新书推荐：实验技术中的“惑”与“获”
《实验技术中的“惑”与“获”》的特色：每节一个案例，围绕“背景-困惑-探索-收获-箴言”框架叙述；每个案例后面附有作者邮箱E-mail，便于读者今后与编者进行交流探讨；内容覆盖面广，包括核酸技术、蛋白质技术、细胞技术、微生物与免疫技术、动物技术、海外实验室技术和临床检验技术；邀请海外学者专门就海外实验室常规技术问题进行案例解析；书后附有许多案例中涉及的从失败到成功的精彩图片（客观证据）；本书编写人员由国内外实验室中实验一线的年轻教师、研究生和实验人员等组成，最后由潘世扬和王玮教授主审，进一步确保本书的质量。《实验技术中的“惑”与“获”》前言
目前，各研究单位、高校和医院对科学研究越来越重视，对SCI论文、课题及成果的要求也水涨船高，而这一切往往都依赖于一个又一个的实验。作为科研主力军的研究生们整天挣扎在实验室中，为了拿到满意的实验结果而废寝忘食。实验技术的设计和操作是一个不断探索与总结的实践过程，即使是参考书或文献中看似非常成熟的操作技术，都有可能怎么也得不到预期的结果。在这些实践和探索过程中的每一个细小环节的盲点都可能导致我们一筹莫展，每一个细小环节都值得我们深入地探究和总结。在实验过程中，我们常常会碰到诸多“困惑”，在消除困惑的过程中，又必然会或多或少有一些“心得与收获”。
常言道：“失败是成功之母”。实验一线的科研人员几乎个个都有失败的经历，都曾面对着一个又一个困惑。那么，如何才能从这些困惑中寻找到“柳暗花明又一村”的解决方案，去收获成功呢？曾经在实验中尝过失败滋味的科研人员，最终收获成功的话，其中一定有很多来之不易的“秘诀”。我们将丁香园站友们的诸多“秘诀”汇集成册，这将是一本关于实验技术的“宝典”。
本书共收录了193个实验技术中的案例，分为核酸技术、蛋白质技术、细胞技术、微生物与免疫技术、动物技术、海外实验室技术和临床检验技术这六篇，每篇里又分了章和节，分门别类，条理清晰。本书100多名作者大多为丁香园网站站友，来自包括北京协和医学院、南京医科大学第一附属医院、南京大学医学院、浙江大学医学院等50多家医学院校、科研单位和医院，并得到了美国内布拉斯加医学中心大学的大力支持，为本书提供海外实验室技术案例。本书的案例，都是筛选来自基础医学、生命科学或检验医学一线科研人员在实验室操作过程中遇到的一些典型例子，内容有简单的仪器使用心得体会，也有对细胞培养技术的总结，动物损伤模型建立失败后的探索，分子生物学实验细节的剖析，还有临床检验结果失真的分析等。每一个案例从操作背景开始分析，到出现困惑，并一步步探索出解决方案，作者提出一些心得收获并进行拓展，最后得出箴言。编者均以极大的热情进行案例的整理、分析与写作，分享自己的经验与教训，案例素材均来源于日常实验工作，具有绝对的原创性与真实性。写作形式上采用“背景”、“困惑”、“探索”、“收获”和“箴言”的格式，写作风格上注重专业性与文学性的结合统一，语言生动活泼。犹如讲故事一样，引领读者一步步发现问题、分析问题和解决问题，从而读者可以轻松愉悦地掌握一个个实验技术的要领。
本书所有案例都是工作中遇到的真实案例，在朴实和灵活的写作过程中为读者提供一种发现问题、解决问题的思路，给读者以启发，能够快速准确地发现并解决类似问题；另一方面也提示年轻医务工作者在工作中做一个“有心人”，勤于动脑和动手，遇到问题要学会思考，学会积累，积少成多，逐步锻炼科研能力。从另一个层面分析，困惑少了、假阴性、假阳性避免了，我们可以把更多的精力投入到保证实验结果的质量上去，出错概率随之降低，可极大提高工作效率。
