疗交叉感染的重要因素。深入了解牙椅水路微生物的组成，可为牙椅水路控制污染、探寻良好的消毒方式、建立清洁用水标准提供临床指导。来自浙江大学医学院附属口腔医院的俞雪芬教授为大家带来她的最新研究--牙椅水路微生物的多样性分析。
一、牙椅水路生物膜的形成（—）牙椅内腔管路狭长，消毒不当会导致控制阀内滤膜的损坏，导致漏气、漏水。
（二）牙椅水路生物膜形成的主要原因有：水源污染、回吸污染、管道结构与材质的特殊性、水流停滞等。
（三）生物膜形成有4个过程，除了聚集吸附之外，生物膜成熟以后就会有脱落，脱落的生物膜随着治疗进入到患者的口腔以及喷射到空气当中，对患者和医务人员都会有损伤。
（四）水路污染分三段：手机、三用枪连接管；控制阀-牙椅进水口；水源-牙椅地箱进水口。
二、牙椅水路微生物多样性的多中心研究（一）基本资料该研究共选择7家单位，其中公立口腔医院1家、公立综合医院3家、非公立口腔医院1家、口腔诊所2家，从这7家单位共采集了29个水路和气路的生物膜样本。7家单位中，2家水源为城市供水，5家水源为中央供水；在科室选择上，分别为修复科椅位2张，牙体牙髓科椅位4张，外科椅位3张，正畸科椅位7张，综合科椅位11张，种植科椅位2张，牙椅使用年限1-11年，每日就诊患者数3-20人；所有牙椅均有消毒措施，但消毒方式不同。
（二）研究方法
[*]水路采样：参照浙江省地方标准 DB33/T 2307-2021 《牙椅水路系统清洗消毒技术规范》附录B的要求。
[*]生物膜采样：剪取一段牙椅内部管路。
[*]检测工具：16SrDNA高通量测序、平皿培养后-质谱仪检测致病菌。
（三）结果1. 生物膜样本Alpha多样性分析（1）chao 1 显示的结果为检出的微生物物种的数量，数值越高检出的数量越多；经比较分析，牙椅水路和气路检出的物种数量均较高，两者无统计学差异；不同治疗类型的科室检出的物种数量也较高，对比无统计学差异。（2）Shannon指数代表生物的多样性和它的丰度，丰度即数量，就是单个微生物的单个属种的一个数量，最值在1到10之间，数值越高说明多样性就越丰富。（3）Simpson指数是一种简便的测定群落中物种多样性的指数，是指随机取样的两个个体属于不同种的概率，数值在0-1之间，指数越高，群落多样性越好。（4）Good coverage表示检测的深度，即各样本的覆盖率，其数值越高，则样本中序列没有被测出的概率越低。
生物膜样本Alpha多样性分析
2. Beta多样性分析气路与水路微生物 生物膜样本微生物群落结构相似度比较结果显示，气路与水路之间无差异，不同治疗类型之间的比较也无差异。
3.Beta多样性分析气路与水路微生物（真菌） 结果显示两者之间无差异。
4.物种属水平丰度情况（细菌）：前期的预实验显示，闲置即很少用的牙椅物种属水平丰度与常规用的牙椅物种构成和丰度是不一样的。常规使用的牙椅微生物物种非常丰富，检出约200多种，数量最多的是水螺菌和草螺菌等环境菌；结果中含有很多的条件致病菌，如假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、伯克霍尔德菌、克雷伯氏菌等。
（1）假单胞菌与人类感染有关的主要是铜绿假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、荧光假单胞菌，其中铜绿假单胞菌是重要的院内感染条件致病菌，类鼻疽假单胞菌可引起人和动物的类鼻疽病，荧光假单胞菌污染血液或血制品，可导致败血症或休克。
（2）嗜麦芽窄食单胞菌是重要的医源性感染菌，其分离率仅次于铜绿假单胞菌和鲍曼氏不动杆菌，广泛存在于水，土壤，动物体内。随着临床抗生素和免疫抑制剂的广泛和大剂量应用，其分离率在非发酵菌属中呈上升趋势。该条件致病菌的易感因素包括：体弱、免疫功能低下、外伤、插管、手术、移植、使用呼吸机等。
（3）伯克霍尔德菌，人类可通过伤口、黏膜、呼吸道途径而获得感染，急性患者可有高热、衰竭等全身症状，病菌进入血流可形成菌血症及内脏脓肿，最后常因脓毒血症死亡。
（4）克雷伯氏菌属于肠杆菌科，寄生于呼吸道或肠道，是医院最常见的条件致病菌，是引起人类肺炎的病原菌之一。
5.物种属水平丰度情况（真菌）：物种非常丰富，主要有马拉色霉菌属、酵母菌属等。
小结牙椅管路的微生物物种是多样性的，研究显示致病菌的数量和丰度都是比较高的，条件致病菌的检出率也很高，要引起足够的重视。口腔虽然是一个带菌的环境，但不能认为我们在日常的管理或者治疗过程中不需要关注。口腔治疗导致的感染国际上已经有很多的报道，我国门诊感染病例的上报是比较欠缺的，不像住院病人感染以后都会上报，但是不上报并不代表没有感染，尤其像微创拔牙等治疗后导致的感染，需要引起关注。目前大部分牙椅管路都是有消毒措施的，但仍然能检出很多的细菌，主要因为生物膜的存在影响了牙椅管路的消毒效果，所以在牙椅处理之前的最关键因素要首先解决生物膜的污染。
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