ATP检测面面观
ATP检测面面观ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理,利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少,用于判断卫生状况。
清洗是灭菌合格的前提。清洗和灭菌都能够降低复用器械表面的生物负荷,不过两者的作用过程不同。清洗是通过去除的方法,将污染物和微生物等从表面移除;而灭菌则是通过物理或化学方法,将微生物杀灭在表面。两者相结合能够起到最佳的效果。频繁的感染暴发事件说明,如果清洗质量不过关,会严重影响灭菌的质量。WS 310.3-2016中对于清洗效果评价做出了新要求:4.2.1.3 清洗效果评价 可定期采用定量检测的方法,对诊疗器械、器具和物品的清洗效果进行评价。在清洗效果的评价手段中,ATP荧光监测法是最近几年备受关注的方法。因其结果读取时间短,结果可量化,采样简单方便等特点,受到了越来越多人的重视,但是在应用中也产生了一些疑问。
为什么选择监测ATP值?
目前在消毒供应中心,清洗质量监测主要仍依靠目测的方法。但是,残留在器械上的有机物、微生物等等单靠肉眼是看不到的。同时,一些带管腔、空隙等结构的器械也很难靠肉眼观察。因此需要测定清洗监测标志物来确认清洗效果,以弥补肉眼的不足。ATP就是清洗监测标志物的一种,类似的标志物也有很多,比如蛋白质是蛋白测定的标志物,血液则是潜血法的标志物。ATP作为一种广泛存在于细胞中的物质,监测的方法比较简单,快速,可重复性强,同时具有一定的代表性,因此用在很多场景中,以监测清洁水平。
ATP分子长这个样子
RLU是什么?RLU是“相对光单位”的意思,该值是一个没有单位的数值,不是国际单位,表示的是发光的强度。同一个ATP荧光监测仪所测量出的RLU越大,表明其荧光强度越高,ATP含量越多,器械的清洁程度也越差。由于不同生产厂家的ATP荧光监测仪表示的1 RLU所代表的光强度不同,因此不同的ATP监测仪读出的RLU值没有可比性。那么如何确定测出的RLU值是否合格呢?这就需要确定一个RLU的合格阈值。就像考试需要一个及格线一样,ATP监测也需要一个合格阈值。由于不同厂家的RLU没有可比性,所以其RLU阈值也不同,如甲的合格值是150RLU,乙的合格值是20RLU,丙的合格值是500RLU。不同的RLU值之间如何比较,要看其得出阈值的方法。比如有的是实验室确定的,缺乏临床实践;有的是通过文献研究总结的;有的是在临床实践中得到的,具有权威机构确认的;还有一些已经成为了规范或指南的推荐值。显然,越贴近实际和指南推荐其阈值越有应用价值。ATP 测定方法目前尚无标准,正在制定过程中清洗效果监测的目的就是要验证现有的清洗流程是否安全可靠,清洗后复用器械上的污染物残留量是否下降到了可以接受的水平。科学合理的选择和应用清洗效果监测的方法,有助于消毒灭菌全流程的质量控制。ATP法测定细菌含量 原理及方法
ATP消除剂ATP消去剂(又称体细胞消去剂)能够裂解非细菌的细胞,并水解非细菌产生的游离ATP,消除细菌外ATP的干扰。采样及并消除非细菌细胞产生的ATP采样及静置过程中,ATP消除剂裂解非细菌的细胞,并水解细菌外的游离ATP;细菌ATP受到细胞壁的保护,免受水解。细菌裂解
被消除剂处理后不含游离ATP的拭子用细菌裂解液浸润;细菌裂解液在中和ATP水解酶同时,将细菌裂解,释放ATP。ATP检测液
ATP存在情况下,检测液中的荧光素酶将荧光素氧化,反应中的能量以光子的形式释放;使用BT-112D荧光检测仪可测定反应的相对发光值RLU,通过加入一定量的标准品可定量测定ATP的残留量;细菌ATP的化学发光检测
检测ATP标准品发光信号
细菌数计算
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