希望本书能为实验人员在实验选题、实验设计、实验操作、资料搜集和结果分析等方面提供借鉴与帮助；希望本书能进一步推动国内实验人员实验技术水平。由于本书中的案例具有“跨学科性”，仅仅掌握本研究方向的知识往往是不够的，在系统阅读的过程中，亦是一次实验技术知识不断积累的过程。最后，本书也可作为研究生、本科生高等教育有关实验技术的教学和实践辅助参考书，将实验技术的各个知识点溶入到医学教育中，让实验人员真正拥有攻克实验盲点的秘诀。
在本书付梓之际，感谢人民卫生出版社和丁香园网站为本书出版所做出的努力与支持！感谢所有参与编写的人员，你们宝贵建议是本书进一步完善的源泉，你们的辛勤劳动与默默付出是本书质量的重要保证！感谢南京医科大学医学检验系和安徽医科大学的部分教师与学生们，他们参与了大量的校稿工作。由于编者能力所限，书中难免有疏漏之处，恳请广大读者不吝剔教，以使本书更趋完善。
顾兵 王 华 王汉军
2012年8月 《实验技术中的“惑”与“获”》目录
第一篇 核酸技术
第一章 DNA提取和鉴定技术
第一节如何获得高产量DNA
第二节乙醇沉淀核酸中盐的作用
第三节核酸抽提中乙醇洗涤的作用
第四节 DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
第五节荧光素酶双报告基因中调节目的质粒与内参质粒比例是关键
第二章 RNA提取技术
第一节如何提高RNA提取质量
第二节如何提高总RNA纯度和产量
第三节 RNA纯度对荧光定量RT-PCR准确性的影响
第四节组织反复冻融易致RNA降解
第五节谁动了我的细胞RNA
第六节如何使博落回总RNA提取纯度更高、量更大？
第三章质粒提取和构建技术
第一节质粒DNA提取实验的细节深究
第二节质粒DNA电泳有几条带
第三节质粒构建
第四节灵活酶切以玩转克隆
第五节分子克隆方法——细节决定成功
第四章PCR技术
第一节以V2R为例设计引物并使用BLAST验证
第二节引物设计惑与获
第三节引物二聚体终于消失了
第四节 PCR扩增实验污染的惨痛教训
第五节如何减少PCR产物中的引物二聚体
第六节昙花一现的PCR结果
第七节如何获得完美的荧光定量PCR结果
第八节实时荧光定量PCR中荧光定量标准曲线很重要
第九节 MicroRNA的荧光定量PCR检测之我见
第十节残缺的芯片扫描图
第十一节 “假阳鬼子”和“拦路虎”
第十二节 PCR扩增攻略
第二篇 蛋白质技术
第一章 蛋白质电泳技术
第一节讨厌的波浪线
第二节冬天里的一把火
第三节当头棒喝！蛋白质双向凝胶电泳聚不上焦
第四节蛋白质双向凝胶电泳横条纹的教训
第五节蛋白质双向凝胶电泳聚焦后胶条的白色霜状析出
第六节蛋白质双向凝胶电泳弥散的蛋白质点
第七节 Clean up失效后的思考
第二章 Western blotting方法
第一节 Western-blotting变成了Western-lost
第二节高背景被“擦”掉了
第三节 “祸起萧墙”——豁然开朗
第四节蛋白条带不给力
第五节蛋白抗体不给力
第六节蛋白抑制剂不给力
第七节令人费神的磷酸化蛋白的WB检测
第八节如何使样品间内参趋于一致
第九节为了那比金子更贵的抗体
第十节 Western Blot——多个环节需注意
第三章 蛋白质免疫鉴定技术
第一节都是封闭血清惹得祸
第二节免疫荧光实验技术之我见
第三节免疫共沉淀实验的独门秘笈——精选“手术刀”去除免疫球蛋白条带
第四章 蛋白质纯化和蛋白质晶体技术
第一节 试剂说明书不是“金标准”
第二节沉淀、沉淀，不要再见
第三节 拨开乌云见天日——从蛋白质微晶到晶体
第三篇 细胞技术
第一章细胞培养的基本技术
第一节特别的爱给特别的你
第二节谁动了我的细胞
第三节如何成功进行大鼠肺动脉平滑肌细胞的体外培养
第二章细胞污染
第一节神马污染
第二节恼人的小黑点
第三节谁是细胞污染的元凶
第四节黑胶虫，请别来找我
第三章细胞活力检测
第一节 “鱼”和“熊掌”不可兼得
第二节走自己的路，莫轻易盲从
第三节 MTT结晶溶解很重要
