【感染科普笔记2022-11-9】顾莹丨涂抹法、六联滤膜法及一次性滤膜法检测软式内镜消毒
本帖最后由 999欣欣向荣 于 2024-9-26 11:12 编辑顾莹丨涂抹法、六联滤膜法及一次性滤膜法检测软式内镜消毒效果的比较研究https://mp.weixin.qq.com/s/kLuxRvMJKvQycAngM4D6PQ
讲者丨顾莹（江苏省泰州市姜堰中医院）
整理丨邓君艳（重庆市云阳县中医院）审核丨王世浩（山东中医药大学第二附属医院）来源丨2021年SIFIC全国感控与耐药感染大会
前言：运用实验法对涂抹法、六联滤膜法及一次性滤膜法对软式内镜清洗消毒效果及终末水进行检测，比较三种检测方法的合格率、菌落检出率、耗时及费用，从而选择出合适的内镜清洁消毒方法。
一、研究背景消化道疾病诊疗中，内镜技术是使用较频繁、应用较广泛的技术之一。为了保证患者医疗安全，减少医院感染的发生，确保消化内镜的灭菌效果以及加强消毒质量监测成为我们的首要任务。
2016年卫生行业标准《软式内镜清洗消毒技术规范》(WS507--2016)颁布以来,使用滤膜法检测内镜清洗消毒效果的技术引起了各个医疗机构的广泛关注，许多厂家基于滤膜法原理也相继研发了多种检测仪器。
二、研究目的为医疗机构合理选择内镜清洗消毒效果检测方法提供参考依据，选出合适的清洁消毒方法。
三、研究对象涂抹法，六联滤膜法，一次性滤膜法对软式内镜清洗消毒效果及终末水监测效果。
四、研究方法
[*]第一阶段使用了涂抹法和六联滤膜法每天对所有内镜进行检测。
[*]第二阶段使用涂抹法和一次性滤膜法每天对所有内镜进行检测。
根据《医院消毒卫生标准》(GB15982-2012)要求：
[*]第一阶段：取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50mL含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集至无菌容器内并送检。终末水采用无菌注射器取水样100ml于无菌容器内全量送检。
[*]第二阶段：取清洗消毒后内镜，采样无菌注射器抽取50m[洗脱液，从上端口注入冲洗内镜管路冲洗，并通过内镜检测取样泵将洗脱液全量回收至一次性集菌器。终末水直接通过内镜检测取样泵将洗脱液全量回收至一次性集菌器。终末漂洗水微生物学监测方法：各取水样50ml于无菌过滤杯内，分别用以下三种方法进行检测，取下滤膜分别贴附于TGEA培养基(当中不得留有气泡)置于20°C恒温箱培养168h，计数菌落数(CFU/100ml)。
[*]涂抹法将洗脱液充分混匀，取洗脱液1.0mL混匀液于2个凝固的营养琼脂平皿，36℃恒温箱培养48h。
[*]滤膜法将剩余洗脱液(49.0mL)在无菌条件下采用滤膜(0.45μm)过滤浓缩，将滤膜接种于凝固的营养琼脂平皿上，置于36℃恒温箱培养48h，计算菌落数。
结果计算：当滤膜上的菌落可计数时：内镜上总菌落数(CFU/件)=两平行平皿的平均菌落数+滤膜上菌落数；当滤膜上的菌落不可计数时，菌落总数(CFU/件)=两平行平皿的平均菌落数×50。合格率=菌落数合格内镜数/总采样内镜数×100%；检出率=培养出菌落的内镜数总采样内镜数×100%。
一次性滤膜法取清洗消毒后内镜，采样无菌注射器抽取50mL洗脱液，从上端口注入冲洗内镜管路冲洗，并用一次性内镜检微生物检测仪在下端全量回收中和洗脱液，并在无菌条件下采用滤膜(0.45μm)过滤浓缩，将滤膜接种于凝固的营养琼脂平皿上，置于36℃恒温箱培养48h，计算菌落数。过滤之前取洗脱液1.0ml混匀液于2个凝固的营养琼脂平皿，36℃恒温箱培养48h。