第四节不断探索，寻找最佳实验条件
第四章细胞凋亡检测
第一节 DAPI染核中细胞固定的重要性
第二节避免非特异染色
第三节胰酶消化制备单细胞悬液
第五章流式细胞术
第一节是谁悄悄蒙上了你的眼睛
第二节动态观察，多思多得
第三节都是染料惹的祸
第六章相关技术
第一节 “厚此”≠“薄彼”
第二节向左转？向右转？
第三节染色体制备心得
第四节为什么单个核细胞分离得率不高
第五节如何采用CPT管成功的分离外周血单个核细胞
第四篇 微生物与免疫技术
第一章微生物技术
第一节 众里寻他千百度——厌氧菌的培养经历
第二节 脂多糖银染的的技巧
第三节 关于重复实验的几点看法
第四节 搅拌转速对发酵生产的影响
第五节 都是更换生产品种惹得祸
第六节 发酵罐染菌的原因分析
第七节 快速准确知晓靛基质试验结果的巧方法
第八节 变形杆菌属与其它菌属的分离方法
第二章免疫技术
第一节成功中的失败
第二节阳性对照也很重要
第三节酶标板今天“唱白脸”
第四节不要被OD值的大小所迷惑
第五节 “即刻法”的前两点
第六节加样仪惹得祸
第七节 “鱼”与“熊掌”兼得的梅毒检测方法
第八节人兔和谐，共用抗体
第九节我的兔子谁做主
第十节当空白对照不再空白
第十一节自噬体的检测方法
第五篇 动物技术
第一章纲举目张——建模心得
第一节实验动物模型选择
第二节发育损伤模型屡遭失败后的原因探讨
第三节兔VX2肿瘤模型构建方法改进
第四节等长收缩时的力量与持续时间问题
第五节可控水囊的妙用
第六节急性胰腺炎造模方式的选择
第七节颌关节定量加力模型的建立始末
第八节大鼠脑立体放射治疗模型制作
第九节大鼠放射性肺炎模型的制作
第十节 小鼠肿瘤放疗模型的制作
第十一节 放射性食管损伤模型制作
第十二节痉挛模型中“撞”来的成功
第十三节移植排斥需谨慎
第二章未雨绸缪——实验准备
第一节动物实验前的准备
第二节纪念降脂试验中牺牲的大鼠兄弟们
第三节溶血与凝聚试验中血的代价
第四节吸入染毒装置的改良
第五节与猫配合的降压试验
第六节 如何进行裸鼠移植瘤的无菌照射
第三章画龙点睛——实验技巧
第一节柳暗花明又一村——中药体内实验感悟
第二节可怕的过敏试验
第三节 祛痰试验方法的改进
第四节如此方便的静脉给药途径
第五节大动物实验生命体征监测及相应处理的重要性
第六节小鼠长期多次采血经验荟萃
第七节浅谈“非标准状态”下大鼠脑定位技巧
第八节拨出肠管与否对肝切除术后大鼠生存时间的影响
第九节脑立体定位中轻松插耳杆
第十节九月份的尾巴是天秤座
第四章知己知彼——动物习性
第一节剖析行为学实验中容易忽略的细节
第二节你熟悉实验动物的生活习性了么？
第三节向清醒状下的大鼠脑内给药方法探讨
第六篇 海外实验室技术
1. Brain slice
2. Array-comparative genomic hybridization (array CGH)
3. Confocal Microscopy for Live Cell Imaging
4. Coronary Artery Ligation on Mice
5. Decerebration in Rodents
6. In-situ Carotid Sinus Nerve Electrophysiological Recordings
7. Extracellular Single-unit Recording in vivo
8. Fluorescence in situ hybridization on formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections
9. Isolation and culture of alveolar macrophage and peritoneal mast cell
10. Acute Renal nerve activity recording on an anesthetized rat
11. Renal Blood Flow Recording in an Acute Anesthetized Preparation
12. Chromatin Immunoprecipitation
13. PCR/RT-PCR/Q-PCR
14. Single-Fiber Recording of Skeletal Muscle Afferents
15. Co-Immunoprecipitation and Western Blotting Techniques
第七篇 临床检验技术
第一章临床血液学与临床基础检验技术
第一节 CA500血凝仪遭遇神奇“不凝门”
第二节 LH750血液细胞分析仪异常白细胞分类
第三节全自动血液分析仪血小板计数误差及处理
第四节血沉仪使用问题的分析
第五节血液细胞分析仪白细胞不能分类的祸首是棉絮
第六节血小板检测的思考
第七节温度导致血常规结果出现问题
第八节纤维蛋白原时序性减少的原因分析
第九节神马导致纤维蛋白原检测结果都偏低
第十节难以对付的疟原虫厚片染色技术
第十一节脑脊液沉渣涂片制作巧方法
第十二节染出满意的血涂片的一点心得
第十三节前列腺液取不出怎么办
第十四节巧用尿试纸节省试剂成本
第十五节高血压三项特殊真空管的制作
第十六节人精子染色体制备技术
第十七节 如何使用分离胶管制备高质量血清标本
第二章临床输血检验技术
第一节肝素抗凝血导致交叉配血不合
第二节反定型U型板法的惑与获
第三节 O型夫妇为何生出B型儿子？
第四节交叉配血相合为什么不能发血？
第五节新配的2-巯基乙醇失效了吗？
第六节找到致病抗体为何不能发阳性确认报告？
第七节是阴性？弱D？还是阳性？
第三章临床生物化学与分子生物学检验技术
第一节镁离子结果怎么不美了？
第二节谁对血清镁的结果施了魔法？
第三节前后的“我”为何不一样
第四节无机磷异常升高的原因-----------关于全自动生化仪交叉污染的发现和处理
第五节血清磷测定结果假性升高原因分析及解决办法
第六节住院患者怎么都缺钙了？
第七节 HITACHI 7180全自动生化分析仪杯空白报警的惑与获
第八节 UPS电源对生化仪电解质模块的影响
第九节 “回收实验”在样本结果复查中的妙用
第十节莫名其妙的血钾升高血糖降低------不严格执行SOP记录的教训
第十一节前清蛋白，你为什么总会出现负值？
第十二节谁偷走了他们的前白蛋白
第十三节透过“乳糜”测本质
第十四节标本存放数天后葡萄糖含量不降反升
第十五节一份标本，两个医院，结果相差近20倍！
第十六节风扇的巧妙用处――如何发挥老仪器的余热
第十七节强生生化350的一个秘密
第十八节 AVL血气分析仪提高试剂使用效率方法探讨
第十九节 ALT与AST分道扬镳谁的错
第二十节 神马让清洗管内堵满了绿色浮云？——关于生化仪清洗管堵塞原因探究和排除的报道
第四章临床免疫学检验技术
第一节厂家给的参数就正确吗？
第二节离奇的“张冠李戴”——关于BN-Ⅱ特定蛋白仪发生结果异常的报导
第三节失灵的“金标准”
第四节铁蛋白检测结果异常的分析
第五节为什么消化道出血的患者粪便隐血结果却为阴性？
第六节质控正常结果可靠吗？
第七节同样做校准，结果却不同 细菌耐药 发表于 2013-4-7 09:23 static/image/common/back.gif
《实验技术中的“惑”与“获”》目录
第一篇 核酸技术
向主编申请赠送一本!{:1_17:}辛苦!向您学习。 非常精彩的一本书。早想一睹为快了。{:1_12:}
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