结果计算：当滤膜上的菌落可计数时：内镜上总菌落数(CFU/件)=两平行平皿的平均菌落数+滤膜上菌落数；当滤膜上的菌落不可计数时，菌落总数(CFU/件)=两平行平皿的平均菌落数×50。合格率=菌落数合格内镜数总采样内镜数×100%。检出率培养出菌落的内镜数/总采样内镜数×100%。
合格标准根据《医院消毒卫生标准》(GB15982---2012)和《软式内镜清洗消毒技术规范》(WS507--2016)要求：
[*]消毒内镜合格标准:菌落总数≤20CFU/件。
[*]终末水(纯化水)应符合GB5749的规定:细菌总数≤10CFU/100ml。
质量控制及统计学分析两阶段均采用涂抹法进行比较分析，既可以进行三种检测方法的比较，同时也能够得出两阶段内镜清洗消毒效果的差异，从而客观反映两阶段清洗环节质量控制效果。采用STATA15.0软件进行统计分析，采用×2检验对三种检测方法的软式内镜清洗消毒效果及终末水检测结果的合格率及菌落检出率进行分析，检验水准a=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。
五、研究结果两阶段涂抹法合格率比较：检测终末水和软式内镜13根，其中胃镜4根、肠镜4根、纤支镜5根。第一阶段涂抹法与第二阶段涂抹法的检测合格率分别为93.07%、92.08%，差异没有统计学意义(P>0.005)。
三种检测方法合格率比较注：Pa值为三种检测比较，Pb值为六联滤膜法和涂抹法比较，Pc值为一次性滤膜法和六联滤膜法比较，Pd值为一次性滤膜法和涂抹法比较。
检测软式内镜、终末水合格率，涂抹法(93.07%)高于一次性取样法(85.15%）高于六联滤膜法(73.27%)，差异有统计学意义(P<0.005)。
三种检测方法菌落检出率比较：注：Pa值为三种检测比较，Pb值为六联滤膜法和涂抹法比较，Pc值为一次性滤膜法和六联滤膜法比较，Pd值为一次性滤膜法和涂抹法比较。
检测软式内镜、终末水菌落数检出率,滤膜法(75.62%)高于一次性取样法(61.39%)高于涂抹法(10.06%)，差异有统计学意义(P<0.001)。
三种方法接种的成本比较：软式内镜、终末水使用三种检测方法的费用每年分别约为:一次性滤膜法1800元、六联滤膜法1200元、涂抹法500元。
本研究显示：
[*]三种方法的合格率涂抹法(93.07%)最高，其次是一次性滤膜法(85.15%)，最低为滤膜法（73.27%）。
[*]三种方法的菌落检出率六联滤膜法(75.62%)最高，其次是一次性滤膜法(61.39%)，最低为涂抹法(10.06%)。
[*]一次性滤膜法和六联滤膜法可以更容易培养到内镜洗脱液中的细菌。
六、结论虽然后两种方法较涂抹法花费增加了数倍，但是提高了内镜清洗消毒不合格的检出率，一次性滤膜法成本最高,使用方便，简洁的内部管路避免微生物滋生，一次性集菌器无菌包装，取模方便，结果更为可靠，更能准确反映内镜清洗消毒质量。
本研究建议有条件的医疗机构积极使用一次性滤膜法进行检测，及时发现工作中存在问题，提高清洗消毒质量。
感悟顾莹教授通过分享涂抹法、六联滤膜法及一次性滤膜法检测软式内镜消毒效果的比较研究成果，让我们直观的感受到各种内镜清洁消毒效果检测方法之间的差异，为大家今后选择内镜清洗消毒效果检测方法提供有力的参考依据，使我们能够根据自己医疗机构的现状选择适合的内镜清洗消毒效果检测方法。
图文：王小虾
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